Természetes hatóanyagok jelentőségének vizsgálata máj- és ...
Természetes hatóanyagok jelentőségének vizsgálata máj- és ...
Természetes hatóanyagok jelentőségének vizsgálata máj- és ...
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
4.4.1.3. Bélmucosa-homogenizátum k<strong>és</strong>zít<strong>és</strong>e<br />
Vizsgálatainkhoz a patkányok különböző bélszakaszaiból nyert nyálkahártyahomogenizátumot<br />
használtuk. Mintát vettünk a duodenumból, a jejunumból, az<br />
ileumból <strong>és</strong> a colonból. A bélszakaszok azonosítása <strong>és</strong> kivágása után, azokat izotóniás<br />
KCl-oldattal bélsármentesre mostuk, majd a bél külső felszíne felőli erőteljes nyomással<br />
eltávolítottuk a bélnyálkahártyát (13).<br />
4.4.1.4. Szérum<br />
Állatkísérleteink során a vena cava posterior punkciójával nyert natív vért használtunk a<br />
metabolitok <strong>és</strong> enzimaktivitások meghatározásához. A natív vért 2800 rpm-en 10 percig<br />
centrifugáltuk, a sejtmentes felülúszót (szérumot) leszívtuk <strong>és</strong> a további feldolgozásig -<br />
20 ºC-on tároltuk.<br />
4.4.1.5. Plazma<br />
Az állati szervezet redox-homeosztázisát vizsgáló meghatározásokhoz trinátriumcitráttal<br />
alvadásgátolt vért használtunk. Az antikoagulált vért 2800 rpm-en 10 percig<br />
centrifugáltuk, a sejtmentes felülúszót (plazma) leszívtuk <strong>és</strong> a további feldolgozásig - 20<br />
ºC-on tároltuk.<br />
4.4.1.6. Vörösvértest<br />
A vena cava posterior punkciójával nyert trinátriumcitráttal alvadásgátolt vért 2800<br />
rpm-en 10 percig centrifugáltuk, a sejtmentes felülúszót (plazma) leszívtuk. A maradék<br />
vörösvértest masszát a thrombocyták <strong>és</strong> a fehérvérsejtek eltávolítása érdekében<br />
háromszor mostuk jeges vízben tartott izotóniás sóoldattal. Minden mosás között 10<br />
percig 2800 rpm-mel centrifugáltuk. Az így nyert tiszta masszát hemoglobinra nézve<br />
azonos koncentrációjúra (10 mg/ml-ra) állítottuk be.<br />
4.4.2. Metabolit <strong>és</strong> enzimaktivitás meghatározások<br />
4.4.2.1. Metabolit <strong>és</strong> enzimaktivitások meghatározása szérumból<br />
A metabolit <strong>és</strong> enzimaktivitások meghatározása szérumból standard módszerek alapján<br />
történt spektrofometriásan, Hitachi 717 klinikai automatával. Meghatároztuk az<br />
aszpartát-aminotranszferáz (AST), alanin-aminotranszferáz (ALT), az alkalikusfoszfatáz<br />
(ALP), albumin (ALB), amiláz (AMY), totál protein (TP), glukóz (GLU),<br />
koleszterin (CHOL), HDL-koleszterin (HDL), triglicerid (TG), húgysav (UA)<br />
48
Change language