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306 Biotechnol. Agron. Soc. Environ. 2007 11 (4), 299–311 Dagno K., Lahlali R., Friel D., Bajji M., Jijakli MH.(Environmental Protection Agency) aux USA(Charudattan, 2001).8.1. Étapes de développement dʼun bioherbicideLes caractéristiques requises pour le développement dʼunbioherbicide potentiel sont sa capacité de contrôle delʼadventice cible, ses effets inoffensifs sur lʼécologie, sescapacités de croissance et de sporulation sur un milieuartificiel donc son aptitude à une production prolifique,sa virulence spécifique, son agressivité et sa stabilitégénétique (Steven, 2005). Ainsi le développement dʼunbioherbicide requiert 3 phases principales. La phasedʼisolement commence par une collection du matérielvégétal cible malade. La réalisation du postulat de Kochà partir de lʼagent causal permet lʼidentification et lasélection du pathogène. La phase de sélection sʼintéresseà lʼétude écologique du pathogène, en établissant sesconditions optimales de sporulation, dʼagressivité ainsique lʼévaluation de ses gammes dʼhôtes potentiels. Lespossibilités de culture du pathogène sur milieu artificiel,ainsi que sa conservation sur ce milieu à moyen et longterme font également partie de cette 2 e phase et constituentun pré-requis pour lʼapplication à grande échelle du bioherbicide.Cette phase comporte aussi lʼétude des modesdʼaction de lʼagent pathogène. La phase finale consiste àimpliquer un collaborateur industriel pour la distributionet la commercialisation du produit fini (Figure 4).8.2. Isolement et sélection de microorganismespathogènes sur la jacintheUne prospection des microorganismes pathogènes dela jacinthe dans le bassin supérieur de lʼAmazonie enÉquateur et au Pérou a permis dʼidentifier 3 groupesde champignons (Deuteuromycotina, Ascomycotina etBasidiomycotyna) sur la plante (Evans et al., 2001). Parmieux, onze pathogènes ont été étudiés par Charudattan(1996) et par Shabana et al. (1997). Ils ont induit dʼimportanteslésions foliaires conduisant à la mort de laplante, se révélant ainsi être des agents prometteurs decontrôle biologique (Tableau 4).8.3. Efficacité des microorganismes en tant quʼagentspotentiels de bioherbicide contre la jacintheDes études de phytotoxicité ont été menées en conditionscontrôlées et naturelles sur certains pathogènes isoléssur la jacinthe. La mort de la plante a été obtenue quelquessemaines après pulvérisation avec Acremoniumzonatum, Alternaria eichhornia et Cercosporarodmanii (Tableau 5). Des études supplémentairesdoivent être envisagées pour évaluer le potentiel decontrôle des genres de Bipolaris, Drechslera, Fusariumet de bactéries sur la jacinthe (Shabana et al., 1997 ;Charudattan, 2001). Susha et al. (2002) et Praveenaet al. (2004) ont rapporté lʼefficacité de F. equiseti etF. pallidoroseum dans le contrôle de la jacinthe. Enplus de cette dernière, F. pallidoroseum sʼest révéléehautement pathogène pour 20 autres adventices dontPhyllanthus niruri, Cleome viscosa, Vernonia cinereaet Emilia sonchifolia où elle provoque une sévèredéfoliation. Shabana (2005) et Shabana et al. (2005)ont rapporté une efficacité de 100 % de A. eichhorniasur la jacinthe, 7 à 13 semaines après pulvérisation auchamp. Selon Babu et al. (2003), un contrôle efficacede la jacinthe est obtenu avec Alternaria alternata.Les plants ont été pulvérisés avec une formulation de10 6 conidies par ml et 10 % dʼémulsion dʼhuile.8.4. Mécanismes dʼaction du bioherbicideLes informations concernant les modes dʼaction dubioherbicide sur les plantes cibles sont actuellementparcellaires. Les modes dʼaction de A. eichhornia et deC. piaropi ont été décrits par Charudattan et al. (1982)et Shabana et al. (1997). Une fois sur E. crassipes, lesspores germent, le mycélium pousse à la surface de lafeuille avant dʼy pénétrer à travers les stomates et leslenticelles. Lʼactivité du pathogène induit une modificationprofonde de lʼultra-structure des chloroplastes,des nucléoles et des mitochondries cellulaires (Shabanaet al., 1997). Certaines mycotoxines sécrétées, notammentla bostrycine et la déoxybostrycine, détruisentlʼenveloppe des chloroplastes et favorisent lʼhypertrophiedes plastoglobules. Lʼenveloppe nucléaire dégénèreavec précipitation des électrons des enveloppesmitochondriales cellulaires (Charudattan et al., 1982).Le mécanisme dʼaction est surtout basé sur la dégradationdes hydrates de carbones (saccharose et les sucresréduits) de la plante par les pathogènes (Shabana et al.,1997). Selon Shabana et al. (2005), il se produit uneaugmentation du taux de phénol dans les feuilles aprèsleur inoculation avec A. eichhornia (souche Ae5). Lephénol est stocké dans les tissus adaxiales, dans lʼépidermeabaxiale et autour des vacuoles provoquant unehypertrophie des cellules.8.5. Production et formulationLes conditions environnementales ont probablementun effet indésirable sur lʼefficacité des bioherbicides.Pour compenser cette altération, plusieurs techniquesde protection de lʼagent de lutte biologique ont étéproposées dans la littérature par Greaves et al. (1998) ;Boyetchko et al. (1999) et Daigle et al. (2002). Laformulation solide consiste à la production du pathogènesur milieu solide (Boyette et al., 1993 ; Bourdôtet al., 1995 ; Grey et al., 1995 ; Vogelgsang et al.,1998 ; Morris et al., 1999) et à sa formulation engranule ou en poudre (Walker et al., 1983 ; Connick
La jacinthe dʼeau : problèmes et moyens de lutte 307Echantillonnage et criblageIdentification etcaractérisationBiotests(in vitro, ex vivo, in vivo)Isolement en culture pureTests pilotesSélection de la soucheBrevetProduction en masseStockage etformulationToxicologie et impactenvironnementalMéthodes analytiquesspécifiquesLégislation d’emploiFigure 4. Principales étapes de développement dʼun bioherbicide — Main steps of bioherbicide development (Emilio, 2003).et al., 1991 ; Quimby et al., 1999). Lʼinconvénient dece type de formulation est que lʼefficacité de lʼagentbiologique reste liée aux facteurs environnementaux etla plupart des substances dʼenrobages utilisées attirentles fourmis (Gracia et al., 1998). Elle est cependantbien adaptée contre les mauvaises herbes dans lespâturages, les prairies et dans les écosystèmes naturels(Auld et al., 2003). Quant à la formulation liquide, ellese réalise soit par utilisation des polymères en solution(Shabana et al., 1997 ; Chittick et al., 2001) soit parréalisation dʼémulsion simple dʼhuile ou dʼémulsioninverse dʼhuile dont le principe pour ce dernier est laformation dʼune phase continue dʼhuile contenant desgouttelettes dʼeau (Auld, 1993 ; Klein et al., 1995 ;Zhang et al., 1997). Elle permet de réduire lʼévaporationdʼeau dans le biopesticide (Quimby et al., 1988).La formulation liquide peut être réalisée aussi parformation du complexe WOW (Water in Oil in Water)qui consiste à disperser de fines gouttelettes dʼhuilecontenant de lʼeau dans une phase continue dʼeaupar émulsification de lʼeau dans de lʼhuile puis dansde lʼeau (Auld, 2002). Ainsi, la formulation obtenuecontient des agents surfactants (lipophile, hydrophile,huile, eau) permettant la dispersion du pathogène soiten phase intérieure ou extérieure dʼeau, soit dans lesdeux phases. Les bioherbicides peuvent avoir plusieurstypes dʼapplication, soit par pulvérisation de lʼagentnon formulé à travers de simples blessures provoquéessur la plante ou par pulvérisation de lʼagent de lutteformulé dans un produit de protection.
Page 2 and 3: 300 Biotechnol. Agron. Soc. Environ

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