210x270 Myoline N° 1 - Institut de Myologie

LU POUR VOUS
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contrôles. Des injections répétées sont possibles, bien tolérées
et améliorent les rendements finaux de transduction. Des
examens histologiques et des tests fonctionnels mettent en
évidence une protection des fibres musculaires des souris
traitées (d’un facteur 2.5 à 5 par rapport aux souris non
traitées) et une amélioration des performances mécaniques.
L’expression quantitative de la dystrophine, à un niveau de
18 à 20% ou par 11 à 16% des fibres musculaires, suffit à
conférer cette protection importante et persistante. La nature
de la construction conditionne l’intensité de l’expression du
transgène. Enfin, la production de dystrophine provoque une
réaction immunologique de type humoral qui n’entraîne
cependant pas l’élimination des fibres transduites.
Zhang G, Wooddell CI, Hegge JO, Griffin JB, Huss T, Braun S, Wolff JA,
Functional efficacy of dystrophin expression from plasmids delivered to
mdx mice by hydrodynamic limb vein injection, Hum Gene Ther, 2009,
doi: 10.1089/hum.133, In Press
DM1 : un oligonucléotide antisens réduit les agrégats
JEAN-THOMAS VILQUIN COMMENTAIRE
La dystrophie myotonique de type 1 (DM1), maladie à transmission
dominante, est liée à la toxicité d’une expansion d’un
triplet localisé dans les transcrits de la protéine DMPK (expansion
CUG). Ce long segment serait impliqué notamment dans
la séquestration de la protéine Muscleblind (Mbnl1), formant
des agrégats ribonucléaires ainsi que dans la stabilisation de
CUGBP1 (CUG binding protein 1). Ceci induit des déséquilibres
entre facteurs de transcription et facteurs d’épissage provoquant
des épissages aberrants de nombreux pré-messagers.
Les effets toxiques de ces transcrits sont cependant réversibles
dans des modèles cellulaires et animaux.
Un nouveau modèle murin est décrit, la souris DM300, qui
exprime un gène DMPK humain mutant contenant (CUG)300.
En utilisant des myoblastes et des myotubes issus de ce
nouveau modèle murin ainsi que des cellules de patients
atteints de DM1, un oligonucléotide antisens (le composé
PS58) a été mis au point. Il contient une séquence (CAG)7
capable de réduire au silence l’expression du transcrit DMPK
mutant et de réduire le nombre d’agrégats ribonucléaires. Cet
effet est rapide, persistant dans le temps et n’empêche pas le
fonctionnement des transcrits normaux du gène DMPK. In
vivo, l’administration intramusculaire de cet oligonucléotide
dans le modèle murin réduit la toxicité de l’expansion mutée.
Ceci se traduit par une diminution du nombre et de la taille des
agrégats ribonucléaires et par la normalisation de l’épissage
de pré-messagers, notamment l’élimination des épissages de
types embryonnaires.
Mulders SA, van den Broek WJ, Wheeler TM, Croes HJ, van Kuik-Romeijn
P, de Kimpe SJ, Furling D, Platenburg GJ, Gourdon G, Thornton CA,
Wieringa B, Wansink DG, Triplet-repeat oligonucleotide-mediated
reversal of RNA toxicity in myotonic dystrophy, Proc Natl Acad Sci USA,
2009, 33 :13915-20
males (Hagstrom et al, Mol Ther, 2004,10 : 386-98;
Zhang et al, Hum Gene Ther, 2001,12 : 427-38;
Rodino-Klapac et al, 2007, J Transl Med., 5 : 45).
La technique présentée allie des avantages de
rapidité, de simplicité, d’efficacité et de bonne
tolérance, lorsqu’on la compare aux techniques
d’injection artérielle, à l’utilisation d’agents
vasoactifs, voire même à l’électroporation intramusculaire
in vivo. A ce titre, il s’agit certainement
d’un outil expérimental précieux pour le développement
préclinique et la recherche fondamentale.
En outre, cette étude repositionne l’utilisation des
plasmides nus dans l’arsenal des vecteurs de thérapie
génique. Elle suggère également des seuils
de transduction nécessaires à l’obtention d’une
protection significative et durable des fibres musculaires.
Cette méthodologie reste encore limitée
à la transduction locorégionale.
Cet article propose un usage alternatif des
méthodes dites “antisens”. La molécule PS58 utilisée
inhibe, de manière directe ou indirecte, des
interactions délétères entre des protéines normales
et un ARN pathogène contenant ces expansions
de triplet. Cette méthode assez générale
agirait sur la toxicité dans son ensemble : en aval
de la formation de RNAs toxiques, puis en cascade.
Des résultats analogues ont été obtenus par
d’autres équipes (Wheeler et al, Science , 2009,
325 :336-9), en utilisant des modèles cellulaires
et animaux différents. Ils soulignent le côté dynamique
de la formation (et de la résorption éventuelle)
des agrégats ribonucléaires. Le principe
pourrait être étendu à d’autres maladies liées à
des expansions de triplets, telles que la dystrophie
myotonique de type 2 (DM2), le syndrome
de l'X fragile (FRAXA), la dystrophie musculaire
oculopharyngée. L’un des défis est de concevoir
et de délivrer des oligonucléotides antisens
adaptés à la voie systémique. Dans cette étude, il
s’agissait de transfecter des cellules à l’aide de
vecteurs non viraux ou de transduire les muscles
squelettiques par électroporation de plasmides
in vivo. Les progrès récents concernant la biodisponibilité
de nouvelles classes d’oligonucléotides
permettent d’espérer l’identification de molécules
adaptées à l’usage systémique. Enfin, des
études devront porter sur les doses actives
permettant une interaction efficace avec les
cibles mutées sans affecter les séquences CUG
naturellement présentes.
36 N°2 AVRIL 2010 Les cahiers de myologie