Bioconversion de l'acide p-coumarique par Brettanomyces ...

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Matériels et Méthodes1.7. Prélèvement des échantillonsAprès ajout de l’acide p-coumarique et homogénéisation, des prélèvements stériles ontlieu en fonction du temps. Le volume prélevé est divisé alors en trois parties. Le protocolegénéral des prélèvements et des analyses est décrit dans la figure 3.Figure II. 3. Protocole général de l’étude de la bioconversion2. Etudes physico-chimiques de l’acide p-coumarique2.1. Milieux d’étudeL’adsorption de l’acide p-coumarique sur des adsorbants œnologiques a été étudiée dansdes milieux synthétiques type vin (MSV), et dans trois types de vins rouges (Chapitre Cinq).De même, ces trois vins ont été utilisés pour valider les méthodes analytiques (ChapitreTrois). Leur profil est décrit dans le tableau 4.47
Matériels et MéthodesTableau II. 4. Composition en acide p-coumarique des vins utilisésVin Cépage Millésime Acide p-coumarique(mg/L)Corbière Grenache, lladoner pelut, 2003 0,6Syrah, Mourbèdre.Minervois Carignan, grenache, 2003 5,4Mourvèdre, Syrah.Merlotpays d’OCMerlot 2000 1,952.2. Matériaux adsorbantsDeux adsorbants industriels ont été utilisés pour tester l’adsorption de l’acide p-coumarique dans des conditions œnologiques. Le premier est le polyvinylpolypyrrolidoneinsoluble (PVPP), le second est la poudre d’écorces de levures.o Le PVPP est un polymère poly[1-(2-oxo-1- pyrrolidinyléthylène] réticulé de façon à lerendre insoluble. Il est fabriqué par polymérisation de la N-vinyl-2-pyrrolidone enprésence de divers catalyseurs (par exemple de l’hydroxyde de sodium) ou enprésence de N,N'-divinylimidazolidone. Le PVPP fixe les polyphénols des vins, cetteadsorption dépend du taux de polymérisation. Il se présente sous forme de poudreblanche.o Les écorces de levures résultent de la plasmolyse d’une souche spécifique deSaccharomyces cerevisiae. Les enveloppes cellulaires sont récupérées parcentrifugation, puis lavées pour limiter les risques de goûts de levure. Elles sont sousforme de poudre jaune.2.3. Conduite des expériences d’adsorptionPour étudier l’adsorption d’un composé donné sur un adsorbant, il faut procéder en deuxétapes. La première a pour but d’évaluer le temps nécessaire pour atteindre l’équilibrethermodynamique entre l’adsorbant et l’adsorbat.48
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