MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon

Chapitre III – Efficacité du Nettoyage et/ou de la Désinfection vis-à-vis de la protéine prion
Tableau III-5 : Caractéristiques des souches animales sur lesquelles les procédés de nettoyage et de
désinfection sont évalués. Les souches 6PB1, 263K et C506M3 sont un don de Pascal Clayette de la
société SPI BIO. La souche 22L est un don de Sylvain Lehmann du CNRS UPR 142.
Souches Porteur Origine Titre infectieux
(LD50 /g de
cerveau)
Période d’incubation après
inoculation intracérébrale (I.C.)
6PB1 C57/BL6 ESB 10 8 à 10 9 ≈ 150 jours
263K Hamster syrien Tremblante 10 11 ≈ 70 jours
doré
C506M3 C57/BL6 Tremblante 10 8 à 10 9 171 ± 3 jours
22L C57/BL6 Tremblante Non titrée
Les adsorptions sur fils d’acier inoxydable sont réalisées à partir d’homogénat de cerveau à 20% pour
chacune des souches présentées et ces salissures permettent d’évaluer l’efficacité des procédés sur 3 log
de PrP adsorbée, pour toutes les souches considérées (figure III-12).
Homogénat 20% Homogénat 20%
1 log
2 log
3 log
3,6 log
1,6 log
2 log
2,6 log
3 log
3,6 log
263K
22L
6PB1
C506M3
Figure III-12 : Limite de détection en Western blot de la PrP des souches animales 263K, 6PB1,
22L et C506M3 adsorbées sur fils d’acier inoxydable à partir d’homogénats de cerveau à 20%.
III.2.2. Méthodologie
Fils d’acier inoxydable :
Les supports employés sont des segments de fils d’acier inoxydable de 5 mm de longueur et de 0,125 mm
de diamètre. Chaque essai comportant 40 fils, la surface disponible pour l’adsorption est d’environ 80
mm².
Les fils sont stérilisés à 121°C pendant 20 min avant d’être utilisés.
Adsorption :
Chaque essai, contenant 40 fils, est incubé en présence de 100 µl de la salissure considérée, pendant 2h à
37°C sous agitation à 350 rpm. Les fils sont ensuite répartis sur une boite de pétri et séchés une nuit sous
hotte à flux laminaire.
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