Bioconversion de l'acide p-coumarique par Brettanomyces ...

Matériels et MéthodesDans chaque flacon, différentes concentrations de 4-vinylphénol et de 4-éthylphénol sontajoutées de façon à constituer une gamme étalon. Le domaine de linéarité de cette gammedépend de la matrice utilisée et du composé dosé.3.6.1.2.Les échantillonsUn volume d’echantillon est dilué dans du milieu matrice pour former un volume de 8 mLdans chaque flacon contenant 3 g de NaCl. Après dilution on ajoute 40 µL de diméthylphénol(DMP) à 100 mg/L pour jouer le rôle d’étalon interne.3.6.2. Système et appareillageLe chromatographe utilisé est un TRACE GC muni d’un injecteur « split/splitless »,associé à un spectromètre de masse, le POLARIS Q (Trappe d'ions) de chez Thermo Electron.L’injection des échantillons s’est faite de manière automatisée grâce au Combi Pal en modeSPME. La colonne chromatographique retenue pour réaliser ces essais est une VF-23ms (30m x 0,25 mm, 0,25 µm) possédant une phase cyanopropyl de chez Varian.Quant à l’acquisition des données, elle s’est effectuée grâce au logiciel « Xcalibur »,associé à la base de données « NIST Mass Spectral Search Program », version 2.0, pour larecherche des spectres de masse.3.6.3. Extraction du 4-vinylphénol et du 4-éthylphénolL’extraction des composés volatils sur des fibres SPME (Solid phase micro extraction)mets en jeux des forces physiques d’adsorption et de désorption. En effet, la première étape sebase sur un équilibre de partage entre une phase solide et une phase liquide ou gazeuse. Lafibre est constituée d’une phase solide constituée d’un film de polymère, caractéristique àchaque adsorbat, qui enrobe une fibre en verre de silice. Une aiguille creuse et amovibleprotège cette fibre tout en lui permettant un mouvement libre dans sa cavité. La fibre utiliséedans notre cas est constituée d’un fin film de 0,85 μm en polyacrylate (Supelco inc.)60