Bioconversion de l'acide p-coumarique par Brettanomyces ...

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Mise au point des methods analytiquesLes droites d’étalonnage ont été répétées trois fois lors de chaque validation. Le test deFisher confirmait la reproductibilité de la droite avec un seuil de confiance de 95%. Lalinéarité de la courbe de calibration a été validée dans la zone de concentration étudiée avecun coefficient de corrélation toujours supérieur à 0,999.2.2.3. Détermination de la limite de quantification (LOQ) et de la limite dedétection (LOD)Les limites de détection et de quantification on été calculées en se basant sur la déviationde la pente de la droite d’étalonnage. Sachant que α est l’écart type des différentes valeurs del’intersection des droites d’étalonnages avec l’axe des ordonnés et que S est la pente moyennedes droites de régression, on définit alors la limite de détection comme étant la valeur :LOD = 3,3 α/SDe même, la valeur de la limite de quantification est définie comme étant :LOQ = 10 α/SLa limite de détection trouvée a pour valeur 0,01 mg/L et la limite de quantification 0,04mg/L.2.2.4. Etude de la précision et du recouvrement moyenIl n’existe pas de standards certifiés de solution d’acide p-coumarique permettant l’étudede la précision de la méthode à l’aide d’étalons. Pour cela, on a eu recours à l’étude durecouvrement. L’étude du recouvrement consiste à répéter plusieurs injections d’uneconcentration théorique connue d’acide p-coumarique et d’étudier ensuite la précision de larépétition. En d’autres termes, le recouvrement représente le pourcentage de similitude entreune valeur trouvée et une valeur connue d’un échantillon donné. Ces études ont été effectuéesen utilisant des échantillons à trois concentrations différentes, y compris la concentrationcorrespondante à la limite de quantification. En appliquant ces tests aux droites d’étalonnagesdécrites ci-dessus, le recouvrement de l’acide p-coumarique trouvé est 99,76% ± 2,3 (Tableau1).77
Mise au point des methods analytiquesTableau III. 1. Etude du recouvrement de l’acide p-coumariqueConcentration trouvée(mg/L)Moyenne± SDRecouvrement(%)Recouvrementmoyen ± SDConcentration Inj. 1 Inj. 2 Inj. 3 (mg/L)(%)ajoutée (mg/L)0,04 0,042 0,041 0,039 0,04 ± 101,6670,0013 2,875 2,956 2,902 2,91 ± 97,0330,0499,76 ± 2,428 8,024 7,994 8,123 8,05 ±0,07100,5882.2.5. Etude de la répétabilité et de la reproductibilitéAfin de définir la répétabilité, des échantillons ont été préparés et testés en utilisant sixconcentrations d’acide p-coumarique, dont la concentration correspondante à la limite dequantification. Chaque concentration a été répétée six fois dans un même jour (précisionintrajour). Le coefficient de variation pour chacune des injections est trouvé en dessous duseuil d'acceptation fixé à 5 % (Tableau 2).78
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Il l’appelait « la Saga » dans
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5.2. Etude de l’évolution de la
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