Mándoki - Állatorvostudományi Doktori Iskola - Szent István ...

6.6. RT-PCR vizsgálatok
Az ANV specifikus RT-PCR reakcióval a vizsgált 53 baromfitelep közül 33 esetben
találtunk pozitív szervmintákat (7. táblázat). A különbözı korú, a betegség tüneteit, illetve a
kórbonctani elváltozásokat mutató állatok veséjébıl, thymusából, pancreasból és
vékonybélszakaszaiból sikerült kimutatni az avian nephritis vírus jelenlétét.
7. táblázat: A pozitív esetek összesítı táblázata
Vizsgálatokat végzı intézmény
47
Összes minta
száma
Vizsgált telepek
száma
Pozitív
telepek
SzIE ÁOTK Kórbonctan 42 25 17
Országos Állategészségügyi Intézet 37 15 7
Kaposvári Állategészségügyi Intézet 25 11 8
Debreceni Állategészségügyi Intézet 4 2 1
Állatgyógyászati Oltóanyag, Gyógyszer-
és Takarmányellenırzı Intézet
5 - -
ÖSSZESEN: 113 53 33
A PCR reakció specificitását úgy ellenıriztünk, hogy valamennyi mintát többször
ellenıriztünk, mindegyik különbözı primerpárral megvizsgáltuk és a kapott eredmények az
ismételt tesztek során megegyeztek. A kapott termékek ANV-sal való egyezését direkt
nukleinsav sorrend meghatározással támasztottuk alá. Mivel a génbankban csak egy
vírustörzs nukleinsav sorrendje szerepel és nekünk is csak viszonylag rövid genomszakaszok
álltak rendelkezésre, nem volt lehetıség a PCR reakció érzékenységének további
vizsgálatára. Vizsgálataink és a szekvencia elemzés alapján a használt primerek mindig
specifikusan az avian nephritis vírus genetikai anyagához tapadtak.
Három esetben vizsgáltunk meg polimeráz láncreakcióval olyan csirke veseszövet-
homogenizátumot, ahol a vírusfertızés gyanúja nem merült fel. A vizsgálatra beküldött,
különbözı telepekrıl származó 4, 9 illetve 10 napos korú csirkék a kórbonctani elváltozások
szerint veseelfajulásban és köszvényben pusztultak el, de a kórszövettani vizsgálat alapján
toxikus eredető tubulushám-sejt károsodást diagnosztizáltunk. A PCR vizsgálat során egyik
esetben sem mutattuk ki ANV specifikus nukleinsav jelenlétét.