thèse de doctorat d'université biologie - Portail national SIST

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Poids sec de la chair
IC = .x 100
Poids sec des valves
La déshydratation de la chair et des coquilles est effcctuke dans wtt” etuve a 1~1
température de 60 Oc’ pendant 72 heures.
Les poids secs du la chair et des coquilles sont calculés au milliL:me dc grammes prcs ;i
l’aide d’une balance klectronique Sartorius.
3.1.3. Etude histologique de la gonade et histochimie de I’ovocyte mature et
des inclusions autour des acini
3.1.3.1. Etude histologique de la gonade
La gonade est Etudiée en histologie photonique, ultrastructurale e1 num6riqt.w pour
compléter les résultats de l’indice de condition (précision des phases de repos et dc
restauration dc la gonade après la ponte). analyser dans le détail les principaux aspwfs dei
gamètes (histologie ultrastructurale) et apprécier l’importance relative des diffkents types
d’ovocytes produits (histologie numérique).
A. Histologie photonique
Un morceau de tissu est prélevé dans la gonade et fixé dans du bouin alcoolique. Le
lavage est effectué dans des bains successifs d’alcool (éthanol 70, butanol 100 %), CC
processus correspond à la phase de déshydratation. .Après cette étape. les édlantillons de tisw
de gonade sont imprkgnés dans du butiparaffine puis inclus dans de la paratke. Les blocs de
paraffIne sont ensuite dkoupés en coupes fines de 5 a 7 pm qui seront collées sur des lames
de verre. Ces lames sont laissées à sécher dans une étuve à 30 “I‘ pendant 3 à 6 heures avant
d’etre sorties pour être déshydratées et colorées. Une lamelle est posée sur 1~ préparation à la
fin de cette étape pour éviter que la poussière ne s’y dépose (celle-ci gène l’observation
correcte de la préparation).
Le détail du traitement des échantillons de gonade est indiqué ci-après (fig. 6).
W. Histologie ultrastructurale
Les gonades matures d’individus, mâles et femelles sont étudiées au microscope
électronique à transmission. Au départ, de petits fragments de morceaux de gonades (1 mm
d’épaisseur) subissent une double fixation au glutaraldéhyde (2,5 %) en tampon cacodylate de