MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon
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Chapitre II – Evaluation du Nettoyage<br />
Des incertitudes persistent malgré tout en raison de la présence de molécules azotées dans les<br />
formulations. Cependant, ces incertitudes sont sans conséquence majeure sur l’évaluation des<br />
performances. En effet, si l’on ne tient pas compte de la décomposition des spectres de l’azote, mais que<br />
l’on s’intéresse uniquement à la quantité d’azote (organique) résiduelle, le rapport calculé pour évaluer le<br />
nettoyage restera représentatif d’une quantité de souillure résiduelle pouvant contenir des protéines.<br />
Ainsi, l’efficacité du nettoyage vis-à-vis des protéines serait surestimée puisque les molécules azotées<br />
rémanentes seraient également considérées.<br />
L’inconvénient de l’XPS est qu’elle reste une technique semi-quantitative. Associé au fait qu’elle n’est<br />
pas spécifique des protéines, il est difficile d’accéder à une quantité de protéines par unité d’aire et donc<br />
de déterminer la quantité de protéines résiduelles après nettoyage. Ces données sont accessibles par le<br />
marquage des protéines par un isotope radioactif.<br />
III.2. Le radiomarquage<br />
Il est souvent difficile de mesurer précisément de faibles quantités de protéines adsorbées sur une surface.<br />
Les techniques d’analyse utilisant le radiomarquage étant d’une grande sensibilité, elles sont couramment<br />
utilisées pour quantifier l’adsorption des protéines [Balasubramanian, et al. 1999, Cloix, et al. 1975,<br />
Lhoest, et al. 1998, Lhoest, et al. 2001, Moulton, et al. 2003, Tidwell, et al. 2001, Wagner, et al. 2003].<br />
L’objectif de cette partie de l’étude est de déterminer quantitativement les performances des formulations<br />
vis-à-vis des protéines spécifiquement.<br />
En raison de son poids moléculaire modéré (66 kDa), de sa forme globulaire, de son rôle dans le transport<br />
de divers ions et molécules dans le sang et également de son faible coût, la BSA est couramment utilisée<br />
comme protéine modèle pour étudier les caractéristiques de l’adsorption des protéines sur les surfaces.<br />
Notre objectif étant d’évaluer les performances des formulations vis-à-vis des protéines spécifiquement,<br />
la salissure choisie est simple et exclusivement protéique. Il s’agit d’une solution aqueuse à 1 mg/ml de<br />
BSA marquée à l’iode 125 ( 125 I).<br />
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