MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon

Chapitre III – Efficacité du Nettoyage et/ou de la Désinfection vis-à-vis de la protéine prion
protéines doivent être exclus des procédés de traitements des DM. C’est le cas en particulier pour le
formaldéhyde [Taylor D. M. 1995, Verjat, et al. 1999].
Bien qu’ils ne soient pas adaptés à l’évaluation du traitement des DM, de nombreux travaux concernant
l’inactivation des prions ont vu le jour. Cependant, la multiplicité des conditions opératoires et des
méthodologies employées rend leur synthèse extrêmement délicate. De plus, les publications de travaux
contradictoires sont de plus en plus fréquentes et sont la conséquence de cette multiplicité. Il y a donc un
réel besoin de cohérence méthodologique pour démontrer l’efficacité d’un procédé de nettoyage et/ou de
désinfection vis-à-vis du risque prion.
Une méthodologie basée sur l’utilisation de fils d’acier inoxydable a été décrite pour modéliser la
transmission iatrogène par l’utilisation d’électrodes contaminées [Flechsig, et al. 2001, Zobeley, et al.
1999]. Dans cette étude, les fils d’acier inoxydable ont été contaminés par trempage dans un homogénat
de cerveau contenant de la PrPsc (souche RML). Après avoir été rincés, les fils ont été implantés dans le
cerveau d’une souris saine, qui développa la maladie en 70 jours. La transmission de l’infection par les
fils d’acier inoxydable est aussi efficace qu’une inoculation intracérébrale de 30 µl d’un homogénat de
cerveau à 1% puisque les périodes d’incubation sont identiques pour les deux voies de transmission.
Pour se conformer aux conditions réelles d’une intervention chirurgicale, les fils d’acier inoxydable ont
été contaminés, non pas par un homogénat, mais par insertion de ces fils directement dans le cerveau
d’une souris malade. Une implantation de 5 minutes seulement est suffisante pour transmettre la maladie
[Weissmann 2002]. De la même façon, l’insertion de fils contaminés dans le cerveau de souris saines
pendant seulement 30 minutes est suffisante pour l’initier [Weissmann 2002]. Un temps de contact aussi
court que 5 minutes a également été rapporté pour la souche 263K [Yan, et al. 2004]. Dans les deux cas,
la période d’incubation est rallongée.
Ces travaux montrent la faculté des prions à s’adsorber sur les surfaces d’acier inoxydable. Il semblerait
qu’il en soit de même pour l’or [Flechsig, et al. 2001] ou les matières plastiques telles que le polystyrène
ou le polypropylène [Weissmann 2002].
A en juger par les travaux récents, l’utilisation des fils d’acier inoxydable couplés aux essais in vivo est
extrêmement intéressante pour tester l’efficacité de produits ou procédés potentiellement efficaces sur les
prions [Fichet, et al. 2004, Jackson, et al. 1999, Weissmann 2002, Yan, et al. 2004]. Il faut pourtant rester
prudent vis-à-vis des données rendues disponibles par ce système d’étude. En effet, ayant recours à des
essais in vivo, il faut tenir compte de la résistance des prions qui varie en fonction des souches. Des
résistances relatives ont été décrites notamment par rapport à la digestion enzymatique [Somerville 2002]
et à l’inactivation thermique [Taylor D. M. 2001, Taylor D. M., et al. 1997, Taylor D. M., et al. 1999]. Le
titre infectieux de la souche utilisée doit également être pris en compte dans l’interprétation des données.
En résumé, la démonstration de l’efficacité d’un produit ou d’un procédé sur une souche, ne signifie pas
que ce produit est efficace sur la totalité des souches. Les travaux de Yan et Jackson sur l’efficacité de
l’autoclave ou encore les travaux de Jackson et Fichet sur LpH en sont une illustration [Fichet, et al.
2004, Jackson, et al. 1999, Yan, et al. 2004].
Bien qu’ils soient fondamentaux pour la validation des procédés, les essais in vivo sont consommateurs de
temps (dépendant de la période d’incubation pour la souche considérée), d’argent et d’animaux. Il est
donc nécessaire de disposer d’une méthodologie in vitro, sur support, pour la sélection des produits ou
procédés potentiellement intéressants vis-à-vis du risque prion. Dans ce contexte, et en admettant que la
présence de protéine prion pathologique est corrélée à l’infectiosité, deux approches peuvent être
envisagées.
La première approche consiste à détecter la protéine prion directement sur le support contaminé par une
réaction immunologique avec un anticorps dirigé contre les protéines prion (PrPsc et PrPc). Un essai en
chimiluminescence sur de l’homogénat adsorbé sur des fils d’acier inoxydable montre que la protéine
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