Trousse IFA Anaplasma phagocytophilum IgM Caractéristiques des ...
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<strong>Trousse</strong> <strong>IFA</strong> <strong>Anaplasma</strong> <strong>phagocytophilum</strong><br />
<strong>IgM</strong><br />
Code produit : IF1450M<br />
Rév. C<br />
Caractéristiques <strong>des</strong> performances<br />
SPÉCIFICITÉ<br />
Ne pas diffuser aux États-Unis<br />
Deux investigateurs externes et un investigateur interne ont<br />
évalué la spécificité du test à l'aide d’un total de<br />
85 échantillons de sérum : 60 échantillons provenant de<br />
régions non endémiques et 25 échantillons provenant d’une<br />
région endémique. Tous les échantillons de sérum provenaient<br />
de donneurs non exposés. Le test d’immunofluorescence (<strong>IFA</strong>)<br />
<strong>Anaplasma</strong> <strong>phagocytophilum</strong> <strong>IgM</strong> de Focus était négatif pour<br />
100 % (45/45) <strong>des</strong> échantillons provenant de régions<br />
endémiques et non endémiques européennes. Parmi les<br />
échantillons provenant de régions non endémiques <strong>des</strong> États-<br />
Unis, le test d’immunofluorescence (<strong>IFA</strong>) <strong>Anaplasma</strong><br />
<strong>phagocytophilum</strong> <strong>IgM</strong> de Focus était négatif pour 97,5 %<br />
(39/40) <strong>des</strong> cas.<br />
Spécificité chez les donneurs de sang<br />
Population % Négatif IC à 95 %<br />
Région endémique (Slovénie) 100 % (25/25)†<br />
86,3-100 %<br />
Région non endémique<br />
(France)<br />
100 % (20/20)<br />
83,2-100 %<br />
Région non endémique<br />
(États-Unis)<br />
97,5 % (39/40)<br />
86,8-99,9 %<br />
† Un échantillon coté comme négatif présentait une réactivité non spécifique.<br />
SENSIBILITÉ<br />
Sensibilité chez <strong>des</strong> patients positifs par PCR/frottis<br />
sanguin en fonction du temps<br />
Un investigateur externe a évalué la sensibilité à l'aide de<br />
trente échantillons de sérum provenant de quinze patients<br />
ayant été diagnostiqués avec une infection par <strong>Anaplasma</strong><br />
<strong>phagocytophilum</strong>. Le diagnostic de l’infection par <strong>Anaplasma</strong><br />
<strong>phagocytophilum</strong> était fondé sur les critères suivants :<br />
1) maladie fébrile aiguë, et<br />
2) morsure de tiques du genre Ixo<strong>des</strong> dans une région<br />
endémique, et<br />
3) confirmation en laboratoire (positif par PCR et/ou<br />
frottis sanguin).<br />
La PCR était spécifique de l’ADNr 16S d’<strong>Anaplasma</strong><br />
<strong>phagocytophilum</strong> et a été décrite par Chen et al. 1 . Les frottis<br />
sanguins étaient décrétés positifs si <strong>des</strong> morulas<br />
intracytoplasmiques pouvaient être identifiées dans le sang, la<br />
moelle osseuse ou le LCR. La sensibilité a été stratifiée selon<br />
le nombre de jours depuis le début <strong>des</strong> symptômes. Parmi les<br />
trente échantillons, 14 avaient été prélevés moins de 60 jours<br />
après le début <strong>des</strong> symptômes, 13 plus de 60 jours après, et<br />
trois ont été prélevés à une période indéterminée après le début<br />
<strong>des</strong> symptômes. Le test <strong>IFA</strong> <strong>Anaplasma</strong> <strong>phagocytophilum</strong> <strong>IgM</strong><br />
de Focus a présenté la sensibilité suivante :<br />
Moins de 60 jours : parmi les quatorze échantillons prélevés<br />
moins de 60 jours après le début <strong>des</strong> symptômes, 71,4 %<br />
(10/14) étaient positifs.<br />
Plus de 60 jours : parmi les treize échantillons prélevés plus<br />
de 60 jours après le début <strong>des</strong> symptômes, 7,7 % (1/13) étaient<br />
positifs.<br />
Inconnu : parmi les trois échantillons prélevés à une période<br />
indéterminée après le début <strong>des</strong> symptômes, 100 % (3/3)<br />
étaient positifs.<br />
Sensibilité chez <strong>des</strong> patients positifs par PCR/frottis<br />
sanguin en fonction du temps<br />
Période depuis le début <strong>des</strong> % Positif IC à 95 %<br />
symptômes<br />
Moins de 60 jours 71,4 % (10/14)<br />
41,9-91,6 %<br />
Plus de 60 jours 7,7 % (1/13)<br />
0,2-36,0 %<br />
Inconnu 100,0 % (3/3)<br />
29,2-100 %
FOCUS Diagnostics<br />
Sensibilité avec <strong>des</strong> échantillons appariés de sérum<br />
Un investigateur externe a évalué la sensibilité à l'aide de<br />
15 paires d’échantillons de sérum prélevés à un intervalle d’au<br />
moins deux semaines chez 15 patients ayant été diagnostiqués<br />
avec une infection par <strong>Anaplasma</strong> <strong>phagocytophilum</strong>. Le<br />
diagnostic de l’infection par <strong>Anaplasma</strong> <strong>phagocytophilum</strong><br />
était fondé sur les critères suivants :<br />
1) symptômes cliniques compatibles avec une infection par<br />
<strong>Anaplasma</strong> <strong>phagocytophilum</strong> et<br />
2) un changement d’un facteur quatre ou plus du titre<br />
d’<strong>Anaplasma</strong> <strong>phagocytophilum</strong>, déterminé à l'aide d'un<br />
test <strong>IFA</strong> IgG développé par l'investigateur.<br />
Les symptômes cliniques comprenaient une maladie fébrile,<br />
<strong>des</strong> antécédents de morsure de tique, une leucopénie, une<br />
thrombocytopénie et/ou un taux élevé de transaminase<br />
hépatique. Le test <strong>IFA</strong> IgG développé par l'investigateur a été<br />
décrit par Nicholson, et al. 2 . Parmi les 15 paires d'échantillons<br />
de sérum, 11 paires avaient présenté une augmentation d’un<br />
facteur 4 dans le test <strong>IFA</strong> IgG développé par l'investigateur<br />
(phase aiguë), et quatre paires avaient présenté une diminution<br />
d’un facteur 4 dans ce même test (phase convalescente). Parmi<br />
les 11 paires d'échantillons de sérum ayant présenté une<br />
augmentation d’un facteur 4, le test <strong>IFA</strong> <strong>Anaplasma</strong><br />
<strong>phagocytophilum</strong> IgG de Focus était positif dans 9,1 % (1/11)<br />
<strong>des</strong> échantillons du premier prélèvement et dans 72,7 % (8/11)<br />
<strong>des</strong> échantillons du deuxième prélèvement. Parmi les quatre<br />
paires d'échantillons ayant présenté une diminution d’un<br />
facteur 4 dans le test <strong>IFA</strong> développé par l'investigateur, le test<br />
<strong>IFA</strong> <strong>Anaplasma</strong> <strong>phagocytophilum</strong> IgG de Focus n’était positif<br />
dans aucun <strong>des</strong> échantillons du premier tant que du deuxième<br />
prélèvement.<br />
Sensibilité avec <strong>des</strong> échantillons appariés de sérum<br />
1 er prélèvement 2 ème prélèvement<br />
<strong>IFA</strong> IgG<br />
développé par<br />
l'investigateur<br />
IgG<br />
croissant<br />
IgG<br />
décroissant<br />
% Positif IC à<br />
95 %<br />
9,1 % (1/11)<br />
0,2-41,3 %<br />
0,0 % (0/4)<br />
0,0-60,2 %<br />
% Positif IC à<br />
95 %<br />
72,7 % (8/11)<br />
39,0-94,0 %<br />
0,0 % (0/4)<br />
0,0-60,2 %<br />
RÉACTIONS CROISÉES<br />
Deux investigateurs externes ont évalué les réactions croisées<br />
en sélectionnant <strong>des</strong> échantillons de sérum de patients<br />
<strong>Anaplasma</strong> <strong>phagocytophilum</strong> <strong>IFA</strong> <strong>IgM</strong><br />
Page 2<br />
symptomatiques et positifs pour l’agent de réaction croisée<br />
potentiel.<br />
Réactions croisées<br />
Agent à réaction antigénique % Positif IC à 95 %<br />
croisée<br />
Encéphalite transmise par les<br />
tiques<br />
0,0 % (0/15)<br />
0,0-21,8 %<br />
Fièvre boutonneuse<br />
méditerranéenne (Rickettsia<br />
conorii)<br />
Fièvre Q aiguë (Coxiella<br />
burnetii)<br />
Borréliose - maladie de Lyme<br />
(Borrelia burgdorferi) **<br />
Endocardite à Bartonella<br />
quintana<br />
0,0 % (0/25)<br />
0,0-13,7 %<br />
0,0 % (0/10)<br />
0,0-30,8 %<br />
0,0 % (0/36)<br />
0,0-9,7 %<br />
0,0 % (0/10)<br />
0,0-41,0 %<br />
** Des cas de co-infection avec Borrelia burgdorferi et <strong>Anaplasma</strong><br />
<strong>phagocytophilum</strong> ont été reportés. 3<br />
STABILITÉ<br />
Un investigateur interne a évalué la stabilité. Les constituants<br />
ont été soumis à un vieillissement accéléré équivalent à un et<br />
deux ans à une température comprise entre 2 et 8 ºC. Les<br />
constituants soumis au vieillissement accéléré ont ensuite été<br />
testés selon la notice de l'emballage, en parallèle avec <strong>des</strong><br />
constituants non soumis à ce vieillissement. Les constituants<br />
sont considérés stables s’ils remplissent les critères de CQ<br />
précisés dans la notice de l'emballage. Le produit a été jugé<br />
stable après le vieillissement accéléré correspondant à un et<br />
deux ans.<br />
REPRODUCTIBILITÉ<br />
Reproductibilité intra-essai et inter-essai<br />
Un investigateur interne a évalué la reproductibilité intra-essai<br />
et inter-essai. Dix échantillons de sérum de patients ont été<br />
testés sur trois lames différentes au cours de cinq jours<br />
(n = 150). Quatre échantillons étaient positifs, un était à la<br />
limite de détection et cinq étaient négatifs. Les résultats de<br />
tous les échantillons se sont situés dans une plage d’une<br />
dilution de facteur deux.<br />
Reproductibilité inter-lot<br />
Un investigateur interne a évalué la reproductibilité inter-lot.<br />
Dix échantillons de sérum de patients ont été testés sur trois<br />
lots de lames (n = 30). Quatre échantillons étaient positifs, un<br />
était à la limite de détection et cinq étaient négatifs. Les<br />
résultats de tous les échantillons se sont situés dans une plage<br />
d’une dilution de facteur deux.<br />
RÉFÉRENCES<br />
1. Chen S-M, Dumler JS, Bakken JS, Walker DH. Identification of a<br />
Granulocyto tropic Ehrlichia Species as the Etiological Agent of Human<br />
Disease. J Clin Micro 1994; 32: 589-595.<br />
2. Nicholson WL, Comer JA, Sumner JW, et al. An indirect<br />
immunofluorescence assay using a cell culture-derived antigen for<br />
detection of antibodies to the agent of human granulocytic ehrlichiosis.<br />
J Clin Microbiol 1997; 35: 1510-16.<br />
3. Nedelman, RB et al. Simultaneous Human Granulocytic Ehrlichiosis<br />
and Lyme Borrleiosis. N Engl J Med 1997;337:27-30.
FOCUS Diagnostics<br />
<strong>Anaplasma</strong> <strong>phagocytophilum</strong> <strong>IFA</strong> <strong>IgM</strong><br />
Page 3<br />
RENSEIGNEMENTS POUR LES COMMANDES<br />
Téléphone : +1 (562) 240-6500 (International)<br />
Fax : +1 (562) 240-6510<br />
ASSISTANCE TECHNIQUE<br />
Téléphone : +1 (562) 240-6500 (International)<br />
Fax : +1 (562) 240-6526<br />
REPRÉSENTANT AUTORISÉ<br />
mdi Europa GmbH<br />
Langenhagener Str. 71,<br />
30855 Langenhagen-Hannover, Allemagne<br />
PC.IF1450M<br />
Rév. C<br />
Date de rédaction : 27 janvier<br />
2011<br />
Consultez notre site internet à l'adresse : www.focusdx.com<br />
Cypress, Californie 90630, États-Unis