Bioconversion de l'acide p-coumarique par Brettanomyces ...

Disponibilité de l’acide p-coumarique2.3. Constatations générales sur la dissolution de l’acide p-coumariqueL’acide p-coumarique se présente de façon commerciale sous l’aspect d’une poudrecristalline de couleur blanche ou bien brunâtre. Il doit donc être dissous pour être disponiblepour les microorganismes lors d’une fermentation. Toutefois, la dissolution de cet acide dansun milieu aqueux est assez difficile. En effet, dans de l’eau ultra pure, la dissolution de l’acidep-coumarique se produit au bout d’un temps assez long (plusieurs heures) mais, environ 40heures après, des filaments blancs très fins apparaissent (Figure 3). La solubilité de cet acidedans l’eau est donc très faible. D’après Tsuchiyama et al. (2007), les esters correspondantspeuvent être dissous plus facilement, mais dans le contexte de notre étude sur labioconversion spécifique de l’acide p-coumarique, nous avons choisi d’utiliser cet acide soussa forme pure.Figure IV. 4. Difficulté de la dissolution de l’acide p-coumarique dans l’eauLa solubilité de l’acide p-coumarique pur croît avec la nature organique du solvant etdiminue quand ce solvant est de plus en plus polaire. Ceci s’est vérifié avec l’utilisation deplusieurs solvants lors de différentes expériences. Nous avons ainsi remarqué que la poudrecristalline se solubilisait quasi instantanément dans l’acétonitrile ou bien le DMSO, moinsrapidement dans l’éthanol où une agitation était nécessaire pour faire passer toute la poudreen solution, et très difficilement dans l’eau pure.Après avoir montré que cet acide est instable aux températures de l’autoclavage, il nousreste la possibilité de l’ajouter stérilement, soit après autoclavage des milieux, soit en coursde fermentation.96