Mutations FGFR3 et P53 dans le cancer de la vessie - Service d ...

HENRI MONDORLes mutations de FGFR3 et de TP53définissent deux voies moléculairedistinctes dans le carcinome urothélialAshraf A. BAKKAR

Génétique des UCC‣ OncogènesH-RAS - ERBB2 - CCND1 – MYC -FGFR3 (40%)‣ Gènes suppresseurs de tumeursPTEN - RB - Altérations sur le chromosome 9(> 50% des tumeurs de tout stade et grade)TP53 (50-70% des tumeurs invasives)

Schéma de la structure de la protéine FGFR3Peptide SignalDomaineextracellulaireDomaineIntracellulaireIg IBoîte acideIg IIIg IIITransmembranaireTK 1TK2Épissage alternatifde la 2 ème partie dudomaine Ig IIIIsoforme III bdans les cellules épithélialesIsoforme III cdans les chondrocytes

Mécanisme d’activation de FGFR3 par les mutationsExemples de mutations : R248C, S249CMutationsS-SR248C - S249C

FGFR3MUTATIONSRôle inhibiteur Oncogène ?Dysplasie squelettique(Germinale)UCC(Somatique)Ig IIg IIIg IIITMTK-1R248C TD I 24 (8.1%)S249C TD I 214 (71.8%)ABIsoform cG370/372C TD I 16 (5.4%)S371/373C TD I 0 (0%)Y373/375C TD I 30 (10.1%)G 375/377C ACH 0 (0%)G380/382R ACH 1 (0.3%)A391/393E C+AN 5 (1.7%)TK-2Dysplasia Thanatophoric Type IDysplasia Thanatophoric Type IIK650/652E TD II 4 (1.3%)K650/652M SADDAN 2 (0.7%)K650/652N,Q HCH 1 (0.3%)K650/652T ? 1 (0.3%)X807/809C,G,L,R,W TD I 0 (0%)N = 298 (100%)

La protéine p53‣ Est un facteur de transcription‣ Les fonctions majeures de p53 sont :- L’arrêt du cycle cellulaire- L’apoptose- La réparation de l ’ADN

Progression Tumorale des UCCsHypothèse de travailDeux voies moléculaires séparées interviendraientdans la progression des UCC (1994)Altérations duChromosome 9Altérationsde TP53Tumeurs papillaires superficiellesCarcinomes in situTumeurs invasives

UrothéliumNormal9-p539-DysplasiePapillairebas gradeNon-invasivep53Papillairehaut gradeNon-invasiveTumeurs envahissantLamina PropriaTumeurs envahissantle muscleMétastases9-CarcinomeIn situprogression invasion

Étude numéro 1Les mutations de FGFR3 et TP53peuvent-elles constituer deux voies moléculaires ?Les altérations du chromosome 9 sont aussi fréquentes dans lestumeurs de haut grade et de haut stade et ne peuvent êtreutilisées comme marqueurs spécifiques des tumeurs papillairesObjectifDémontrer que les mutations de FGFR3 et de TP53définissent bien deux voies moléculaires distinctesdans les UCC au diagnostic initial

MéthodesAnalyses des mutations de FGFR3 et de TP53TumeursExtraction d’ ADNAmplification par PCRDépistage par DHPLCIdentification des mutations par séquencage

Profils d’élutions de la DHPLC d’ADN génomiquenormal et tumoral (FGFR3 exon 7, TP53 exon 6)FGFR3TP53mAU765ADN normalADN tumoralmAU7.5ADN normalADN tumoral435.0212.50-11 2 3 4 5 6Minutes0.0-0.95.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5MinutesGTCC>TGC (S249C)CGA>CTA (R213K)

PATIENTS81 PATIENTS nombre de casStade superficiel In situ 1pTa 31pT1 30invasif pT2 16pT3 2pT4 1Grade G1 10G2 29G3 42

RésultatsLes mutations de FGFR3 et de TP53selon le stade et grade des UCCLes mutations de FGFR3 et de TP53 selon le stadeLes mutations de FGFR3 et deTP53 selon le gradepourcentage des mutations806040200pTan = 31p < 0.0001P < 0.003pT1n = 30pT2-T4n = 19FGFR3TP53pourcentage des mutations80P < 0.008FGFR3P < 0.02 TP536040200G1n = 10G2n = 29G3n = 42Les mutations de FGFR3 sont associées aux tumeurs de bas stade et de bas gradeLes mutations de TP53 sont associées aux tumeurs de haut stade et de haut grade

RésultatsDistribution des génotypes des tumeurs selon le stadepourcentage des patients706050403020100Tan = 31T1n = 30T2-T4n = 19FGFR3mut/ TP53wtFGFR3wt /TP53wtFGFR3wt/ TP53mut.FGFR3mut./TP53mut.Les mutations de FGFR3 et de TP53 sont presquemutuellement exclusives

CONCLUSIONLes mutations de FGFR3 et TP53définissent bien deux voies moléculairesdistinctes dans le développement des UCC

Nous proposons un modèle de progression des UCCsselon les mutations de FGFR3 et de TP53Bas gradeTaFGFR3 muté-9q ?Urothéliumnormal9 (-)T1≥T2TP53 mutéTabacCISHaut grade9 (-)