1 MIKROBIOLÓGIAI GYAKORLATOK TEMATIKÁJA III. éves ...

1
MIKROBIOLÓGIAI GYAKORLATOK TEMATIKÁJA III. éves fogorvostanhallgatók
számára
2011/2012.
I. félév
1. Szept. 12. 13. Bevezetés - Általános tudnivalók- A laboratóriumi munka szabályai.
Mikroorganizmusok morfológiája.
* Natív készítmények (lapos csepp: élesztı szuszpenzióból.)
* Vitális festés.
* Kenetkészítés, egyszerő és Gram festés (B. cereus, S. epidermidis, E. coli)
* Foglepedékrıl kenetkészítés és festés
2. Szept. 19-20. Baktériumok tenyésztése.
* Táptalajok (táptalajöntés: agar-, véres agar- és csokoládé agar lemez,
magas és ferde táptalaj). Differenciáló és szelektív táptalaj
(eozin-metilénkék)
Anaerob tenyésztés: anaerosztát, GasPack, Holman-,
tioglikolátos táptalajok. Anaerob manipulációs kamrák
* Makroszkópos telepvizsgálat (S. epidermidis, S. aureus, S. pyogenes,
S. mitis, E. coli, Proteus, Klebsiella, P. aeruginosa, Serratia, H.
influenzae, B. cereus)
* Átoltás gyakorlása készen leadott táptalajokra
(lemez, magas és ferdeagar, bouillon: S. epidermidis, E. coli,
Klebsiella)
* Transzportközeg, transzport táptalaj, hemokultúra
3. Szept. 26-27. Az elızı heti leoltások értékelése
* Sterilezés és dezinficiálás. A különbözı fizikai és kémiai
módszerek bemutatása: szőrık, autokláv és plazma sterilizálás.
Ellenırzı tesztek: festék, Bacillus spórakészítmény. Diapozitívek.
Sterilitási vizsgálatok (tioglikolátos és szılıcukros táptalajok)
* Mikrobiológiai korrózió
Egyszer használatos eszközök
* Dezinficiens oldat hatásának vizsgálata a bır baktérium flórájára
(leoltás véres agarra kézmosás elıtt és után)
4. Okt. 3-4. Az elızı heti leoltások értékelése
Antibiotikumok és kemoterápiás szerek
*. Különbözı antibiotikum értékmérési és érzékenységi módszerek
bemutatása (higításos: csı, lemez, diffuziós: lyukasztásos-,
cilinderes- és papírkorong módszerek)
* Baktériumtörzsek antibiotikum érzékenységének bemutatása
Reziszteszt módszerrel (S. aureus, S. pyogenes, E. coli, P.
aeruginosa)
* Baktériumtörzsek antibiotikum érzékenységének
meghatározása Reziszteszt módszerrel (S. aureus, E. coli, P.
aeruginosa) agar táptalajon
* E-teszt és break point teszt bemutatása
* Antibiotikum szérum-szint monitorozása.

5. Okt. 10-11. Elızı heti leoltások értékelése
Szerológiai reakciók (in vitro antigén-ellenanyag reakciók)
* Agglutináció: qualitatív: tárgylemez agglutináció (E. coli
szerotipizálás), quantitatív: Widal-típusú reakció (csıhigításos
módszer)
*. Precipitáció: korong, agargél, immunelektroforézis.
* Indirekt agglutináció
* Immunfluorescens módszerek
* Immuncytolysis
*. Komplementkötési reakció (komplement titrálás)
* ELISA (Takácsy mikrotitrátor)
6. Okt. 17-18. I. demonstráció. (Anyaga: általános bakteriológia, immunológia)
GENNYKELTİ COCCUSOK
Gram pozitív coccusok
* Tenyészetek: agar lemezen: S. epidermidis, S. aureus
véres agaron: S. epidermidis, S. aureus, S. pyogenes,
S. mitis, S. pneumoniae, E. faecalis,
csokoládé agaron: S. pyogenes, S. mitis,
S. pneumoniae, E. faecalis
* Kenetek: S. aureus, S. pyogenes, S. pneumoniae (Gram festéssel)
* Enzim reakciók: kataláz próba (S. aureus)
DN-áz próba (S. aureus)
koaguláz próba (S. aureus)
* S. mutans MS táptalajon
* Antibiotikum érzékenység (S. aureus, S. pyogenes)
2
Gram negatív coccusok
* Tenyészetek: N. gonorrhoeae csokoládé agar táptalajon,
N. pharyngitidis agar táptalajon
* Kenetek (Gram festés, és Go-kenet egyszerő festéssel)
* Oxidáz reakció (N. pharyngitidis)
7. Okt. 24-25. Bélbaktériumok
* Tenyészetek: agar lemezen: E. coli, Klebsiella, Proteus
eozin-metilénkék táptalajon: E. coli, Klebsiella, Proteus
bizmutszulfit táptalajon: S. typhi
DC táptalajon: Shigella és E. coli (steril táptalajok is)
* Kenetek: E. coli (Gram), Klebsiella (tus)
* Biokémiai reakciók: szénhidrátbontás
TSI táptalajon: E. coli, Klebsiella, Proteus, S. typhi, S. paratyphi, Shigella
Indol termelés
Ureum bontás
Kénhidrogén képzés: ólomacetátos szőrıpapírral.
* Szerológiai reakció: Gruber-Widal reakció (S. typhi)
Vibrio (TCBS táptalaj sterilen)
Campylobacter, Helicobacter pylori
Gram-negatív, nem fermentáló pálca
* Pseudomonas agar táptalajon
* Pseudomonas antibiotikum érzékenysége

8. Nov. 7-8 FONTOSABB LÉGÚTI KÓROKOZÓK
3
Gram-pozitív pálcák
Gram negatív coccobacilusok
Corynebacteriumok
* Tenyészetek: C. diphtheriae Löffler és Clauberg táptalajon (steril
táptalajok is)
* Virulencia próba: Elek próba
* Diapozitívek
* Váladékvételi tartályok (torok, seb, tályog, tasak)
Gram negatív coccobacilusok
* Haemophilus: csokoládé agar táptalajon és a dajka jelenség
* Bordetella: Bordet-Gengou táptalaj (streril)
* Legionella: steril BCYE táptalaj
* Actinobacillus actinomycetemcomitans (fogtasak kenet)
Mycobacteriumok
* Tenyészetek: M. tuberculosis és M. bovis, valamint apatogén és
atípusos mycobacterium tenyészetek (Löwenstein-Jensen,
Sula, Sauton és Dubois táptalajokon)
* Kenet: Ziehl-Neelsen festéssel
* Váladékvételi tartály
9. Nov. 14-15. Aerob és anaerob spórás baktériumok
* Tenyészetek: B. cereus agar táptalajon, tojássárga táptalajon
C. tetani és C. perfringens Holman és tioglikolát táptalajban
Egyéb anaerob tenyésztési lehetıségek: GasPack,
anaerosztát, stb.
* Spórás baktériumok kenetei (Gram-festés)
Anaerob spóra nélküli pálcák diapozitíven bemutatva:
Gram negatív anaerob pálcák
* Bacteroides
* Fusobacterium
* Prevotella, Porphyromonas
Gram pozitív anaerob pálcák
* Lactobacillus csokoládé agaron
* Bifidobaktérium
* DFM index bemutatása
* Propionibaktérium
* Actinomyces
Spirochaeták
* T. pallidum: flokkulációs teszt: VDRL, KK reakció
* B. recurrentis és B. burgdorferi (diapozitivek)
* Leptospira: Korthof tenyészet, kenet ezüstimpregnálással
Rickettsiák: embrionált tojás (tenyésztés) Weil-Felix reakció
Mycoplasmák: BEA és BEG tenyészetek
Chlamydiák: váladékvételi eszközök
Diapozitívek

10. Nov. 21-22. II. demonstráció (anyaga: részletes bakteriológia)
Gombák morfológiája és tenyésztése
* Tenyészetek: C. albicans, Mucor, Aspergillus, Penicillíum
Sabouraud táptalajon
* Kenet: C. albicans metilénkékkel festve
* Fonalas gombák blokkjai (mikroszkópos vizsgálat)
* Diapozitívek
11. Nov. 28-29. Általános virológia
* A vírusok tenyésztése (embrionált tojás, szövettenyészetek)
* Bakteriofágok (tipizálás és titrálás)
* Vírusok morfológiája
* Sejt-vírus interakciók, HA Takácsy lemezen
* Vírusszerológiai módszerek (HAG, KKR, IF, Paul-Bunnel reakció)
* Nukleinsav kimutatási módszerek: PCR, hibridizáció
* Diapozitívek
12. Dec. 5-6. Részletes virológia
* Fontosabb DNS és RNS-vírus betegségek,
* Orális vírusinfekciók összefoglalása
* Saját torok és orrüreg leoltása véres és csokoládé agarra.
* Diapozitívek
13. Dec. 12-13. III. demonstráció (anyaga: alapvetı definíciók, kórokozók, betegségek)
Elızı heti leoltások értékelése
Paraziták (protozoonok és férgek)
* Makroszkópos készítmények (férgek)
* Mikroszkópos készítmények (féregpeték, Trichomonas,
Entamoeba histolytica, malária kenet
* Diapozitívek
.
4
Mikrobiológiai laboratóriumi technikák és diagnosztikus eljárások
összefoglalása