Neurophysiologie de Marseille (CRN2M) UMR6231 Equipe 2

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Intitulé : Rôles des facteurs de transcription et les gènes horloges dans la pathophysiologie de l'hypophyse Responsable : Dr. Jean-Paul HERMAN et Dr. Thierry BRUE A – Domaine d’activité et justification La thématique générale de l’équipe est définie par l'intitulé de l'équipe. Plus précisément, elle aborde trois questions. 1) Quels sont les mécanismes moléculaires de déficit hypophysaire d'origine génétique chez l'homme et, plus particulièrement, l'implication de mutations de facteurs de transcription hypophysaires. L'approche de cette question n'implique pas l'utilisation de modèles animaux. 2) Quels sont les rôles physiologiques, non- développementaux, de deux facteurs hypophysaires, POU1F1/PIT-1 et PITX2. Cette question est étudiée en partie à travers l'utilisation de modèles animaux transgéniques que l’équipe a développés. 3) Quels sont les mécanismes moléculaires, transcriptionnels, de la rythmicité de l'expression de certains gènes, notamment de la prolactine. Certains aspects de cette question demandent de mesurer des paramètres biochimiques dans l'hypophyse, donc l'utilisation d'animaux. B – Espèces animales utilisées et justification L’espèce utilisée est la souris. Il s'agit essentiellement de modèles transgéniques, établis en partie au laboratoire, permettant de tester le rôle de certains facteurs de transcription (POU1F1/PIT1, PITX2) dans la différentiation et la physiologie de l'hypophyse, problématique qui ne peut pas être abordée autrement que par ces modèles. L'évaluation de paramètres moléculaires/physiologiques in vivo demande également le prélèvement d'organes chez l'animal. C – Protocole expérimental sur l’animal � -Anesthésie à l’aide du mélange Imalgéne 100mg/kg et Rompun, 10mg/kg suivie de perfusion intracardiaque d'un fixateur. Prélèvement de différents organes en vue d'examens histologiques. 42
� -Euthanasie à l’aide du dioxyde de carbone (CO2) suivie de prélèvement de différents organes en vue de dosage biochimiques. � Anesthésie à l’aide du mélange Imalgéne 100mg/kg et Rompun, 10mg/kg et implantation chirurgicale de cathéters jugulaires ou carotidiens chroniques. Prélèvements sanguins répétés sur l'animal éveillé et libre de ses mouvements. D - Liste des membres de l’équipe Jean-Paul HERMAN, N° d’autorisation : 13-50 Denis BECQUET, N° d’autorisation : 13-002 Anne-Marie FRANCOIS BELLAN, N° d’autorisation : 13-197 Marie-Hélène QUENTIEN, (demande d’autorisation en cours) Séverine GUILHEM, titulaire d’un niveau 2 Nicolas JULIEN, titulaire d’un niveau 2 Mathias MORENO, titulaire d’un niveau 2 43
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