MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon
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Chapitre III – Efficacité du Nettoyage et/ou de la Désinfection vis-à-vis de la protéine prion<br />
procédés potentiellement applicables dans le domaine de la santé humaine. De plus, il semble que l’HSA<br />
et la BSA s’adsorbent différemment sur les surfaces métalliques [Kurrat, et al. 1997]. L’origine<br />
plasmatique de ces protéines est également un critère de choix face aux problèmes de santé publique.<br />
L’HSA est la protéine la plus abondante du plasma. Elle représente 60% des protéines plasmatiques<br />
totales et de ce fait, son adsorption est couramment étudiée. Il s’agit d’une protéine globulaire de 66 kDa,<br />
dont la structure secondaire est à 67% α-hélicoïdal et ne contient aucune structure en feuillet β-plissé.<br />
Quant à l’HFN, elle représente 2 à 3% des protéines plasmatiques, elle est souvent utilisée dans les études<br />
concernant la biocompatibilité des implants. Il s’agit d’une protéine de 340 kDa constituée de trois<br />
chaînes polypeptidiques Aα, Bβ et γ. Du fait de sa structure secondaire, estimée par dichroïsme circulaire<br />
à 35,4% d’hélices α, 20,8% de feuillets β, 12,8% de β turn et 31% de random coil [Chen, et al. 1999, Lin,<br />
et al. 2004], le fibrinogène est un modèle différent de l’HSA et donc complémentaire.<br />
II.1. Méthodologie<br />
Les protéines HSA et HFN, ont été marquées à l’iode 125 (I 125 ) par la méthode à la chloramine T, selon le<br />
principe présenté dans le chapitre II.<br />
Les protéines sont adsorbées sur les substrats en acier inoxydable AISI 304 à partir de solutions aqueuses<br />
à 1 mg/ml pendant une heure sous agitation à température ambiante. Après rinçage par dilutions<br />
successives à l’eau distillée, la radioactivité est mesurée à l’aide d’un compteur gamma.<br />
Huit formulations, dont trois désinfectants, sont proposées pour l’évaluation du nettoyage puis de la<br />
désinfection vis-à-vis des protéines HSA et HFN adsorbées. Les caractéristiques générales de ces<br />
formulations sont présentées dans le tableau III-1.<br />
Ces formulations seront testées :<br />
- Seules ;<br />
- Par combinaisons de deux formulations afin d’évaluer le double nettoyage ;<br />
- Par combinaisons de trois formulations pour évaluer le double nettoyage et la désinfection.<br />
Les combinaisons et les conditions d’essais sont présentées dans le tableau III-2.<br />
La radioactivité, traduisant la quantité de protéines résiduelles sur le substrat, est mesurée après chaque<br />
rinçage en eau de réseau.<br />
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