Bioconversion de l'acide p-coumarique par Brettanomyces ...

Introduction Généralepermettront d’apprivoiser cet agent de contamination. Les difficultés rencontrées lors desdifférentes études ainsi que des outils de suivi et de contrôle seront aussi discutés.Le second chapitre « Matériels et Méthodes » présentera les techniques expérimentalesutilisées ainsi que le différent matériel chimique et biologique. Les techniques expérimentalesseront classées dans ce chapitre relativement aux différents composés dosés. Enfin, les outilsmathématiques d’évaluation et de calculs seront détaillés.La partie « Résultats et Discussion » comportera les chapitres 3, 4, 5 et 6. Le chapitre 3présente deux méthodes chromatographiques que nous avons mises au point afin de pouvoireffectuer le suivi précis des composés de la bioconversion. La première est une méthodeHPLC/UV alors que la seconde est une méthode GC/MS.Le chapitre 4 traite les problèmes rencontrés lors de la manipulation de l’acide p-coumarique dans des conditions œnologiques. Les interactions de cet acide avec lescomposants chimiques et biologiques du milieu seront alors étudiées, en insistant sur lesphénomènes d’adsorption sur les levures. En comparaison, l’adsorption du 4-éthylphénol seraaussi étudiée dans les mêmes conditions.Le chapitre 5 propose une méthode pour réduire la concentration de l’acide p-coumarique du milieu afin de limiter la production du 4-éthylphénol. La méthode des plansd’expériences sera utilisée pour étudier l’effet de quelques facteurs influençant le phénomèned’adsorption sur des adjuvants œnologiques.Après avoir déterminé les différentes causes de perte de l’acide p-coumarique dans lemilieu, le chapitre 6, dans une première approche de ce genre, se penche spécifiquement surle bilan matière de la bioconversion de l’acide p-coumarique en 4-éthylphénol. Ceci permettrade répondre à une question posée dans la littérature, celle des différentes voies demétabolisation de l’acide p-coumarique par Brettanomyces. Ce chapitre apportera aussi desréponses précises sur la relation entre l’agent de contamination et la vitesse de production des4-éthylphénols. Les différentes cinétiques seront étudiées dans différentes conditions, ce quiapportera des nouvelles données sur l’assimilation de l’acide p-coumarique et l’apparition des4-éthylphénols.La dernière partie intitulée « Conclusions et Perspectives » rassemblera les résultats àretenir ainsi que des propositions de pistes d’études pour approfondir les connaissancesacquises.5