Implication des protéines vitamine K-dépendantes dans la ...

1.5 Problématique et objectifs
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CHAP 1- INTRODUCTION
Mon travail de thèse a eu pour objectif majeur de comprendre l’effet des protéines
vitamine K-dépendantes (PVKDs) sur l’activité des cellules souches neurales (CSN) de la
zone sous-ventriculaire du cerveau in vitro et in vivo chez le rongeur nouveau-né et adulte.
Dans un premier temps, nous avons cherché à mettre en évidence l’effet de l’inhibition
de la sécrétion de l’ensemble des PVKDs sur la prolifération, l’autorenouvellement et la
différenciation des CSN de la zone sous-ventriculaire in vitro. Pour cela, les CSN ont été
traitées avec de la warfarine, molécule inhibant la production des PVKDs, ainsi qu’avec des
milieux conditionnés déplétés ou enrichis en protéines vitamine K-dépendantes. Puis, nous
avons analysé in vivo le rôle des PVKDs en réalisant des injections intra-cérébroventriculaires
de warfarine dans le ventricule latéral chez la souris et en observant les cellules de la SVZ en
prolifération. Dans la deuxième partie de cette étude nous avons cherché le profil
d’expression des PVKDs dans les CSN, dans les cultures de plexus choroïdes ainsi que dans
le liquide céphalo-rachidien. Ces résultats obtenus nous ont permis de focaliser notre étude
sur deux protéines vitamine-K dépendantes, à savoir la protéine Gas6 et la protéine S. Nous
avons alors vérifié l’expression de leurs récepteurs tyrosine kinase de la famille TAM ainsi
que leur(s) potentielle(s) activation(s) dans les CSN, puis nous avons étudié l’effet de la
protéine S et de la protéine Gas6 sur la prolifération et l’autorenouvellement des ces cellules.
La protéine Gas6 et la protéine S étant des facteurs impliqués dans diverses étapes de
la phagocytose, nous avons testé la capacité des cellules de la SVZ en culture à phagocyter,
puis étudié l’influence sur ce processus de ces deux PVKDs.
Enfin, alors que de nombreux travaux montrent l’implication dans la physiologie
rétinienne de la protéine Gas6, de la protéine S et de leurs récepteurs, aucun phénotype
rétinien n’a pour le moment été associé à l’invalidation du gène codant pour la protéine Gas6
chez la souris maintenue dans des conditions physiologiques. Dans ces conditions, l’absence
de protéine Gas6 semble être compensée par la présence de protéine S. C’est ainsi que, dans
la dernière partie de mon travail, nous nous sommes intéressés au phénotype rétinien chez les
souris Gas6 -/- en conditions pathologiques suite à une lésion rétinienne par impact laser argon.