MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon

Chapitre II – Evaluation du Nettoyage
Des incertitudes persistent malgré tout en raison de la présence de molécules azotées dans les
formulations. Cependant, ces incertitudes sont sans conséquence majeure sur l’évaluation des
performances. En effet, si l’on ne tient pas compte de la décomposition des spectres de l’azote, mais que
l’on s’intéresse uniquement à la quantité d’azote (organique) résiduelle, le rapport calculé pour évaluer le
nettoyage restera représentatif d’une quantité de souillure résiduelle pouvant contenir des protéines.
Ainsi, l’efficacité du nettoyage vis-à-vis des protéines serait surestimée puisque les molécules azotées
rémanentes seraient également considérées.
L’inconvénient de l’XPS est qu’elle reste une technique semi-quantitative. Associé au fait qu’elle n’est
pas spécifique des protéines, il est difficile d’accéder à une quantité de protéines par unité d’aire et donc
de déterminer la quantité de protéines résiduelles après nettoyage. Ces données sont accessibles par le
marquage des protéines par un isotope radioactif.
III.2. Le radiomarquage
Il est souvent difficile de mesurer précisément de faibles quantités de protéines adsorbées sur une surface.
Les techniques d’analyse utilisant le radiomarquage étant d’une grande sensibilité, elles sont couramment
utilisées pour quantifier l’adsorption des protéines [Balasubramanian, et al. 1999, Cloix, et al. 1975,
Lhoest, et al. 1998, Lhoest, et al. 2001, Moulton, et al. 2003, Tidwell, et al. 2001, Wagner, et al. 2003].
L’objectif de cette partie de l’étude est de déterminer quantitativement les performances des formulations
vis-à-vis des protéines spécifiquement.
En raison de son poids moléculaire modéré (66 kDa), de sa forme globulaire, de son rôle dans le transport
de divers ions et molécules dans le sang et également de son faible coût, la BSA est couramment utilisée
comme protéine modèle pour étudier les caractéristiques de l’adsorption des protéines sur les surfaces.
Notre objectif étant d’évaluer les performances des formulations vis-à-vis des protéines spécifiquement,
la salissure choisie est simple et exclusivement protéique. Il s’agit d’une solution aqueuse à 1 mg/ml de
BSA marquée à l’iode 125 ( 125 I).
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