Neurophysiologie de Marseille (CRN2M) UMR6231 Equipe 2

- Test de Von Frey : Test qui permet de mesurer le seuil de tolérance à la
douleur. L’animal est placé dans une cage en plexiglas
posée sur une surface grillagée surélevée. On applique sur
la surface plantaire de la patte arrière injectée des filaments
ayant une force de pression croissante, jusqu’à la pression
qui entraine le réflexe de retrait de la patte. Cette pression
représente le seuil de tolérance de l’animal. Le filament
ayant provoqué le retrait de la patte est testé 3 fois à 10-15
minutes d’intervalle pour confirmer le test. Durant toute la
durée du test, l’animal est sous surveillance et à aucun
moment son comportement n’est modifié (toilettage, activité
locomotrice, activité d’exploration).
- Test de cold plate / hot plate : Test qui mesure la latence de réaction de l’animal à une
stimulation thermique d’intensité constante. La souris est
placée sur une surface métallique dont la température est
fixée (de 15°C à -4°C pour les températures froides, à 54°C
pour les températures chaudes). Nous mesurons le temps
nécessaire pour que l’animal cherche à échapper à cette
stimulation thermique en sautant de la plaque. Les animaux
ne présentant aucun comportement de fuite sont retirés de
la plaque au bout de 60 secondes.
Existe-t-il des méthodes alternatives pour réaliser ce travail : Si OUI justifiez leur non
utilisation :
NON
Espèces animales qui seront utilisées :
Souris (C57BL6, TRPA1 KO, PC1 KO conditionnel)
Justifiez le choix de l'espèce animale et le nombre d'animaux utilisés :
Nous utilisons la souris, car nous possédons des lignées de souris KO conditionnel pour la
polycystine 1 (PC1) ainsi que des souris knock-out pour le canal TRPA1. Selon la
reproductibilité des résultats pour chaque condition, nous estimons qu’il faudra 15 à 20 souris
mâles par condition (saline ou oxaliplatine) et par lignée de souris, soit un total de 90 à 120
souris.
Procédures de gestion de la douleur et moyens mis en œuvre pour gérer la souffrance : (joindre les
procédures validées à cette demande) :
- Nous ne pouvons pas gérer la souffrance, car elle fait l’objet de l’étude. Toutefois, nous
minimisons la durée de temps dont l’animal fera face à la douleur et continuons notre étude
par des expérimentations in vitro.
- L’intensité de la douleur est mesurée par le test de Von Frey et de Cold/Hot plate.
- Si les animaux présentent des signes cliniques manifestes de souffrance (tels que la perte de
poids, une érection pileuse ou un engourdissement/paralysie des membres postérieurs), la dose
52