MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon

Chapitre III – Efficacité du Nettoyage et/ou de la Désinfection vis-à-vis de la protéine prion
La méthode isotopique, employée dans le cadre d’une présélection de procédés représente un très bon
compromis méthodologique. En effet, les avantages de cette méthodologie sont :
- Le suivi des performances à chaque étape du procédé ;
- La sensibilité de la détection surfacique ;
- La détection spécifique des protéines ;
- La quantification des protéines résiduelles directement sur la surface du matériau.
Bien que nous nous soyons focalisés sur des matériaux en acier inoxydable, l’efficacité des procédés visà-vis
des protéines peut également être appréciée pour d’autres matériaux de type polymère ou céramique
par exemple. De nombreuses études comparant l’adsorption d’une même protéine sur différents matériaux
ont recours à cette méthode [Balasubramanian, et al. 1999, Pamula, et al. 2004, Tidwell, et al. 2001, Van
Dulm et Norde 1983].
Si la nature protéique de la salissure utilisée pour la méthode isotopique apparaît comme un inconvénient,
elle permet cependant d’évaluer les procédés selon le pire des scénarios. De plus, elle semble être
acceptée par la communauté scientifique comme salissure modèle. En effet, la salissure proposée dans
l’annexe L de la norme EN ISO 15 883-5 est constituée uniquement d’un mélange de quatre protéines. Il
a également été montré que cette salissure était la plus résistante aux procédés de nettoyage,
comparativement aux salissures proposées dans les annexes A, F et R (L. Pineau Biotech Germande,
communication personnelle).
Cependant, nous ne pouvons avoir recours à cette méthodologie pour évaluer les procédés vis-à-vis de la
protéine prion spécifiquement. En effet, si la manipulation d’iode radioactif nécessite de travailler en zone
confinée, les prions d’origine humaine doivent également être manipulés dans des laboratoires de sécurité
biologique de niveau 3 [Richard, et al. 1999]. D’un point de vue pratique, il n’est pas possible, à l’heure
actuelle, de manipuler de la protéine prion marquée à l’iode 125 dans le laboratoire de diagnostic des
maladies à prions de l’Hôpital Neurologique de Lyon.
C’est donc dans ce contexte que deux nouvelles méthodologies sont envisagées pour l’évaluation des
procédés vis-à-vis de la protéine prion.
Les résultats obtenus pour les formulations Aniosyme N2 et DD1 par les différentes méthodes mises en
œuvres (PND, XPS et méthode isotopique sur BSA, HSA et HFN) nous conduisent à sélectionner ces
formulations pour être évaluées vis-à-vis d’une salissure contenant de la protéine prion. En effet, ces
formulations montrent une bonne efficacité sur les différentes salissures testées. De plus, nous avons pu
constater que ces formulations étaient relativement inertes vis-à-vis des surfaces d’acier inoxydable.
Le double nettoyage par l’utilisation successive de ces deux formulations garantirait une efficacité du 1 er
nettoyage vis-à-vis des protéines par l’Aniosyme N2 et également une pré-désinfection au cours du 2 nd
nettoyage par l’Aniosyme DD1. Le double nettoyage par les Aniosyme N2 puis DD1 serait donc un bon
compromis entre efficacité et sécurité si leurs performances étaient également validées face au risque
prion.
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