Trousse DxSelect Virus de la dengue IgG Caractéristiques des ...

Cas positifs par culture, 100 % (1/1) S/Otype 2Cas positifs par culture, 100 % (5/5) 47,8-100 %type 3Cas positifs par culture, 100 % (1/1) S/Otype 4Cas positif par HI 96 % (23/24) 78,9-99,9 %Globalement 95 % (37/39) 82,7-99,4 %Trousse DxSelect Virus de la dengue IgGCode produit : EL1500GRév. FCaractéristiques des performancesNe pas diffuser aux États-UnisSENSIBILITÉLe site d’investigation 1 a évalué la sensibilité en testant des échantillons desérum bien définis. Chaque échantillon était :1) prélevé chez des patients présentant des symptômes de la dengue (DF) oude la dengue hémorragique (DHF),2) le prélèvement initial du patient,3) prélevé dans une plage de 1 à 16 jours depuis le début des symptômes, et4) confirmé préalablement comme infecté par le virus de la dengue à l’aidede tests ELISA, HI et/ou PCR.Sensibilité du test ELISA IgG de Focus avec échantillons de sérum enphase aiguë (Site 1)Condition Sensibilité IC à 95 %Dengue 98 % (49/50) 89,4-99,9 %Dengue hémorragique 93 % (27/29) 77,2-99,2 %Globalement 96 % (76/79) 89,3-99,2 %Le site d’investigation 2 a évalué la sensibilité en testant des échantillonsappariés de sérum (n = 34) provenant de 17 patients chez lesquels uneinfection par le virus de la dengue était soupçonnée. Chaque patient a subi unprélèvement au début des symptômes et 7 à 10 jours plus tard. L’investigateura testé les échantillons à l’aide du produit et d’un test ELISA IgG del’investigateur.Sensibilité avec des échantillons appariés de sérum en phase aiguë (Site 2)Trousse Durée depuis le Sensibilité IC à 95 %début dessymptômesELISA de Focus 0 jours 100 % (17/17) 80,5-100 %ELISA de Focus 7-10 jours 100 % (17/17) 80,5-100 %ELISA de l'investigateur 0 jours 100 % (17/17) 80,5-100 %ELISA de l'investigateur 7-10 jours 100 % (17/17) 80,5-100 %Le site d’investigation 3 a évalué la sensibilité en testant des échantillons desérum provenant de patients de la dengue positifs par culture (spécifique dutype de virus) ou positifs par test d’inhibition de l’hémagglutination (HI).Sensibilité du test ELISA IgG de Focus avec échantillons de sérumpositifs par culture ou HI (Site 3)Condition Sensibilité IC à 95 %Cas positifs par culture, 88 % (7/8) 47,3-99,7 %type 1Le site d’investigation 4 a évalué la sensibilité envers les infectionsantérieures en testant des échantillons de sérum provenant de patients neprésentant aucun symptôme de la dengue mais étant positifs par testd’hémagglutination.Sensibilité du test ELISA IgG de Focus avec échantillons de sérum depatients ayant eu une infection antérieure (Site 4)Condition Sensibilité IC à 95 %Endémique, positif par 39 %* (13/33) 22,9-57,9 %HI** Des résultats positifs sont attendus pour cette population asymptomatique,car l’IgG a été détecté chez des patients jusqu’à soixante ans après l’infection.Les individus asymptomatiques sont inclus dans la section portant sur lasensibilité et non sur la spécificité, parce que le but de ce test est « d’établirune exposition antérieure » plutôt que d'aider au diagnostic.Le site d’investigation 5 a évalué la sensibilité en testant des échantillons desérum appariés provenant de patients de la dengue (30 patients, 61échantillons au total). Les échantillons de sérum ont été sélectionnés enfonction des critères suivants :1. Chaque patient était soupçonné d’être infecté par le virus de la dengue.2. Les paires d’échantillons présentaient soit une séroconversion par IHA,soit une augmentation d’un facteur deux au minimum des titresd’anticorps pour les échantillons appariés par IHA, et3. Au moins un des échantillons appariés était positif pour l'IgM selon letest ELISA de l'investigateur.Sensibilité avec des échantillons appariés de sérum (Site 5)Trousse 1 er prélèvement 2 ème prélèvement 3 ème prélèvementSensibilité IC à 95 % Sensibilité IC à 95 % Sensibilité IC à 95 %HI del'investigateurELISA del'investigateurELISA IgGde Focus13 %(4/30)20 %(6/30)30 %(9/30)3,8-30,7 %100 %(30/30)7,7-38,6 %100 %(30/30)14,7-49,4 % 90 %(27/30)88,4-100 %88,4-100 %73,5-97,9 %100 %(1/1)100 %(1/1)0 %(0/1)SPÉCIFICITÉLes sites d’investigation 4 et 5 ont évalué la spécificité en testant deséchantillons de sérum provenant d’individus asymptomatiques dans desrégions endémiques ou non.Spécificité du test ELISA IgG de Focus avec échantillons de sérumnormaux (Sites 4 et 5)Condition Spécificité IC à 95 %Normal, non endémique (Site 4) 99 % (158/160) 95,6-99,9 %Enfants, endémique (Site 5) 100 % (43/43) 91,8-100 %Adultes, endémique (Site 5) 77 % (52/68) 64,6-85,9 %Globalement, endémique 86 % (95/111) 77,7-91,5 %Globalement, endémique et nonendémique93 % (253/271) 89,7-96,0 %RÉACTIONS CROISÉESLe site d’investigation 2 a évalué la réactivité croisée en testant des patientsvaccinés contre le virus de la fièvre jaune et des patients infectés par le virusinfluenza.S/OS/OS/O

FOCUS DiagnosticsDengue Virus IgG DxSelectPage 2Spécificité du test ELISA IgG de Focus avec échantillons de sérum àréactions croisées potentielles (Site 2)Condition Spécificité IC à 95 %Immunisation contre le 50 % (3/6)* 11,8-88,2 %virus de la fièvrejaune*Infections par 60 % (9/15)** 32,3-83,7 %influenza**Spécificité globale 57 % (12/21) 34,0-78,2 %* Le site 2 a également observé que 33 % (2/6) des sérums aprèsimmunisation contre le virus de la fièvre jaune comportaient des titres trèsélevés (plus de 1/10 000) avec le test ELISA de l'investigateur.** Le site 2 a également observé que 31 % (5/16) des cas après infection parinfluenza comportaient des titres élevés (plus de 1/600) avec le test ELISAde l'investigateur.Le site d’investigation 8 a évalué la réactivité croisée en testant deséchantillons de sérum de patients infectés par d’autres flavivirus, ainsi qued’autres types de virus. Les deux panels d’échantillons ont été testés à l’aidede la trousse de Focus, du test HI de l’investigateur et d’un test ELISA IgM del’investigateur. Le panel d'échantillons du flavivirus comportait 33échantillons de sérum de patients infectés avec d'autres flavivirus : virus de lafièvre jaune, virus du Nil occidental, virus chikungunya, virus de l'encéphalitejaponaise, virus de la fièvre à phlébotome, virus de Langat, bunyavirus etvirus Wesselsbron.Réactivité croisée chez les individus infectés par les flavivirus (Site 8)TrousseTest HI Dengue type 2de l’investigateurTest ELISA IgMDengue del’investigateurTest ELISA DengueIgG de FocusTrousseHI del'investigateurELISA IgG deFocusRéactionsIC à 95 %croisées39 % (13/33) 22,9-57,9 %12 % (4/32) 3,5-29,0 %61 % (20/33) 42,1-77,1 %Réactivité croisée du test ELISA Dengue IgG de Focuschez les individus infectés par d’autres virus (Site 8)Réactions croiséesEBV ACV CMV VHS VZV Parvovirus Globalement0 % 0 % 0 % 33 % 20 % 10 %(0/4) (0/4) (0/5) (1/3) (1/5) (2/21)25 % 0 % 0 % 33 % 40 % 19 %(1/4) (0/4) (0/5) (1/3) (2/5) (4/21)STABILITÉLes constituants ont été soumis à un vieillissement accéléré équivalent à 1 anà une température comprise entre 2 et 8 ºC, en les incubant à 37 °C. Lesconstituants soumis au vieillissement accéléré ont ensuite été testés selon lanotice de l'emballage, en parallèle avec des constituants non soumis à cevieillissement. Les constituants sont considérés stables s’ils remplissent lescritères de CQ précisés dans la notice de l'emballage. La trousse a réussichaque critère du CQ.REPRODUCTIBILITÉ INTRA-ESSAILe site d’investigation 4 a évalué les variations intra-essai. Deux bandes de 8puits ont été retirées de six plaques différentes, et les bandes ont étéassemblées pour former une nouvelle plaque (pour un total de 12 bandes ou96 puits). La nouvelle plaque a été utilisée pour effectuer un test selon lesinstructions de la notice, en utilisant comme échantillon le calibrateur seuil.La trousse a présenté les variations intra-essai ci-dessous :Reproductibilité intra-essai du test ELISA IgG de FocusPuitsO.D.MoyenneCoefficient devariationBande Plaque1 & 2 1 0,143 3,2 %3 & 4 2 0,142 5,0 %5 & 6 3 0,139 4,6 %7 & 8 4 0,134 5,9 %9 &10 5 0,136 4,8 %11 & 12 6 0,143 5,8 %Total des 12 bandes, 2 bandespar plaque (n = 96 puits)REPRODUCTIBILITÉ INTER-ESSAI0,139 5,4 %Le site d’investigation 4 a évalué les variations inter-essai. Les contrôles etdeux types d'échantillons (un à la limite de détection et un positif) ont ététestés une fois par semaine pendant six semaines. Chaque test a été effectuéselon les instructions de la notice du produit. Les paramètres suivants ont étécalculés : moyenne, écart-type (É.T.), coefficient de variation (C.V.) et% concordance.Reproductibilité inter-essai du test ELISA IgG de FocusÉlément n Moye É.T. C.V. % concordancenneO.D. Calibrateur seuil 6 0,342 0,055 16,1 % S/OIndice du contrôle non 6 0,023 0,011 49,4 % 100 % (6/6)détectableIndice du contrôle détectable 6 2,125 0,105 5,0 % 100 % (6/6)Indice du contrôle positif haut 6 4,990 0,396 7,9 % 100 % (6/6)(n’est plus disponible)Indice du sérum à la limite de 6 0,965 0,148 15,4 % 67 % (4/6)détectionIndice du sérum positif 6 4,818 0,515 10,7 % 100 % (6/6)REPRODUCTIBILITÉ INTER-LOTLe site d’investigation 7 a évalué les variations inter-lot. Les contrôles etéchantillons de sérum (cinq positifs et trois négatifs) ont été testés avec deuxlots de trousse différents. La trousse a présenté la reproductibilité ci-dessous.No.IndiceInterprétationéchantillon Lot 1 Lot 2 % concordanceQC 1 0,412 0,166 100 %QC 3 0,899 0,482 100 %QC 4 1,294 1,596 100 %QC 6 2,540 2,750 100 %QC 7 3,726 4,174 100 %QC 8 7,136 6,449 100 %QC 9 13,521 10,504 100 %QC 10 0,062 0,114 100 %Cypress, Californie 90630 États-Uniswww.focusdx.comPC.EL1500GRév. FDate de rédaction : 11 août 2008