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Fonction et régulation de la protéine ICAP-1alpha dans la ...

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tel-00435843, version 1 - 24 Nov 2009<br />

Figure 26 : La CaMKII <strong>et</strong> <strong>ICAP</strong>-1α agissent <strong>dans</strong> une même voie <strong>de</strong> <strong>régu<strong>la</strong>tion</strong> <strong>de</strong> l’affinité <strong>de</strong> l’intégrine β1.<br />

A. Images prises au microscope confocal (Zeiss, LSM510) <strong>de</strong>s ostéob<strong>la</strong>stes <strong>de</strong> type murin β1 -/- exprimant <strong>la</strong><br />

forme sauvage ou mutante D759A <strong>de</strong> l’intégrine β1 humaine. Les cellules sont traitées au KN-93 (10µM) ou<br />

expriment le mutant actif CaMKII T286D . Après 2 heures d’étalement sur fibronectine (10µg/ml), les cellules sont<br />

fixées <strong>et</strong> immunomarquées afin <strong>de</strong> visualiser <strong>la</strong> vinculine <strong>et</strong> l’intégrine β1 active (marquée au 9EG7). Les<br />

cellules exprimant le mutant CaMKII T286D sont révélées par immunomarquage <strong>de</strong> <strong>la</strong> CaMKIIα. Echelle : 10µm.<br />

B. Analyse morphométrique <strong>de</strong> <strong>la</strong> surface <strong>et</strong> <strong>de</strong> l’intensité <strong>de</strong> fluorescence <strong>de</strong> l’intégrine β1 <strong>dans</strong> les adhérences<br />

focales <strong>de</strong>s ostéob<strong>la</strong>stes β1 sauvage ou β1 D759A traités au KN-93 (10µM) ou exprimant le mutant CaMKII T286D .<br />

C. Images prises au microscope apotome (Zeiss) <strong>de</strong>s ostéob<strong>la</strong>stes β1 sauvage <strong>et</strong> β1 D759A traités ou non au KN-93<br />

(10µM). Après 16 heures d’étalement sur fibronectine (10µg/ml), les cellules sont fixées <strong>et</strong> immunomarquées<br />

afin <strong>de</strong> visualiser <strong>la</strong> vinculine <strong>et</strong> l’intégrine β3 ou l’intégrine β1 activée (marquée au 9EG7). Echelle : 10µm.<br />

Résultats | 99

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