Implication des protéines vitamine K-dépendantes dans la ...

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86 CHAP 3-RÉSULTATS et DISCUSSIONS Figure 25 : L’injection intracérébroventriculaire de warfarine induit la prolifération de cellules gliales. Co-immunomarquages du BrdU (vert) et (a, b) de la GFAP (rouge) ou (d, e) de Dcx (rouge) au niveau de l’hémisphère cérébral ispsilatéral de souris injectées avec (a, d) du NaCl ou (b, e) de la warfarine. Barre d’échelle : 200 µm. Pourcentage de la population de cellules BrdU positives immunoréactives (c) pour la GFAP et (f) pour Dcx. *P
3.2 Implication du facteur anticoagulant, protéine S, et de son homoloque structural Gas6 dans la croissance des cultures de CSN issues de la SVZ du cerveau de rongeurs post-natals nouveau-nés, ainsi que dans le milieu conditionné provenant de cultures de plexus choroïdes. Nous rechercherons également la présence de PVKDs dans le liquide céphalorachidien de souris et de brebis. Après avoir identifié la présence de certaines PVKDs dans les cultures de cellules issues de SVZ, nous avons recherché leurs effets sur la prolifération cellulaire et l’autorenouvellement des CSN. 3.2.1 La protéine Gas6 et la protéine S sont les seules PVKDs sécrétées par les cellules de la SVZ in vitro La famille des protéines vitamine K-dépendantes ne comportant qu’une quinzaine de membres, nous avons décidé dans un premier temps d’analyser leur expression par les CSN par RT-PCR. Figure 26 : Les cellules de la SVZ expriment certaines protéines vitamine Kdépendantes. Analyse par RT-PCR de l’expression (a) des PVKDs intervenant dans la coagulation sanguine, (b) des PVKDs de la matrice extracellulaire, (c) de connexines potentiellement γ-carboxylables et (d) de la périostine. (e) L’expression de la GAPDH est utilisée comme contrôle. Pistes 1 et 2 : ARN obtenus de deux extraits cellulaires différents de cellules de SVZ cultivées en conditions basales in vitro ; piste 3 : marqueurs de taille ; piste 4 : ARN obtenus de tissus servant de contrôle positif ; piste 5 : contrôle négatif. 87
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THÈSE Pour l’obtention du Grade
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Mes remerciements s’adressent bie
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SOMMAIRE Avant-propos .............
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AVANT-PROPOS La coagulation du sang
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RCS : Royal College of Surgeons RMS
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16 1.2 La γ-carboxylation des PVKD
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26 1.3 La protéine S et la protéi
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1.3 La protéine S et la protéine
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Gène invalidé Système nerveux Sy
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