Bioconversion de l'acide p-coumarique par Brettanomyces ...

Etude cinétique de la bioconversionLe profil de bioconversion est différent. Nous remarquons une disparition très rapide del’acide p-coumarique du milieu, avec une production élevée de 4-vinylphénol puis de 4-éthylphénol. Dans le même temps de 100h que la fermentation précédente, le niveau de 4-éthylphénol formé arrive à 0,025 mmol/L et continue à augmenter. Si l’on observe égalementle bilan matière instantané, nous remarquons qu’aucune accumulation de l’acide p-coumarique n’a lieu contrairement à l’expérience précédente.5.3.3. Discussion des résultatsQuelle que soit la nature du 4-vinylphénol ajouté à la fermentation (commercial ouproduit par les Saccharomyces), un ralentissement de la bioconversion a été observé lors deces expériences. Ce ralentissement s’exprime par un stockage de l’acide p-coumarique dans lacellule visible avec la chute du bilan matière. Lorsque du 4-vinylphénol commercial a étéutilisé, ce ralentissement s’est accentué. Il pourrait avoir comme origine un épuisement descofacteurs au cours des premières heures. Des concentrations importantes de 4-vinylphénol etde 4-éthylphénol pourraient inhiber les réactions successives de la bioconversion.Lorsque le 4-vinylphénol produit par les levures Saccharomyces a été utilisé, nousassistons au même phénomène de ralentissement de la bioréaction, bien que plus atténué.Nous remarquons alors qu’une faible quantité de 4-vinylphénol a été produite puistransformée d’une façon équivalente en 4-éthylphénol. Toutefois, même si aussi dans ce castout l’acide p-coumarique a été consommé, aucune production supplémentaire en 4-éthylphénol n’a eu lieu. Avec ces résultats, il semble que l’acide p-coumarique peut êtrestocké à l’intérieur de la cellule, si celle-ci n’arrive pas à le transformer directement en 4-vinylphénol puis en 4-éthylphénol.5.4. Effet de la présence de 4-vinylphénol produit par la levure BrettanomycesNous avons voulu tester aussi l’effet d’ajouts successifs d’acide p-coumarique sur unepopulation de Brettanomyces. Ainsi, lorsque la population de Brettanomyces bruxellensis estarrivée en phase stationnaire dans un milieu synthétique vin (MSV), 10 mg/L d’acide p-coumarique ont été ajoutés. Des prélèvements réguliers du milieu sont effectués et analysés.Après 70 h, une autre injection de 15 mg/L d’acide p-coumarique est réalisée. Les profils deconsommation des substrats et de l’apparition des produits sont présentés sur la figure 27.161