Bioconversion de l'acide p-coumarique par Brettanomyces ...

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Etude cinétique de la bioconversionGlucose (g/L)1098765432100 50 100 150 200Temps (h)Figure VI. 2. Consommation du Glucose. Agitation en bain-marie(♦) Répétition 1, (♦) Répétition 2, (♦) Répétition 3Fructose (g/L)9,58,57,56,55,54,53,52,51,50,50 50 100 150 200Temps (h)Figure VI. 3. Consommation du fructose. Agitation en bain-marie(♦) Répétition 1, (♦) Répétition 2, (♦) Répétition 3Les cinétiques de consommation des sucres sont similaires à celles de production debiomasse puisque l’on retrouve les 3 phases aux même temps : consommation lentecorrespondant à la phase de pseudo-latence, consommation rapide pendant la phase decroissance active jusqu’à épuisement à 120 h, temps auquel la concentration en biomassestagne.137
Etude cinétique de la bioconversionNotons également que les vitesses de consommation du glucose et du fructose sontstrictement identiques pour cette souche. Les deux substrats sont assimilés jusqu’àépuisement sans qu’une préférence pour l’un ou pour l’autre ne soit visible.Les mesures des concentrations en éthanol tout au long de la fermentation ont égalementété effectuées. Elles restent quasi constantes aux alentours de la concentration initiale (10%v/v). Dans nos conditions, notre souche ne produit et ne consomme donc que très peud’éthanol à partir des 20 g/L de sucres totaux initiaux.2.1.3. BioconversionIl est connu qu’une population microbienne est stable quand elle arrive à sa phasestationnaire. Afin de limiter les paramètres variables, l’étude de la reproductibilité de labioconversion a été effectuée lorsque la population de Brettanomyces a atteint cette phase. Lafigure 4 présente les profils obtenus lors de la fermentation en bain-marie pour les 3constituants impliqués dans la bioconversion : acide p-coumarique, 4-vinylphénol, 4-éthylphénol. Lors de ces expériences, l’acide coumarique est introduit dans le milieu defermentation en début de phase stationnaire de la biomasse (120 h de fermentation,correspondant au temps zéro sur la figure 4). Afin de ne pas surcharger la figure, seules lescourbes pour 2 répétitions sont présentées. Notons la bonne reproductibilité de ces mesures.Nous ne commenterons pas plus ces courbes ici car nous y reviendrons plus en détail par lasuite.0,060,050,04mmol/L0,030,020,0100 20 40 60 80 100 120Temps (h)Figure VI. 4. Etude de la reproductibilité de la bioconverison en phase stationniareAgitation en bain-marie. (♦) acide p-coumarique, (♦) 4-vinylphénol, (♦) 4-éthylphénol138
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3.5.2. Spectroscopie en IR : Dosage
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5.2. Etude de l’évolution de la
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