MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon

Chapitre II – Evaluation du Nettoyage
Des méthodes fluorimétriques, nous retiendrons la méthode à l’orthophtaldéhyde (OPA) modifiée. Cette
méthode, précédemment appliquée dans des travaux concernant l’efficacité du prétraitement [Verjat, et
al. 1999] et du nettoyage [Fengler, et al. 2000], est proposée dans la norme ISO EN 15 883-1 pour
évaluer la quantité de souillure protéique résiduelle dans le cadre des laveurs désinfecteurs.
Ces méthodes de dosage nécessitent l’élution des protéines résiduelles de la surface et les rendements de
l’élution sont souvent incertains [Pineau, et al. 2002].
La norme EN ISO 15 883-1 propose également un test à la ninhydrine comme méthode de détection des
souillures protéiques résiduelles. Ce test consiste à écouvillonner les surfaces du DM et à détecter la
présence de protéines sur l’écouvillon par une réaction à la ninhydrine. Bien que ce test permette de
détecter jusqu’ à 2,5 µg d’albumine sur une zone écouvillonnée de 2 cm de diamètre, il est
essentiellement qualitatif [de Bruijn, et al. 2001]. Il est également dépendant de l’opérateur mais peut être
facilement mis en œuvre dans les services de stérilisation des établissements de santé.
L’utilisation des méthodes de dosage des protéines pour évaluer l’efficacité du nettoyage n’offre pas une
sensibilité suffisante pour s’assurer de l’efficacité du nettoyage face aux risques de transmission des
ATNC. Une étude, comparant la méthode de dosage à l’OPA modifiée et une méthode isotopique, a
clairement montré la nécessité d’abaisser les limites de détection des méthodes pour l’évaluation du
nettoyage [Draghici, et al. 2005].
Les méthodes pouvant proposer de meilleures sensibilités, comme la méthode isotopique, sont rarement
adaptées à l’environnement des services de santé. Cependant, Lipscomb et al. proposent une nouvelle
technique de microscopie (episcopic differential interference contrast/epifluorescence, EDIC/EF) couplée
à l’emploi du SYPRO Ruby, un marqueur fluorescent couramment utilisé pour une détection sensible des
protéines [Lipscomb, et al. 2006]. La limite de détection de la technique est annoncée à 85 pg/mm². Les
auteurs préconisent l’utilisation de cet outil pour la surveillance de la contamination des instruments dans
les établissements de santé.
S’assurer de l’efficacité du nettoyage est primordial pour garantir la sécurité des patients. Comme nous
l’avons vu, le nettoyage est une opération critique qui consiste à éliminer d’une surface donnée toute
salissure visible ou invisible par l’action physico-chimique d’une solution de nettoyage. Dans le cadre de
notre étude, nous supposons que la qualité du nettoyage découle de l’efficacité de la solution nettoyante.
Notre objectif est de mettre en place des méthodes sensibles pour évaluer les performances des solutions
de nettoyage vis-à-vis des protéines spécifiquement et de permettre ainsi aux professionnels de la
détergence et de la désinfection de prouver l’efficacité de leurs produits. Nous ne prendrons pas en
considération la géométrie du DM qui peut rendre le nettoyage du DM plus difficile puisqu’il incombe
aux fabricants de démontrer la nettoyabilité de leurs matériels.
Après une brève présentation du Pouvoir Nettoyant Dégraissant, méthode développée dans les
Laboratoires ANIOS, nous présenterons deux méthodes surfaciques permettant de qualifier et de
quantifier les performances des formulations.
II. LE POUVOIR NETTOYANT DEGRAISSANT
Dans les Laboratoires ANIOS, la performance des produits nettoyants et/ou pré- désinfectants est établie
par le calcul du Pouvoir Nettoyant Dégraissant (PND). Le PND représente le pourcentage de protéines de
la salissure éliminée par la formulation testée, il est exprimé en pourcentage de performance.
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