Természetes hatóanyagok jelentőségének vizsgálata máj- és ...
Természetes hatóanyagok jelentőségének vizsgálata máj- és ...
Természetes hatóanyagok jelentőségének vizsgálata máj- és ...
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
4.2.3. Mikro- <strong>és</strong> makroelemek koncentrációjának meghatározása<br />
4.2.3.1. Mintaelők<strong>és</strong>zít<strong>és</strong><br />
Növények <strong>és</strong> kivonataik, továbbá az állati szövetminták (<strong>máj</strong>, plazma, vörösvértest)<br />
elemtartalmának meghatározását végeztük el. A mintákból 0,5-1,0 g-ot mértünk be<br />
teflonbombába, majd 5 ml 65 %-os salétromsav <strong>és</strong> 2 ml hidrogén peroxid elegyében<br />
roncsoltuk. A feltárt mintákat 25 ml-es mérőlombikba öntöttük, bidesztillált vízzel jelig<br />
töltöttük. A makroelemek koncentrációjának meghatározásához tízszeres hígítású<br />
oldatokat k<strong>és</strong>zítettünk. Minden növényi mintából három párhuzamos bemér<strong>és</strong>, ill. mér<strong>és</strong><br />
történt, a szöveti minták esetében az állatok száma (n= 5, 10) határozta meg a<br />
párhuzamos minták számát. A kapott eredményekből átlagot <strong>és</strong> szórást számoltunk<br />
(204).<br />
4.2.3.2. Elemanalízis ICP-OES-rel<br />
A meghatározást induktív gerjeszt<strong>és</strong>ű plazma optikai-emissziós spektrométerrel (ICP-<br />
OES) végeztük Thermo Jarrell Ash Corporation gyártmányú AtomScan 25 ICP-vel. A<br />
k<strong>és</strong>zülékben 2 kW teljesítményű rádiófrekvenciás generátor (27,12 MHz) által indukált<br />
8-10000 °K-os argonplazma gerjesztődik. Optikai rendszerében Czerny-Turner<br />
vákuummonokromátor <strong>és</strong> két fotoelektron sokszorozó (R 427 <strong>és</strong> R 889) található. A<br />
mér<strong>és</strong>i tartomány 160 nm-től 850 nm-ig terjed. A k<strong>és</strong>zülék standardizálásához Merck<br />
atomabszopciós <strong>és</strong> ICP standardokból k<strong>és</strong>zült oldatokat használtunk. Két pontos<br />
kalibrálást, 3x3 másodperces integrálási időt, háttérkorrekciót <strong>és</strong> automatikus<br />
vaklevonást alkalmaztunk.<br />
4.2.4. Redoxi-paraméterek meghatározása<br />
4.2.4.1. Szabadgyökfogó-kapacitás<br />
A meghatározást Berthold Lumat 9501 luminométerrel, H2O2/OH·-luminolmikroperoxidáz<br />
rendszerben végeztük, Blázovics <strong>és</strong> munkatársai (14) módszere alapján.<br />
Alkalikus pH-n a luminolt az oxidálószerből (H2O2) nehézfémionok, illetve hemproteinek<br />
(mikroperoxidáz) hatására képződő oxigén- vagy hidroxil-gyökök (Fentonreakció)<br />
instabil peroxidokon keresztül, fénykibocsátás közben amino-ftálsavvá bontják.<br />
A rendszer a reakció során 425 nm-en monokromatikus fényt bocsát ki, melynek<br />
intenzitása a keletkező szabad gyökök mennyiségével arányos. Amennyiben<br />
mintánknak szabadgyök-neutralizáló (scavenger) kapacitása volt, jelenlétében a mintát<br />
43
Change language