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Fonction et régulation de la protéine ICAP-1alpha dans la ...

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tel-00435843, version 1 - 24 Nov 2009<br />

I.2.2. <strong>ICAP</strong>-1α <strong>dans</strong> <strong>la</strong> <strong>régu<strong>la</strong>tion</strong> <strong>de</strong> l’affinité <strong>de</strong> l’intégrine β1<br />

<strong>ICAP</strong>-1α régule négativement l’affinité <strong>de</strong> l’intégrine β1 (Bouvard, Aszodi <strong>et</strong> al. 2007). Nos<br />

résultats confirment c<strong>et</strong>te donnée <strong>et</strong> apportent une précision sur le rôle d’<strong>ICAP</strong>-1α <strong>dans</strong><br />

l’étape <strong>de</strong> pré-activation <strong>de</strong> l’intégine β1. L’absence d’<strong>ICAP</strong>-1α ne suffit pas à activer<br />

totalement l’intégrine β1. De <strong>la</strong> même façon, <strong>la</strong> mutation β1 D759A n’induit pas l’activation<br />

complète <strong>de</strong> l’intégrine β1 (Wegener, Partridge <strong>et</strong> al. 2007). La liaison <strong>de</strong> <strong>la</strong> taline sur le<br />

domaine cytop<strong>la</strong>smique <strong>de</strong> <strong>la</strong> sous-unité β reste nécessaire à l’activation complète <strong>de</strong>s<br />

intégrines. Ainsi, <strong>ICAP</strong>-1α limiterait <strong>la</strong> pré-activation <strong>de</strong> l’intégrine <strong>de</strong> <strong>la</strong> même manière que<br />

le pont salin entre les sous-unités α <strong>et</strong> β.<br />

<strong>ICAP</strong>-1α pourrait freiner <strong>la</strong> pré-activation <strong>de</strong>s intégrines en limitant le recrutement <strong>de</strong> <strong>la</strong><br />

taline sur l’intégrine β1. Les sites <strong>de</strong> liaison d’<strong>ICAP</strong>-1α <strong>et</strong> <strong>de</strong> <strong>la</strong> taline sur l’intégrine β1 étant<br />

proches, le recrutement <strong>de</strong> <strong>la</strong> taline pourrait être bloqué par un encombrement stérique.<br />

Cependant, <strong>la</strong> kindline interagit sur l’intégrine β au niveau d’un site proche <strong>de</strong> celui d’<strong>ICAP</strong>-<br />

1α <strong>et</strong> agit en synergie avec <strong>la</strong> taline pour activer les intégines. Bien qu’il n’ait pas encore été<br />

établi si <strong>la</strong> kindline <strong>et</strong> <strong>la</strong> taline se lient simultanément sur l’intégrine, <strong>la</strong> liaison <strong>de</strong> <strong>la</strong> kindline<br />

ne bloque pas l’activation <strong>de</strong>s intégrines par <strong>la</strong> taline. Dans ce sens, il est moins probable que<br />

l’encombrement stérique causé par <strong>la</strong> fixation d’<strong>ICAP</strong>-1α sur β1 empêche le recrutement <strong>de</strong><br />

<strong>la</strong> taline. L’interaction d’<strong>ICAP</strong>-1α sur β1 pourrait induire un changement conformationnel du<br />

domaine cytop<strong>la</strong>smique <strong>de</strong> β1 qui masque le site <strong>de</strong> liaison <strong>de</strong> <strong>la</strong> taline. Egalement,<br />

l’interaction d’<strong>ICAP</strong>-1α avec l’intégrine β1 pourrait bloquer le recrutement <strong>de</strong> <strong>la</strong> kindline <strong>et</strong><br />

par conséquent empêcher l’activation <strong>de</strong> ce récepteur dépendante <strong>de</strong> <strong>la</strong> taline. <strong>ICAP</strong>-1α<br />

constituerait ainsi un point <strong>de</strong> contrôle <strong>dans</strong> l’activation <strong>de</strong>s intégrines. Sans c<strong>et</strong>te barrière, <strong>la</strong><br />

liaison <strong>de</strong> <strong>la</strong> taline n’est plus bloquée <strong>et</strong> seuls les mécanismes régu<strong>la</strong>teurs <strong>de</strong> l’activation <strong>de</strong> <strong>la</strong><br />

taline (concentration locale en PIP2, calpaïne, complexe RIAM/Rap-1) limiterait l’activation<br />

<strong>de</strong>s intégrines.<br />

D’autre part, <strong>la</strong> stimu<strong>la</strong>tion <strong>de</strong>s intégrines au 9EG7 induit un phénotype différent selon l’état<br />

adhérent <strong>de</strong>s cellules. Tandis que le traitement au 9EG7 ne modifie pas l’étalement <strong>de</strong>s<br />

cellules Icap-1 -/- , il stimule l’affinité <strong>de</strong>s récepteurs à <strong>la</strong> fibronectine <strong>dans</strong> ces mêmes cellules<br />

en suspension. Ceci suggère l’existence d’autres facteurs régu<strong>la</strong>nt l‘activation <strong>de</strong>s intégrines<br />

<strong>et</strong> indépendants d’<strong>ICAP</strong>-1α. En eff<strong>et</strong>, <strong>dans</strong> un système adhérent, <strong>la</strong> force appliquée sur les<br />

intégrines par le substrat matriciel <strong>et</strong> le système actino-myosine facilite leur activation<br />

(Astrof, Sa<strong>la</strong>s <strong>et</strong> al. 2006; Puklin-Faucher, Gao <strong>et</strong> al. 2006; Fried<strong>la</strong>nd, Lee <strong>et</strong> al. 2009).<br />

Contrairement aux cellules adhérentes, les intégrines ne sont pas connectées au cytosquel<strong>et</strong>te<br />

d’actine <strong>dans</strong> les cellules en suspension <strong>et</strong> donc aucune force n’est appliquée sur les intégrines<br />

(Burbach, Me<strong>de</strong>iros <strong>et</strong> al. 2007).<br />

L’utilisation du mutant <strong>de</strong> pré-activation β1 D759A a permis <strong>de</strong> montrer que <strong>ICAP</strong>-1α limite<br />

l’assemb<strong>la</strong>ge <strong>de</strong>s adhérences focales en régu<strong>la</strong>nt négativement l’affinité <strong>de</strong> l’intégrine β1<br />

perm<strong>et</strong>tant ainsi d’adapter l’étalement <strong>et</strong> <strong>la</strong> migration cellu<strong>la</strong>ire à <strong>la</strong> <strong>de</strong>nsité <strong>de</strong> <strong>la</strong> MEC. Nos<br />

résultats sont en accord avec les données publiées sur le mutant β1 D759A . C<strong>et</strong>te mutation induit<br />

l’apparition d’adhérences focales en région centrale (Sakai, Zhang <strong>et</strong> al. 1998), favorise<br />

l’activation <strong>de</strong>s intégrines (Hughes, Diaz-Gonzalez <strong>et</strong> al. 1996), le regroupement <strong>de</strong>s<br />

intégrines (Cluzel, Saltel <strong>et</strong> al. 2005) <strong>et</strong> <strong>la</strong> migration cellu<strong>la</strong>ire (Sakai, Jove <strong>et</strong> al. 2001).<br />

Cependant, ni les souris exprimant le mutant β1 D759A ni l’adhérence in vitro <strong>de</strong>s kératinocytes<br />

extraits <strong>de</strong> ces souris ne présentent <strong>de</strong> phénotype (Czuchra, Meyer <strong>et</strong> al. 2006). La différence<br />

du comportement adhésif entre les cellules GD25 β1 D759A <strong>et</strong> les kératinocytes β1 D759A pourrait<br />

provenir d’une compensation <strong>de</strong> <strong>la</strong> mutation <strong>dans</strong> les kératinocytes, ces cellules étant issues<br />

<strong>de</strong> souris mutantes par rapport aux GD25 qui expriment <strong>de</strong> novo le mutant β1. D’autre part,<br />

alors que le phénotype adhésif <strong>de</strong>s cellules Icap-1 -/- est simi<strong>la</strong>ire à celui <strong>de</strong>s cellules β1 D759A ,<br />

Résultats | 63

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