Implication des protéines vitamine K-dépendantes dans la ...

3.1 L’inhibition de la sécrétion des PVKDs stimule la prolifération des CSN issues de la SVZ
du cerveau de rongeurs post-natals in vitro et in vivo
primaires sont repiquées et les cellules sont à nouveau cultivées pendant 5 jours dans du SFM
contenant 20 ng.ml -1 d’EGF. Ce test montre que le traitement à la warfarine n’influence ni le
nombre de sphères primaires ni le nombre de sphères secondaires, ce qui signifie que la
warfarine et donc l’inhibition de la sécrétion des PVKDs n’a pas d’effet sur la prolifération
des cellules de type souches (Figure 22a et 22b).
Figure 22 : La suppression de la sécrétion des PVKDs n’augmente pas le nombre de
cellules de type souche. (a) Nombre de sphères primaires obtenues en présence de SFM
contenant de l’EGF seul (C) ou supplémenté de S-warfarine à 1 µg.ml -1 (W). (b) Nombre de
sphères secondaires obtenues après repiquage des sphères primaires. ns, P>0,05.
3.1.2.2 L’inhibition de la sécrétion des PVKDs stimule l’émergence de cellules
progénitrices des lignages neuronal et glial
Les cultures de cellules souches neurales issues de la SVZ correspondent in vitro à une
population hétérogène de cellules constituée de cellules souches neurales immatures, de
progéniteurs gliaux et neuronaux, de cellules gliales ainsi que de neurones (Doetsch, 2003).
Nous avons tenté de déterminer quelle(s) population(s) cellulaire(s) est (sont) amplifiée(s) par
la warfarine. Pour ce faire les cellules de la SVZ sont cultivées durant 5 jours dans du SFM
seul ou supplémenté de S-warfarine à 1 µg.ml -1 et des immunomarquages d’antigènes
spécifiques des différents types cellulaires sont réalisés (Partie expérimentale, Tableau V).
Nos résultats montrent que la warfarine augmente significativement la proportion de
cellules du lignage glial (cellules GFAP positives) (Figure 23a) et neuronal (cellules βIIItubuline
positives) (Figure 23b), sans affecter la proportion d’oligodendrocytes (cellules O4
positives) (Figure 23c). Ces résultats suggèrent donc que les protéines vitamine Kdépendantes
inhibent la prolifération de cellules progénitrices de lignage neuronal et glial.
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