Rapport annuel 2009 - Institut Louis Malardé

••10 espèces de Gambierdiscus ont d’ores et déjà été identifiés, et les conditions réactionnelles pour leurutilisation en PCR en temps réel ont fait l’objet d’une standardisation inter-laboratoires. Les essais decriblage de souches sauvages de Gambierdiscus par single-cell PCR, de même que les essais de PCRquantitative viennent par ailleurs de démarrer.S’agissant de la recherche de marqueurs spécifiques des lignées toxiques de Gambierdiscus, R. PAWLOWIEZsera accueilli prochainement au sein du laboratoire du CCEHBR-NOAA, spécialiste de l’étude des gènes detype Polyketide Synthase (PKS), afin de se former aux techniques de criblage de ces gènes chez lesdinoflagellés.PerspectivesL’ensemble de ces outils, une fois validés, contribuera à accroître la performance et la fiabilité du dispositifactuel de surveillance et d’alerte précoce du risque ciguatérique en PF, en renforçant la surveillance enamont des sites de pêche encore exempts de ciguatéra, et en fournissant un signal précoce de l’apparitiondes CTXs au niveau des populations de Gambierdiscus avant accumulation significative dans les étagestrophiques supérieurs de la chaîne alimentaire. Tests de détection des biotoxines marines•• ObjectifsEn matière de détection, le test de radioligand (RBA) constitue actuellement l’outil-clé des campagnesd’évaluation du risque ciguatérique en PF. Conçu spécifiquement pour la détection des ciguatoxines, il estapplicable à des matrices biologiques variées et complexes, autorise l’emploi d’extraits bruts oupartiellement purifiés, offre une sensibilité élevée, et apparaît économiquement plus viable que le test souris(définitivement abandonné en 2008) car facilement automatisable et permettant une grande capacité detraitement. Cependant, face à la recrudescence de syndromes d’intoxication inédits en PF (parconsommation de bénitiers, d’oursins, etc.) mettant vraisemblablement en jeu de nouvelles familles detoxines, Le LMT se propose d’implanter un second test, mieux adapté aux nouveaux défis sanitaires desrecherches sur les biotoxines marines en PF. Le choix s’est porté sur le test de cytotoxicité cellulaire (testNeuro-2a) qui offre sensiblement les mêmes avantages que le RBA, avec toutefois une sensibilité accrue etune modularité remarquable autorisant la détection d’un large spectre de toxines susceptibles decontaminer les produits de la mer. Ces nombreux avantages en font par ailleurs un excellent candidat pour letest de référence attendu sur le plan international. L’implantation de ce test au LMT constitue l’autre volet duprojet de thèse de R. PAWLOWIEZ.••••••FinancementILM (6 M F.CFP) ; Délégation à la eecherche de PF (4 M F.CFP)Collaborations Dr D. LAURENT – IRD, UMR152, Université Paul Sabatier, CPRBI (France et PF) Dr F. VAN DOLAH, Z. WANG, M-Y. DECHRAOUI-BOTTEIN – Center for coastal environmental health andbiomolecular research (CEHBR), NOAA (USA) Dr F. BOISSON – Agence internationale de l’énergie atomique (AIEA (Monaco) Dr J. DIOGENE-FADINI et A. CAILLAUD – Institut de recherche et de technologie alimentaire (IRTA),(Espagne) Dr S. PAUILLAC et M. GUGGER, Institut Pasteur (France)RésultatsLes objectifs relatifs à l’optimisation et la calibration de ce test au moyen de plusieurs ciguatoxines puresainsi que d’extraits toxiques de cultures de Gambierdiscus, sont d’ores et déjà atteints. Il reste toutefois àvalider ce test sur une plus large gamme de matrices biologiques telles que la chair de poissons, debénitiers, les gonades d’oursin, etc.59