MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon

Chapitre III – Efficacité du Nettoyage et/ou de la Désinfection vis-à-vis de la protéine prion
procédés potentiellement applicables dans le domaine de la santé humaine. De plus, il semble que l’HSA
et la BSA s’adsorbent différemment sur les surfaces métalliques [Kurrat, et al. 1997]. L’origine
plasmatique de ces protéines est également un critère de choix face aux problèmes de santé publique.
L’HSA est la protéine la plus abondante du plasma. Elle représente 60% des protéines plasmatiques
totales et de ce fait, son adsorption est couramment étudiée. Il s’agit d’une protéine globulaire de 66 kDa,
dont la structure secondaire est à 67% α-hélicoïdal et ne contient aucune structure en feuillet β-plissé.
Quant à l’HFN, elle représente 2 à 3% des protéines plasmatiques, elle est souvent utilisée dans les études
concernant la biocompatibilité des implants. Il s’agit d’une protéine de 340 kDa constituée de trois
chaînes polypeptidiques Aα, Bβ et γ. Du fait de sa structure secondaire, estimée par dichroïsme circulaire
à 35,4% d’hélices α, 20,8% de feuillets β, 12,8% de β turn et 31% de random coil [Chen, et al. 1999, Lin,
et al. 2004], le fibrinogène est un modèle différent de l’HSA et donc complémentaire.
II.1. Méthodologie
Les protéines HSA et HFN, ont été marquées à l’iode 125 (I 125 ) par la méthode à la chloramine T, selon le
principe présenté dans le chapitre II.
Les protéines sont adsorbées sur les substrats en acier inoxydable AISI 304 à partir de solutions aqueuses
à 1 mg/ml pendant une heure sous agitation à température ambiante. Après rinçage par dilutions
successives à l’eau distillée, la radioactivité est mesurée à l’aide d’un compteur gamma.
Huit formulations, dont trois désinfectants, sont proposées pour l’évaluation du nettoyage puis de la
désinfection vis-à-vis des protéines HSA et HFN adsorbées. Les caractéristiques générales de ces
formulations sont présentées dans le tableau III-1.
Ces formulations seront testées :
- Seules ;
- Par combinaisons de deux formulations afin d’évaluer le double nettoyage ;
- Par combinaisons de trois formulations pour évaluer le double nettoyage et la désinfection.
Les combinaisons et les conditions d’essais sont présentées dans le tableau III-2.
La radioactivité, traduisant la quantité de protéines résiduelles sur le substrat, est mesurée après chaque
rinçage en eau de réseau.
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