Bioconversion de l'acide p-coumarique par Brettanomyces ...

Disponibilité de l’acide p-coumariqueaddition ou élimination d’auxochrome aura un effet direct sur le déplacement de la longueurd’onde maximale (Skoog et al., 2003). Nous rappelons qu’un auxochrome est un groupementchimique qui n’absorbe pas en UV mais qui peut induire une variation de la longueur d’ondemaximale d’absorption lorsqu’il est situé sur un cycle.Ici, l’effet hypsochrome observé pourrait avoir deux origines. En premier lieu, unchangement dans la polarité du solvant entraîne en général un déplacement de la longueurd’onde maximale ; ce déplacement est fonction de la bande, du solvant et de l’analyte. Dansle cas des molécules phénoliques, en passant d’un solvant polaire à un solvant moins polaire(eau puis éthanol), nous devrions observer un déplacement de la bande (π-π*) (284 nm pourl’acide p-coumarique) vers les plus petites longueurs d’ondes. En second lieu, leremplacement du groupement acide carboxylique de l’acide p-coumarique par une fonctionradicalaire induit aussi un déplacement hypsochrome.Des effets moins prononcés mais de même nature ont été observés 24 h après l’ajout del’acide p-coumarique dans le milieu D, où la concentration de l’éthanol ne représentait que10% (v/v) du volume de la solution. D’une façon similaire, nous observons les mêmesvariations en comparant les spectres des milieux E et F. Sauf que l’effet hypochrome dans lemilieu F a eu lieu d’une façon plus intense, ce qui est dû probablement au pH acide du milieusynthétique vin.La variation des spectres des différent milieux nous mènent à penser qu’une réaction peutavoir lieu entre l’acide p-coumarique et l’éthanol. Apparemment, cette réaction est accentuéesi la concentration en éthanol est supérieure (comparaison entre les spectres C et D). Il paraîtde même que le pH acide du milieu favorise l’avancement de cette réaction (Comparaisonmilieu D et F). Ces observations rejoignent celles trouvées précédemment dans lesparagraphes 2.1 et 2.3.3.2. Etude de la réactivité de l’acide p-coumarique avec l’éthanol par RMND’après l’analyse bibliographique ainsi que nos observations préliminaires en UV, noussoupçonnons une réaction d’estérification entre l’acide p-coumarique et l’éthanol. Afin demieux vérifier la nature de cette réaction, nous avons procédé à une analyse en RMN (cf.« Matériels et Méthodes »).100