Implication des protéines vitamine K-dépendantes dans la ...

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3.1 L’inhibition de la sécrétion des PVKDs stimule la prolifération des CSN issues de la SVZ du cerveau de rongeurs post-natals in vitro et in vivo primaires sont repiquées et les cellules sont à nouveau cultivées pendant 5 jours dans du SFM contenant 20 ng.ml -1 d’EGF. Ce test montre que le traitement à la warfarine n’influence ni le nombre de sphères primaires ni le nombre de sphères secondaires, ce qui signifie que la warfarine et donc l’inhibition de la sécrétion des PVKDs n’a pas d’effet sur la prolifération des cellules de type souches (Figure 22a et 22b). Figure 22 : La suppression de la sécrétion des PVKDs n’augmente pas le nombre de cellules de type souche. (a) Nombre de sphères primaires obtenues en présence de SFM contenant de l’EGF seul (C) ou supplémenté de S-warfarine à 1 µg.ml -1 (W). (b) Nombre de sphères secondaires obtenues après repiquage des sphères primaires. ns, P>0,05. 3.1.2.2 L’inhibition de la sécrétion des PVKDs stimule l’émergence de cellules progénitrices des lignages neuronal et glial Les cultures de cellules souches neurales issues de la SVZ correspondent in vitro à une population hétérogène de cellules constituée de cellules souches neurales immatures, de progéniteurs gliaux et neuronaux, de cellules gliales ainsi que de neurones (Doetsch, 2003). Nous avons tenté de déterminer quelle(s) population(s) cellulaire(s) est (sont) amplifiée(s) par la warfarine. Pour ce faire les cellules de la SVZ sont cultivées durant 5 jours dans du SFM seul ou supplémenté de S-warfarine à 1 µg.ml -1 et des immunomarquages d’antigènes spécifiques des différents types cellulaires sont réalisés (Partie expérimentale, Tableau V). Nos résultats montrent que la warfarine augmente significativement la proportion de cellules du lignage glial (cellules GFAP positives) (Figure 23a) et neuronal (cellules βIIItubuline positives) (Figure 23b), sans affecter la proportion d’oligodendrocytes (cellules O4 positives) (Figure 23c). Ces résultats suggèrent donc que les protéines vitamine Kdépendantes inhibent la prolifération de cellules progénitrices de lignage neuronal et glial. 82
3.1 L’inhibition de la sécrétion des PVKDs stimule la prolifération des CSN issues de la SVZ du cerveau de rongeurs post-natals in vitro et in vivo Figure 23 : La suppression de la sécrétion des PVKDs amplifie la proportion de cellules des lignages glial et neuronal dans les cultures de CSN issue de la SVZ. (a) Pourcentage de cellules GFAP (b), βIII-tubuline et (c) O4 positives obtenues après 5 jours de culture en présence de (C) SFM seul ou (W) supplémenté de S-warfarine. ns, P>0,05, * P
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THÈSE Pour l’obtention du Grade
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Mes remerciements s’adressent bie
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SOMMAIRE Avant-propos .............
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