thèse de doctorat d'université biologie - Portail national SIST
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15<br />
Poids sec <strong>de</strong> la chair<br />
IC = .x 100<br />
Poids sec <strong>de</strong>s valves<br />
La déshydratation <strong>de</strong> la chair et <strong>de</strong>s coquilles est effcctuke dans wtt” etuve a 1~1<br />
température <strong>de</strong> 60 Oc’ pendant 72 heures.<br />
Les poids secs du la chair et <strong>de</strong>s coquilles sont calculés au milliL:me dc grammes prcs ;i<br />
l’ai<strong>de</strong> d’une balance klectronique Sartorius.<br />
3.1.3. Etu<strong>de</strong> histologique <strong>de</strong> la gona<strong>de</strong> et histochimie <strong>de</strong> I’ovocyte mature et<br />
<strong>de</strong>s inclusions autour <strong>de</strong>s acini<br />
3.1.3.1. Etu<strong>de</strong> histologique <strong>de</strong> la gona<strong>de</strong><br />
La gona<strong>de</strong> est Etudiée en histologie photonique, ultrastructurale e1 num6riqt.w pour<br />
compléter les résultats <strong>de</strong> l’indice <strong>de</strong> condition (précision <strong>de</strong>s phases <strong>de</strong> repos et dc<br />
restauration dc la gona<strong>de</strong> après la ponte). analyser dans le détail les principaux aspwfs <strong>de</strong>i<br />
gamètes (histologie ultrastructurale) et apprécier l’importance relative <strong>de</strong>s diffkents types<br />
d’ovocytes produits (histologie numérique).<br />
A. Histologie photonique<br />
Un morceau <strong>de</strong> tissu est prélevé dans la gona<strong>de</strong> et fixé dans du bouin alcoolique. Le<br />
lavage est effectué dans <strong>de</strong>s bains successifs d’alcool (éthanol 70, butanol 100 %), CC<br />
processus correspond à la phase <strong>de</strong> déshydratation. .Après cette étape. les édlantillons <strong>de</strong> tisw<br />
<strong>de</strong> gona<strong>de</strong> sont imprkgnés dans du butiparaffine puis inclus dans <strong>de</strong> la paratke. Les blocs <strong>de</strong><br />
paraffIne sont ensuite dkoupés en coupes fines <strong>de</strong> 5 a 7 pm qui seront collées sur <strong>de</strong>s lames<br />
<strong>de</strong> verre. Ces lames sont laissées à sécher dans une étuve à 30 “I‘ pendant 3 à 6 heures avant<br />
d’etre sorties pour être déshydratées et colorées. Une lamelle est posée sur 1~ préparation à la<br />
fin <strong>de</strong> cette étape pour éviter que la poussière ne s’y dépose (celle-ci gène l’observation<br />
correcte <strong>de</strong> la préparation).<br />
Le détail du traitement <strong>de</strong>s échantillons <strong>de</strong> gona<strong>de</strong> est indiqué ci-après (fig. 6).<br />
W. Histologie ultrastructurale<br />
Les gona<strong>de</strong>s matures d’individus, mâles et femelles sont étudiées au microscope<br />
électronique à transmission. Au départ, <strong>de</strong> petits fragments <strong>de</strong> morceaux <strong>de</strong> gona<strong>de</strong>s (1 mm<br />
d’épaisseur) subissent une double fixation au glutaraldéhy<strong>de</strong> (2,5 %) en tampon cacodylate <strong>de</strong>