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Les grenouilles vertes en Flandre et en - Natagora

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Gr<strong>en</strong>ouilles <strong>vertes</strong><br />

indigènes <strong>et</strong> exotiques <strong>en</strong><br />

<strong>Flandre</strong> <strong>et</strong> <strong>en</strong> Région<br />

Bruxelles-capitale<br />

Robert Jooris & Gri<strong>et</strong> Holsbeek<br />

12-4-2010 1


2 espèces m<strong>en</strong>deli<strong>en</strong>nes: ridibundus <strong>et</strong> lessonae<br />

+<br />

un hybride: escul<strong>en</strong>tus <strong>en</strong> Europe occid<strong>en</strong>tale,<br />

c<strong>en</strong>trale <strong>et</strong> ori<strong>en</strong>tale<br />

escul<strong>en</strong>tus-synklepton<br />

grafisynklepton<br />

nord-est de l’ Espagne <strong>et</strong> sudest<br />

de la France<br />

une espèce m<strong>en</strong>deli<strong>en</strong>ne: perezi + un hybride: escul<strong>en</strong>tus<br />

12-4-2010 2


Europe occid<strong>en</strong>tale <strong>et</strong> c<strong>en</strong>trale : lessonae –<br />

escul<strong>en</strong>tus synklepton (l-e-P)<br />

R-hybridogénèse<br />

2 pairs de<br />

chromosomes =<br />

cellules diploïdes<br />

12-4-2010 3


Hybridation originel<br />

LL = P. lessonae<br />

LR = P. escul<strong>en</strong>tus<br />

RR = P. ridibundus<br />

12-4-2010 4


Observations de <strong>gr<strong>en</strong>ouilles</strong> <strong>vertes</strong> <strong>en</strong> <strong>Flandre</strong> <strong>et</strong> <strong>en</strong> Région<br />

Bruxelles capitale) p<strong>en</strong>dant la période1990 – 2009<br />

Carrés IFBL de 1 km (observations réelles) <strong>et</strong> de 4 km de côté : toutes les espèces<br />

12-4-2010 5


Premières cartes de répartion par IFBL carrés de 4 km de<br />

côté <strong>en</strong> 1985.<br />

Détermination de l’ espèce sur la morphométrie<br />

Burny J. & Par<strong>en</strong>t G.H., 1985. <strong>Les</strong> Gr<strong>en</strong>ouiles <strong>vertes</strong> de la Belgique <strong>et</strong><br />

des régions limotrophes. Données chorologiques <strong>et</strong> écologiques.<br />

Alytes, 4(1): 12-33<br />

12-4-2010 6


“Onderzoek van 124 gro<strong>en</strong>e kikkers (museumpreparat<strong>en</strong>) naar<br />

vorm van m<strong>et</strong>atarsusknobbel, <strong>en</strong> de verhouding<strong>en</strong> van de l<strong>en</strong>gte<br />

hielgewrichtsknobbel tot de l<strong>en</strong>gte eerste te<strong>en</strong> <strong>en</strong> de l<strong>en</strong>gte van h<strong>et</strong><br />

sche<strong>en</strong>be<strong>en</strong> lat<strong>en</strong> ge<strong>en</strong> duidelijke onderverdeling in groep<strong>en</strong> toe”<br />

“Verder onderzoek zal mo<strong>et</strong><strong>en</strong> uitwijz<strong>en</strong> of ook R. ridibunda<br />

inderdaad aanwezig is in België zoals gesuggereerd door één<br />

exemplaar”<br />

Hulselmans, J.L.J., 1979. Morfologische gegev<strong>en</strong>s b<strong>et</strong>reff<strong>en</strong>de “Rana<br />

escul<strong>en</strong>ta” in België (Anura, Ranidae). Annales Soc. R. Zool. Belg., T.<br />

108, fasc. 3-4: 151-158<br />

12-4-2010 7


Id<strong>en</strong>tification des espèces:<br />

morphologie, morphométrie,<br />

analyse moleculaire<br />

Morphologie:<br />

détermination<br />

a priori<br />

Morphométrie:<br />

classification<br />

a posteriori<br />

Analyse moleculaire<br />

(ADN)<br />

12-4-2010 8


Détermination morphologique<br />

forme du corps: conique<br />

ou allongé<br />

blot dessin dorsale, du tibia <strong>et</strong><br />

du fémur<br />

coloration dorsale<br />

ligne vertébrale : + of –<br />

forme du tubercule métatarsi<strong>en</strong>:<br />

caractère le plus important!!!<br />

12-4-2010 9


Détermination morphométrique<br />

longueur du corps - KRL<br />

longueur du tibia – TL<br />

longuer 1 e doigt (digitus primus) – DPL<br />

longuer tubercule métatarsi<strong>en</strong> -<br />

(callus internus) - CIL<br />

12-4-2010 10


Analyse moléculaire<br />

Séqu<strong>en</strong>çage de l’ADN <strong>et</strong><br />

analyse microsatellite<br />

12-4-2010 11


100<br />

90<br />

Box Plot mâles<br />

Kruskal-Wallis:<br />

H ( 2, N= 725) = 400<br />

p < 0.001<br />

55<br />

50<br />

45<br />

Box Plot mâles<br />

Kruskal-Wallis:<br />

H ( 2, N= 727) = 473<br />

p


110<br />

Box Plot femelles<br />

60<br />

Box Plot femelles<br />

100<br />

90<br />

Kruskal-Wallis:<br />

H ( 2, N= 374) = 86<br />

p < 0,001<br />

55<br />

50<br />

Kruskal-Wallis:<br />

H ( 2, N= 374) = 200<br />

p = < 0.001<br />

80<br />

45<br />

40<br />

KRL<br />

70<br />

TL<br />

35<br />

60<br />

30<br />

50<br />

25<br />

40<br />

30<br />

RE RL RR<br />

TAXON<br />

Median<br />

25%-75%<br />

Non-Outlier Range<br />

Outliers<br />

20<br />

15<br />

RE RL RR<br />

TAXON<br />

Median<br />

25%-75%<br />

Non-Outlier Range<br />

Outliers<br />

14<br />

Box Plot femelles<br />

6,0<br />

Box Plot femelles<br />

12<br />

Kruskal-Wallis:<br />

H ( 2, N= 375) =189<br />

p


caractéristiques morphométriques<br />

analyse multivariée (analyse discriminante)<br />

démarcation claire <strong>en</strong> trois groupes<br />

12-4-2010 14


5<br />

Canonical scores mâles<br />

(n=724; Wilk's Lambda = 0,1750; F(8,143) = 249,58; p


5<br />

Canonical scores femelles<br />

(n=374; Wilks' Lambda = 0,1754; F(7,736) = 127,64; p


Comparaison de la détermination a priori<br />

(morphologie) - a posteriori (morphométrie) (mâles)<br />

RL: P. lessonae, RR: P. ridibundus, RL: P. escul<strong>en</strong>tus<br />

Group<br />

RE<br />

RL<br />

RR<br />

Total<br />

Classification Matrix males<br />

Rows: Observed classifications<br />

Columns: Predicted classifications<br />

Perc<strong>en</strong>t RE RL RR<br />

Correct p=,57597 p=,22514 p=,19890<br />

94 393 11 13<br />

97 5 158 0<br />

80 29 0 115<br />

92 427 169 128<br />

12-4-2010 17


Comparaison de la détermination a priori<br />

(morphologie) - a posteriori (morphométrie) (femelles)<br />

RL: P. lessonae, RR: P. ridibundus, RL: P. escul<strong>en</strong>tus<br />

Group<br />

RE<br />

RL<br />

RR<br />

Total<br />

Classification Matrix females<br />

Rows: Observed classifications<br />

Columns: Predicted classifications<br />

Perc<strong>en</strong>t<br />

Correct<br />

RE<br />

p=,42781<br />

RL<br />

p=,27273<br />

RR<br />

p=,29947<br />

90 144 7 9<br />

95 5 97 0<br />

84 18 0 94<br />

90 167 104 103<br />

12-4-2010 18


Comparaison de la détermination morphologique<br />

avec l’analyse moléculaire<br />

microsatellites Res 16 & Rica 1b5) (*)<br />

Re Rl Rr % correct<br />

M V M V M V M V<br />

Re 60 52 4 0 1 4 92 93<br />

Rl 0 1 72 39 0 0 100 97<br />

Rr 4 4 0 0 27 43 87 91<br />

(*) Holsbeek G., Maes G.E., De Meester L. & Volckaert F.A.M.,<br />

Mol. Ecol., 18: 1071-1087. Molecular conservation in the<br />

introgressed European water frog complex<br />

12-4-2010 19


Id<strong>en</strong>tification des espèces<br />

par le chant des mâles<br />

chant des mâles: spécifique à l’ espèce<br />

cri territorial: moins spécifique<br />

libération cri: non spécifique<br />

terreur appel: non spécifique à l’ espèce mais habituellem<strong>en</strong>t<br />

chez la Gr<strong>en</strong>ouille rieuse<br />

12-4-2010 20


12-4-2010 21


Gr<strong>en</strong>ouille de <strong>Les</strong>sona<br />

Gr<strong>en</strong>ouille verte<br />

sacs vocaux: blanc ou blanchâtres<br />

sacs vocaux blanchâtres ou sombres<br />

12-4-2010 22


Paramètres de chant chez les<br />

Gr<strong>en</strong>ouilles rieuses<br />

Paramètres indép<strong>en</strong>dants de la<br />

température:<br />

nombres de groupes d’ impulsions<br />

nombre d’ impulsions par groupe<br />

Schneider H. & Sinsch U., 1992. Mating call variations in Lake frogs referred to as Rana<br />

ridibunda Pallas, 1771: taxonomic implications. Z. zool. Syst. Evol.- Forsch. 30: 297-315<br />

Schneider H. & Sinsch U., 1999. Taxonomic reassessm<strong>en</strong>t of Middle Eastern water frogs:<br />

Bioacoustic variation among populations considered as Rana ridibunda, R. bedriagae or R.<br />

levantina. J. Zool. Syst. Evol. Research 37: 57-65<br />

12-4-2010 23


Gr<strong>en</strong>ouille rieuse<br />

Gr<strong>en</strong>ouille de Bedriaga<br />

sacs vocaux: gris ou gris noir<br />

12-4-2010 24


Répartition Gr<strong>en</strong>ouille de <strong>Les</strong>sona<br />

(Pelophylax lessonae)<br />

par IFBL carrés de 4 <strong>et</strong> 1 km de côté ,<br />

période 1990 - 2009<br />

12-4-2010 25


Habitat de préfér<strong>en</strong>ce sur le ‘Groot-Schi<strong>et</strong>veld’ à Brecht -Wuustwezel<br />

12-4-2010 26


Habitat dans les ‘Halsche beemd<strong>en</strong>’ à Hoogstrat<strong>en</strong><br />

12-4-2010 27


Répartition Gr<strong>en</strong>ouille verte<br />

(Pelophylax escul<strong>en</strong>tus)<br />

par IFBL carrés de 4 <strong>et</strong> 1 km de côté ,<br />

période 1990 - 2009<br />

12-4-2010 28


Choix de l’habitat chez la Gr<strong>en</strong>ouille de <strong>Les</strong>sona<br />

<strong>et</strong> la Gr<strong>en</strong>ouille verte<br />

300<br />

250<br />

253<br />

Gr<strong>en</strong>ouille verte<br />

Gr<strong>en</strong>ouille de <strong>Les</strong>sona<br />

Gr<strong>en</strong>ouille verte: peu difficile,<br />

dans les eaux oligotrophes <strong>et</strong><br />

eutrophes<br />

200<br />

Gr<strong>en</strong>ouille de <strong>Les</strong>sona:<br />

150<br />

100<br />

131<br />

103<br />

<strong>en</strong> particulier dans les eaux<br />

oligotrophes ou mésotrophes <strong>en</strong><br />

Campine!<br />

50<br />

0<br />

31<br />

eaux eutrophes<br />

eaux mésotrophes <strong>et</strong><br />

oligotrophes<br />

Significative de préfér<strong>en</strong>ce <strong>en</strong>tre<br />

les deux espèces:<br />

χ2=74,86, p=0,0000, df=1<br />

12-4-2010 29


Répartition Gr<strong>en</strong>ouille rieuse<br />

(Pelophylax ridibundus)<br />

par IFBL carrés de 4 <strong>et</strong> 1 km de côté ,<br />

période 1990 - 2009<br />

12-4-2010 30


En <strong>Flandre</strong> <strong>et</strong> <strong>en</strong><br />

Région Bruxellescapitale<br />

:<br />

deux espèces de<br />

Gr<strong>en</strong>ouilles rieuse<br />

asiatique!<br />

12-4-2010 31


12-4-2010 32


Répartition de la Gr<strong>en</strong>ouille de<br />

Bedriaga(Pelophylax bedriagae)<br />

par IFBL carrés de 4 <strong>et</strong> 1 km de côté ,<br />

période 1990 - 2009<br />

12-4-2010 33


Habitat de reproduction de la Gr<strong>en</strong>ouille de Bedriaga (P. bedriagae) à<br />

Nieuwkerk<strong>en</strong>-Waas<br />

12-4-2010 34


Répartition des Gr<strong>en</strong>ouilles d’<br />

Anatolie (Pelophylax cf. bedriagae)<br />

par IFBL carrés de 4 <strong>et</strong> 1 km de côté ,<br />

période 1990 - 2009<br />

12-4-2010 35


Répartition des Gr<strong>en</strong>ouilles rieuses s<strong>en</strong>su lato<br />

(Pelophylax ridibundus s<strong>en</strong>su lato)<br />

par IFBL carrés de 4 <strong>et</strong> 1 km de côté ,<br />

période 1990 - 2009<br />

12-4-2010 36


Répartition des Gr<strong>en</strong>ouilles <strong>vertes</strong> non déterminées<br />

(Pelophylax escul<strong>en</strong>tus-synklepton)<br />

par IFBL carrés de 4 <strong>et</strong> 1 km de côté , période 1990 - 2009<br />

12-4-2010 37


Répartition des<br />

différ<strong>en</strong>tes populations<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

Populations mixtes de Gr<strong>en</strong>ouilles de <strong>Les</strong>sona <strong>et</strong> Gr<strong>en</strong>ouilles<br />

<strong>vertes</strong> ( e-l-P): surtout dans la Campine<br />

Pure populations de Gr<strong>en</strong>ouilles <strong>vertes</strong> (e-P): de plus <strong>en</strong> plus rare<br />

<strong>en</strong> raison de la colonisation par la Gr<strong>en</strong>ouille rieuse. Ils surviv<strong>en</strong>t<br />

<strong>en</strong>core dans la région côtière, les polders, Heuvelland, Ypres, vallée<br />

de la Durme, certaines région du Brabant Flamand <strong>et</strong> la Campine<br />

Populations mixtes de Gr<strong>en</strong>ouilles <strong>vertes</strong> <strong>et</strong> Gr<strong>en</strong>ouilles rieuses (er-P):<br />

particulièrem<strong>en</strong>t dans la vallée de l’ Escaut, B<strong>en</strong>ed<strong>en</strong>-N<strong>et</strong>e <strong>et</strong><br />

Brabant Flamand<br />

Populations mixtes de Gr<strong>en</strong>ouilles de <strong>Les</strong>sona, Gr<strong>en</strong>ouilles <strong>vertes</strong><br />

<strong>et</strong> Gr<strong>en</strong>ouilles rieuses (e-l-r-P): observé à huit <strong>en</strong>droits . A Rijm<strong>en</strong>an<br />

(Kass<strong>en</strong>broek), Beerse, Tielrode, Rillaar, Mechel<strong>en</strong> a/d Maas <strong>et</strong><br />

Hasselt<br />

Pures populations de Gr<strong>en</strong>ouilles rieuses (r-P + taxa Asiatiques):<br />

Région de Bruxelles-capitale, Linkebeek, Louvain, Brabant<br />

(Hagelland <strong>et</strong> Hasp<strong>en</strong>gouw) t<br />

12-4-2010 38


Sex-ratio des différ<strong>en</strong>tes populations<br />

population espèces ♂♂ ♀♀ sex-ratio<br />

e-l-P (44) Gr<strong>en</strong>ouille verte 157 131 1,2<br />

Gr<strong>en</strong>ouille de <strong>Les</strong>sona 160 98 1,6<br />

e-r-P (27) Gr<strong>en</strong>ouille verte 98 6 16,3<br />

Gr<strong>en</strong>ouille rieuse 99 72 1,4<br />

e-P (19) Gr<strong>en</strong>ouille verte 161 23 7,0<br />

r-P (8) Gr<strong>en</strong>ouille rieuse 31 39 0,8<br />

χ2: 53,02, p = 0.0000, df=1 (e-l-P <strong>et</strong> e-r-P)<br />

écarts statistiques significantes<br />

χ2: 55,57, p = 0.0000, df=1 (e-l-P <strong>et</strong> e-P)<br />

12-4-2010 39


Ploïdie (%) de la Gr<strong>en</strong>ouille verte dans<br />

les différ<strong>en</strong>tes populations<br />

100<br />

90<br />

80<br />

2n (♂♂ <strong>et</strong> ♀♀)<br />

3n (♂♂ <strong>et</strong> ♀♀)<br />

70<br />

e-l-P : individus diploïdes +++<br />

60<br />

50<br />

40<br />

e-r-P <strong>en</strong> e-P: individus<br />

triploïdes +++<br />

30<br />

20<br />

10<br />

0<br />

e-l-P e-r-P e-P<br />

12-4-2010 40


Ploïdie (%) de la Gr<strong>en</strong>ouille verte (par sexe) dans les<br />

différ<strong>en</strong>tes populations<br />

100<br />

90<br />

80<br />

2n ♂♂<br />

2n ♀♀<br />

100<br />

90<br />

80<br />

3n ♂♂<br />

3n ♀♀<br />

70<br />

70<br />

60<br />

60<br />

50<br />

50<br />

40<br />

40<br />

30<br />

30<br />

20<br />

20<br />

10<br />

10<br />

0<br />

e-l-P e-r-P e-P<br />

0<br />

e-l-P e-r-P e-P<br />

triploïde individus (LLR) de la Gr<strong>en</strong>ouille verte remplac<strong>en</strong>t les<br />

Gr<strong>en</strong>ouilles de <strong>Les</strong>sona : fournisseurs de la L-génome<br />

12-4-2010 41


12-4-2010 42

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