IMAGEN™ Adenovirus - Oxoid

11.1.2 Contrôle négatif
Si un contrôle négatif s'avère nécessaire, il est recommandé d'utiliser des cellules intactes non
contaminées, du même type que celles utilisées pour la culture et l'isolement de l'adénovirus. Les cellules
doivent être préparées et fixées conformément aux indications de la Section 9.2 et colorées comme indiqué
à la Section 10.
11.2 ECHANTILLONS CLINIQUES
11.2.1 Aspect des cellules contaminées par l’adénovirus
Une fluorescence granulaire intranucléaire, nucléaire et/ou cytoplasmique vert-pomme apparaît dans les
cellules épithéliales respiratoires ou conjonctives contaminées par l'adénovirus.
Les cellules non contaminées se colorent en rouge au contact du bleu d’Evans, le contre-colorant.
11.2.2 Interprétation des résultats
Le diagnostic est positif lorsqu'une ou plusieurs cellule(s) présente(nt) une fluorescence caractéristique
dans l'échantillon fixé coloré (voir Section 11.2.1).
Le diagnostic est négatif lorsque les échantillons fixés et colorés ne présentent pas de fluorescence après
marquage avec le réactif.
En ce qui concerne les échantillons ophtalmiques ou d'aspirations nasopharyngiennes colorés directement,
un minimum de 20 cellules épithéliales respiratoires ou conjonctives non infectées doit être visible pour
permettre de conclure à un résultat négatif. Voir Section 11.2.3 s'il n'y a pas suffisamment de cellules.
11.2.3 Quantité de cellules insuffisante
S'il n'y a pas suffisamment de cellules sur la lame, centrifuger le reste de l'échantillon clinique à 380g,
pendant 10 minutes, à température ambiante (15-30 °C). Remettre les cellules en suspension dans un plus
petit volume de PBS avant répartition (25µL) sur la lame.
Le cas échéant, il est conseillé de prélever un nouvel échantillon.
11.3 CONFIRMATION DE LA CULTURE CELLULAIRE
11.3.1 Aspect de cellules contaminées par l'adénovirus
Une fluorescence intracellulaire, nucléaire et/ou cytoplasmique, vert-pomme apparaît dans les cellules
infectées qui doivent être notées comme étant contaminées par l’adénovirus.
Les cellules non contaminées se colorent en rouge au contact du, bleu d’Evans, le contre-colorant.
11.3.2 Interprétation des résultats
Le diagnostic est positif lorsqu'au moins une cellule dans l’échantillon fixé et coloré affiche le type de
fluorescence décrit à la Section 11.3.1. après marquage à l'aide du réactif.
Pour pouvoir conclure à un résultat négatif, il est nécessaire de relever un minimum de 50 cellules non
infectées dans le puits de la lame contenant la culture cellulaire testée. Voir Section 11.3.3 s'il n'y a pas
suffisamment de cellules.
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