Bioconversion de l'acide p-coumarique par Brettanomyces ...

Matériels et MéthodesAprès lavage et élimination du surnageant, ce culot est récupéré dans un volume précis detampon stérile, donnant une concentration définie en cellules dans le tampon. Cette procédurenous permet d’avoir une concentration de levures viables et capables d’effectuer labioconversion sans toutefois se reproduire.1.6. Ajout de l’acide p-coumarique dans les fermentationsL’acide trans p-coumarique pesé sur une microbalance analytique est dissous dans 1 mLd’éthanol pur, puis ajouté sous flamme après filtration sur une membrane stérile de 0,4 μmdans les milieux de fermentations. L’agitation est fixée à 250 tours/minutes et la températureà 30 o C. Le contrôle des paramètres environnementaux (température et agitation) a été effectuésoit dans un incubateur, soit dans un bain-marie.o Dans l’incubateur, l’agitation est effectuée par un mouvement elliptique sur une tableagitante. La température d’incubation est contrôlée par un air chaud.o L’autre dispositif de contrôle de la température et d’agitation est constitué d’une tablemagnétique immergée dans de l’eau. La température de l’eau est réglée par unerésistance contrôlable et un serpentin contenant de l’eau froide. Un barreau aimantédoit être posé à l’avance dans chaque fiole d’erlenmeyer.Figure II. 2. Incubation et agitation des fermentations46