MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon
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Chapitre III – Efficacité du Nettoyage et/ou de la Désinfection vis-à-vis de la protéine prion<br />
Tableau III-4 : Les différentes salissures de protéine prion et les techniques de concentration<br />
correspondantes. Ces salissures sont préparées à partir d’homogénat de cerveau à 10%.<br />
Salissures Protéinase K Techniques de concentration Tampons de reprise<br />
PrPsc en milieu lipidique<br />
cérébral<br />
- Précipitation à l’acide<br />
phosphotungstique<br />
Homogénat de cerveau<br />
à 10%<br />
Ultracentrifugation<br />
PrPsc - Ultracentrifugation PBS pH7,2<br />
PrPres + Ultracentrifugation PBS pH7,2<br />
L’utilisation de ces salissures pour l’adsorption de la PrPsc sur les fils d’acier inoxydable permet<br />
d’évaluer l’efficacité des procédés avec des sensibilités plus adaptées. Vis-à-vis de la PrP du vMCJ, la<br />
salissure PrPsc en milieu lipidique cérébral permet de tester l’efficacité des procédés sur 4 log de PrP<br />
adsorbée et les salissures PrPsc et PrPres sur 3 log. Concernant la PrP de la MCJs, les procédés sont<br />
évalués sur 3,3 log de PrP adsorbée à partir de la salissure PrPsc en milieu lipidique cérébral (figure III-<br />
11).<br />
PrPsc en milieu lipidique<br />
Prpsc<br />
PrPres<br />
2 log<br />
2,3 log<br />
3 log<br />
3,3 log<br />
4 log<br />
1,3 log<br />
2 log<br />
2,3 log<br />
3 log<br />
1,3 log<br />
2 log<br />
2,3 log<br />
3 log<br />
vMCJ<br />
MCJs<br />
Figure III-11 : Limite de détection en Western blot de la PrP humaine adsorbée sur fils d’acier<br />
inoxydable à partir des salissures « PrPsc en milieu lipidique cérébral », PrPsc et PrPres.<br />
Les souches animales<br />
Etant donné que les propriétés de résistance des prions et que les titres infectieux varient en fonction des<br />
souches il parait important de pouvoir établir l’efficacité d’un procédé vis-à-vis de plusieurs souches.<br />
Néanmoins, les propriétés de résistance des prions observées pour les procédés d’inactivation ne sont<br />
probablement pas transposables aux procédés de nettoyage. En effet, nous nous intéressons au<br />
déplacement des prions de la surface vers la solution de nettoyage sans chercher à les inactiver. Les<br />
souches animales utilisées dans cette étude sont présentées dans le tableau III-5 :<br />
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