Mándoki - Állatorvostudományi Doktori Iskola - Szent István ...
Mándoki - Állatorvostudományi Doktori Iskola - Szent István ...
Mándoki - Állatorvostudományi Doktori Iskola - Szent István ...
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
2. ÖSSZEFOGLALÁS<br />
Az avian nephritis vírus okozta kórkép a baromfi egy kevéssé vizsgált, de széles körben<br />
elterjedt, gazdaságilag jelentıs fertızı betegsége, amely makroszkóposan is felismerhetı<br />
morfológiai elváltozásokat hoz létre. A baromfiállományok állatorvosi felügyelete során<br />
gyakran tapasztalható heveny veseelégtelenségbıl, illetve köszvénybıl adódó tömeges<br />
elhullás, azonban a kiválasztás jellegzetességei miatt számos oka lehet ilyen veseelváltozás<br />
létrejöttének. A tanszékünkre bekerülı napos baromfi hullaanyag vizsgálata során felmerült<br />
egy vesekárosító fertızı ágens esetleges jelenlétének, a néhány országban már leírt avian<br />
nephritis vírus okozta fertızésnek a gyanúja. Ez a gyanú alapozta meg a specifikus<br />
diagnosztika iránti igényt, az egyéb más okok által elıidézett köszvénytıl való elkülönítést,<br />
és az avian nephritis vírus jelenlétének megerısítését vagy kizárását.<br />
Mivel a köszvényes elváltozást mutató hullák egy részének kórbonctani és<br />
kórszövettani diagnosztikai vizsgálatával egyértelmően vírusos megbetegedésre utaló<br />
elváltozásokat állapítottunk meg, kiegészítı transzmissziós elektronmikroszkópos vizsgálatot<br />
végeztünk, amely során kb. 28 nm nagyságú, öt- vagy hatágú csillagra emlékeztetı alakú,<br />
ikozaéder felépítéső nukleokapsziddal rendelkezı, burok nélküli virionok jelenlétét mutattuk<br />
ki a tubuláris hámsejtekben, ami ANV fertızés okozta vesekárosodásra utalt.<br />
A génbankban közölt teljes ANV genomszekvencia (NC_003790) alapján az 5' nem<br />
kódoló régióra primereket terveztünk. A specifikus, reverz transzkripciót követıen polimeráz<br />
láncreakció (RT-PCR), majd egy nested PCR segítségével a referencia törzsön kipróbáltuk és<br />
optimalizáltuk a reakciót. Az állat-egészségügyi diagnosztikai intézetekben ırzött korábbi<br />
vizsgálati anyagokban, valamit számos, nephritisben szenvedı csirkeállományban vizsgáltuk<br />
az ANV jelenlétét. A képzıdött, 816 bázispár hosszúságú terméken direkt nukleinsav-<br />
szekvencia meghatározást hajtottunk végre. A kapott nukleinsav szekvencia a legnagyobb,<br />
92%-os hasonlóságot az ANV-hoz mutatta, ezzel igazoltuk, hogy az amplifikált termék<br />
valóban a mintában jelenlévı vírus nukleinsav alapján képzıdött (<strong>Mándoki</strong> és mtsai, 2006b).<br />
2002 és 2005 között különbözı baromfitartó telepekrıl behozott, különbözı korú,<br />
fertızöttségre gyanús hullákból elsısorban vese- és vékonybél-mintákat győjtöttünk,<br />
amelyeket állományszintő szőrıvizsgálatra keverten, részletes szervi vizsgálatra egyedenként<br />
homogenizáltunk és RNS-t tisztítottunk belılük. Az így létrehozott és megvizsgált<br />
mintacsoportokból győjtöttük a pozitív eseteket.<br />
Mivel a késıbbiek során a nagyobb specifikusságú és érzékenységő rendszert<br />
fejlesztettünk ki, és kedvezıbb primertapadási helyeket sikerült azonosítani, új primereket<br />
6
Change language