Test NADAL® Strep B - MD Doctors Direct

Test NADAL ® Strep B (cassette)
Test rapide pour la détection d'antigènes streptococciques
du groupe B (SGB) dans des prélèvements humains
Cassettes emballées individuellement Référence 232001
USAGE PREVU
Le test rapide NADAL® Strep B (écouvillon) est un immunodosage
rapide pour la détection qualitative d'antigènes streptococciques
du groupe B (Strep B) issus de prélèvements vaginaux ou rectaux
de femmes enceintes ou de divers prélèvements de nouveau-nés.
INTRODUCTION
Les bactéries streptococciques de groupe B (Strep B) ou
Streptococcus agalactiae sont l'un des principaux responsables
d'infections mortelles chez les nouveau-nés. 5 à 30% des femmes
enceintes sont porteuses du Strep B (SGB 1 ). Plusieurs études
récentes ont montré que le traitement des femmes infectées
pendant leur grossesse réduit nettement la fréquence des
septicémies dues au Strep B 2-4 . Par conséquent, la détection du
Strep B est très importante et le service américain de santé
publique (Center for Disease Control and Prevention CDC)
recommande un dépistage de routine de la bactérie du
streptocoque B entre la 35ème et la 37ème semaine de
grossesse. Une étude du CDC est parvenue au résultat suivant :
l'examen de routine entre la 35ème et la 37ème semaine de
grossesse est 50% plus performant que la prescription
d'antibiotiques aux femmes enceintes présentant des facteurs de
risques cliniques.
Les méthodes de cultures bactériennes traditionnelles requièrent
entre 24 et 48 heures ce qui ne permet pas d'obtenir les résultats
à temps pour un traitement efficace. Ainsi, les techniques rapides
de dépistage comme cette cassette sont indispensables.
PRINCIPE DU TEST
La cassette NADAL® Strep B détecte des antigènes
streptococciques du groupe B (Strep B) par l'interprétation
visuelle de lignes de couleur dans la zone de test de la
bandelette. Le test contient une membrane de nitrocellulose
recouverte d'anticorps IgG anti-Strep B au niveau de la ligne de
test et d'anticorps IgG dirigés contre les IgG anti-Strep au niveau
de la ligne de contrôle. À l'une des extrémités de la membrane se
trouve un coussinet avec un conjugué coloré d'or colloïdal et
d'anticorps polyclonaux anti-Strep B.
Pendant l'exécution du test, l'antigène Strep B est extrait de
l'écouvillon de prélèvement à l'aide des réactifs d'extraction A et
B puis est déposé dans le puits de la cassette. Ce faisant,
l'antigène Strep B réagit avec le conjugué coloré anticorps-or
colloïdal pour former un complexe antigène Strep B-anticorps. Le
mélange migre par capillarité sur la membrane vers les anticorps
anti-Strep B immobilisés au niveau de la ligne de test.
Si l'antigène Strep B est présent dans l'échantillon, une ligne de
couleur se forme au niveau de la ligne de test, indiquant un
résultat positif alors que l'absence d'une ligne colorée indiquerait
un résultat négatif.
La présence de la ligne de contrôle colorée sert à confirmer que
le volume d'échantillon était suffisant et que l'échantillon a
imbibé correctement la membrane.
MATÉRIEL
Matériel fourni
- Cassettes emballées individuellement :
chaque test contient un conjugué coloré et des réactifs
placés sur la zone de test correspondante.
- Réactif A : 1.0 M de nitrite de sodium
- Réactif B : 0.4 M d'acide acétique
- Contrôle positif Strep B inactif : 0,09% d’azoture de sodium
- Contrôle négatif : contient des streptocoques (qui ne sont
pas du groupe B) inactivés par la chaleur
- Écouvillons stériles : pour le recueil des échantillons
- Pipettes à usage unique : pour le dépôt des échantillons
- Tubes d'extraction : pour la préparation des échantillons
- Support de réactifs : support de réactifs
- Notice : comme mode d'emploi
- Chronomètre
MESURES DE PRÉCAUTION
Matériel nécessaire non-fourni
- Uniquement pour le diagnostic professionnel in vitro.
- Ne pas utiliser après expiration de la date de conservation.
Ne pas utiliser le test si son emballage est endommagé. Ne
pas utiliser le test plusieurs fois.
- Ce kit contient des produits d'origine animale. Les
connaissances sur l'origine et/ou la santé des animaux ne
garantissent pas la complète absence d'agents pathogènes
transmissibles. Ainsi il est recommandé de considérer ces
produits comme potentiellement infectieux et de les
manipuler en respectant des mesures de précaution (ne
pas aspirer ni inhaler !)
- Éviter les réactions croisées en utilisant un nouveau tube
d'extraction pour chaque échantillon.
- Lire le mode d'emploi dans sa totalité avant d'utiliser le
test.
- Ne pas manger, boire ni fumer à côté des échantillons et du
test. Manipuler les échantillons comme s'ils étaient
potentiellement infectieux. Prendre des mesures de
précaution contre les dangers microbiologiques lors de
l'exécution du test et observer les directives pour
l'élimination correcte des échantillons. Porter des
vêtements de protection comme une blouse de laboratoire,
des gants à usage unique et des lunettes lors de l'analyse
de l'échantillon.

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Test rapide pour la détection d'antigènes streptococciques
du groupe B (SGB) dans des prélèvements humains
Cassettes emballées individuellement Référence 232001
- Ne pas confondre ni mélanger les réactifs de différents lots.
- Utiliser uniquement les écouvillons stériles en Dacron ou en
cellulose fournis avec le kit. Ne pas utiliser d'écouvillons en
alginate de calcium, en coton ou en bois.
- Les réactifs A et B sont légèrement corrosifs. Éviter le
contact avec les yeux ou la peau. En cas de contact, rincer
soigneusement à l'eau.
- Le contrôle positif contient de l'acide acétique pouvant
éventuellement réagir avec le cuivre ou le plomb pour
former des azotures métalliques explosifs. Lors de
l'élimination des solutions, il faut alors rincer avec
suffisamment d'eau pour éviter la formation de ces acides.
- L'humidité ou les températures élevées peuvent influencer
le résultat.
- Le matériel utilisé doit être éliminé conformément aux
dispositions locales.
CONSERVATION
• Les tests doivent être conservés entre 2°C et 30°C,
maximum jusqu'à la date de conservation imprimée sur
l'emballage.
• Toujours ouvrir l'emballage juste au moment où le test
est prêt à être effectué.
• Ne pas congeler.
• Il faut s'assurer que les composants de ce kit sont
protégés contre toute contamination. Ne pas utiliser ce
test si une contamination microbienne ou une
précipitation manifeste peut être observée. La
contamination biologique d'équipements de répartition,
de récipients ou des réactifs peuvent provoquer des
résultats erronés.
RECUEIL ET CONSERVATION DES ECHANTILLONS
• La qualité de l'échantillon est déterminante. N'employer
que des méthodes cliniques standardisées.
• Utiliser uniquement les écouvillons stériles en Dacron ou
en cellulose fournis avec le kit. Ne pas utiliser
d'écouvillons en alginate de calcium, en coton ou en bois.
• Tester les échantillons immédiatement après leur recueil.
Si cela n'est pas possible, les écouvillons doivent être
réfrigérés dans un tube avec bouchon. Ne pas congeler !
Les échantillons peuvent être conservés jusqu'à 4 heures
à température ambiante (15-30°C) ou réfrigérés (2-8°C)
jusqu'à 24 heures. Amener tous les composants du test à
température ambiante avant de commencer.
• Ne pas mettre l'écouvillon dans du conservateur, cela
pourrait causer des réactions croisées avec l'échantillon
et la viabilité des organismes n'est pas donnée pour
l'échantillon.
• Si une culture bactérienne est souhaitée, faire rouler
l'écouvillon légèrement sur la plaque de culture cellulaire
avant de procéder au test. Les réactifs d'extraction du
test vont tuer les bactéries sur l'écouvillon et les rendent
ainsi inutilisables pour des cultures.
PROCEDURE DE TEST
Amener les tests, les échantillons, les solutions tampons et/ou
les contrôles à température ambiante (15 – 30°C).
1. Préparation des échantillons :
• Placer un tube d'extraction propre dans la partie référencée
du support. Déposer 4 gouttes de la solution d'extraction A
dans le tube d'extraction, puis ajouter 4 gouttes de la
solution B. Mélanger la solution par un léger mouvement de
rotation.
• Déposer le prélèvement dans le tube. Bien mélanger la
solution en appuyant l'écouvillon sur la paroi du tube avec un
léger mouvement de rotation afin que l'échantillon puisse
être déposé dans le tube.
• Laisser reposer le tout à température ambiante pendant 3-5
minutes, égoutter ensuite doucement l'écouvillon en
l'appuyant sur la paroi du tube afin que le plus d'échantillon
possible tombe de l'écouvillon dans le tube.
2. Sortir la cassette et la placer sur une surface propre.
Étiqueter éventuellement la cassette. Afin d'obtenir le
meilleur résultat possible, il faut tester l'échantillon dans
l'heure qui suit.
3. Déposer 3 gouttes (environ 100 µl) de l'échantillon extrait du
tube d'extraction dans le puits de dépôt de la cassette.
Éviter la formation de bulles d'air dans le puits de dépôt et ne
surtout pas mettre la solution dans la fenêtre de contrôle.
Dès que le test commence, on peut observer comment le fluide
coloré remonte le long de la membrane.
4. Attendre l'apparition de lignes de couleur. Les résultats
peuvent être lus après 10 minutes. Ne plus interpréter le
résultat de test après 20 minutes.

Test NADAL ® Strep B (cassette)
Test rapide pour la détection d'antigènes streptococciques
du groupe B (SGB) dans des prélèvements humains
Cassettes emballées individuellement Référence 232001
INTERPRETATION DES RESULTATS
Résultat positif Deux lignes de couleur
apparaissent sur la membrane.
L'une apparaît dans la zone de
contrôle (C) et l'autre dans la zone
de test (T).
Résultat
négatif
Seule une ligne de couleur apparaît
dans la zone de contrôle (C). Il n'y a
pas de ligne de couleur dans la
zone de test (T).
Non-valide La ligne de contrôle n'apparaît pas.
Ne pas tenir compte des résultats
d'un test dont la ligne de contrôle
reste absente lors du temps de
lecture indiqué.
Vérifier le déroulement du test et
recommencer avec un nouveau
test. Si le problème persiste,
interrompre l'utilisation et
contacter le fournisseur.
Remarque :
1. L'intensité de la ligne peut varier en fonction de la
concentration dans l'échantillon. Par conséquent, toute
coloration dans la zone T doit être considérée comme un résultat
positif. Il s'agit d'un test qualitatif : il ne peut pas donner la
concentration exacte dans l'échantillon.
2. Si aucune ligne n'apparaît dans la zone C, il se peut que le
volume d'échantillon utilisé n'ait pas été assez suffisant, que le
test soit périmé ou que le test ait mal été employé.
CONTRÔLE QUALITÉ
• Le test comprend un contrôle interne de procédé. Une
ligne de couleur apparaissant dans la zone de contrôle (C)
sert de contrôle interne de procédé positif.
• Les bonnes pratiques de laboratoire recommandent
l'utilisation de contrôles afin de garantir le bon
fonctionnement de l'équipement. Un contrôle positif,
contenant des streptocoques de groupe B inactivés par la
chaleur, et un contrôle négatif, contenant des
streptocoques inactivés par la chaleur qui ne sont pas du
groupe B, sont inclus dans chaque kit.
Notice explicative pour un contrôle qualité externe
a) Déposer 4 gouttes de la solution A et 4 gouttes de la
solution B dans un tube.
b) Mélanger la solution en l'agitant légèrement. Ajouter
ensuite 1 goutte de la solution positive ou négative.
c) Plonger un écouvillon propre dedans et le laisser reposer
pendant 1 minute. Bien mélanger la solution en appuyant
l'écouvillon sur la paroi du tube avec un léger mouvement de
rotation afin que l'échantillon puisse être déposé dans le
tube. Sortir l'écouvillon.
d) Continuer comme décrit au point 2.
Si les contrôles ne montrent pas les résultats escomptés, ne
pas utiliser le test. Recommencer le test ou contacter le
fournisseur.
LIMITES DU TEST
1. Le test rapide NADAL® Strep B est conçu uniquement pour un
usage professionnel et ne doit être utilisé que pour la détection
qualitative de SGB. Il ne faut pas interpréter l'intensité de couleur
des lignes.
2. La précision du test dépend de la qualité du prélèvement. Des
résultats faussement négatifs peuvent être dus à une mauvaise
manipulation ou une mauvaise conservation. Même une
concentration en antigène trop faible peut rendre le résultat
négatif.
3. Le test ne fait pas la différence entre les porteurs sains du
Strep B et ceux présentant une infection. Si les symptômes
cliniques ne concordent pas avec les résultats de test du
laboratoire, il est conseillé de poursuivre l'observation ou
d'entreprendre une culture cellulaire.
4. Comme pour tous les test diagnostiques, un diagnostic définitif
ne peut pas se baser sur le résultat d'un seul test rapide mais doit
être prononcé après l'interprétation d'autres résultats cliniques
et de laboratoire.
BIBLIOGRAPHIE
1. Finch, R.G., French, G.L., and Phillips, I.; Group B streptococci in the
female genital tract; Br. Med. J., 1 (6020) 1245-1247, 1976
2. You, M.D., Mason, E.O., Leeds, L.J., Thompson, P.K., Clark, D.J. and
Gardner, S.E.; Ampicilin prevents intrapartum transmission of group B
streptococcus; JAMA 241 (12) 1245-1247 ,1979
3. Boyer, K.M., and Gotoff, S.P.; Prevention of early-onset neon-atal
group B streptococcal disease with selective intrapartum chemotaxis; N.
Eng. J. Med. 314 1665-1669, 1986
4. Lim, D.V., Morales, W.J., Walsh, W.J. and Kazanis, D.;Reduction of
morbidity and mortility rates for neonatal group B streptococcal disease
through early diagnosis and chemo-prophylaxis; J. Clin. Microbiol. 23 489-
492, 1986
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Date limite de conservation
Fabricant
nal von minden GmbH
Carl-Peschken-Straße 9
47441 Moers
Rév. : 24/04/2012 YF