Neurophysiologie de Marseille (CRN2M) UMR6231 Equipe 2

� Protocole pour Infusion intra-cérébro-ventriculaire (4ème ventricule) par
minipompe osmotique
Rats et souris adultes sont anesthésiés par injection intra-péritonéale d’un mélange de
kétamine (100 mg/kg) et de xylazine (10 mg/kg) dans la pièce de stabulation. L’animal est
placé sur un appareil de stéréotaxie, maintenue par des barres d’oreilles et par une pièce de
geueule. La partie supérieure du crâne est rasée et les poils sont éliminés avec une gaze
humide. La peau est aseptisée avec de la Bétadine. Après une infiltration de xylocaïne en sous
cutané, une incision longitudinale est effectuée et la peau est écartée. L’os est séché et un trou
est percé sur le crâne pour permettre l’implantation d’une canule d’infusion selon des
coordonnées stéréotaxiques précises, celle-ci est maintenue par l’utilisation de ciment dentaire
(GC Fuji I, Japan). Le matériel d’infusion chronique (Minipompe osmotique Alzet , USA) est
connecté à la canule d’infusion et ensuite insérée sous la peau de l’animal pour être
positionnée au niveau dorsal, légèrement caudal du niveau des épaules. La température de
l’animal est vérifiée au cours de l’opération afin d’éviter une hypothermie. La peau de
l’animal est suturée avec du fil stérile et résorbable en vicryl 3-0. L’animal est ensuite placé
seul dans une cage et est surveillé jusqu’à ce qu’il retrouve sa vigilance et notamment puisse
se tenir debout. L’animal retourne ensuite en zone de stabulation (un animal par cage) pour
une durée variant entre 1 et 42 jours avant d’être sacrifié par injection d’une dose létale de
pentobarbital sodique (120 mg/kg) en intra-péritonéal.
L’analgésie est assurée par une injection sous cutanée de BUPRECARE à la dose de 0.02 à
0.5 mg/kg pour le rat et 0.5 à 2.5 mg/kg pour la souris. Les injections se font toutes les 6 à 12
heures.
D - Liste des membres de l’équipe
Kévin BARANGER (demande d’autorisation en cours)
Anne BERNARD N° d’autorisation : 13-312
Eliane CHARRAT titulaire d’un niveau 2
Lotfi FERHAT, (demande d’autorisation en cours)
Yannick MARCHALANT, N° d’autorisation : 13-501
PY Nathalie, (inscrite en formation de niveau 1)
RIVERA Santiago, N° d’autorisation : 13-308
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