MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon

Chapitre V – Interface BSA/métal
Ensuite, les évaporations successives de BSA sur ce substrat font apparaître les contributions du carbone
et de l’oxygène caractéristiques des protéines. L’intensité de ces contributions augmente avec
l’atténuation des composantes du substrat (carbure et oxyde en particulier).
Dans le cas de l’azote, une contribution supplémentaire à celle de la fonction amide est observée à 398,6
eV. Pour l’heure, cette composante de l’azote n’est pas attribuée. Quant au soufre, il n’est pas détecté
quelle que soit l’épaisseur de la couche de BSA évaporée. Bien que cet élément soit faiblement représenté
dans la BSA, il est habituellement observé sur CrOx lorsque la BSA est adsorbée à partir d’une solution
aqueuse. Il est donc probable que les liaisons chimiques des chaînes latérales de la BSA ne restent pas
intactes au cours de la sublimation.
Les rapports N/C ont été calculés pour chaque épaisseur de BSA (tableau V-5). La valeur de ces rapports,
relativement constante et en accord avec la référence théorique, suggère que la stœchiométrie du carbone
et de l’azote dans la protéine est conservée au cours des évaporations. Ceci ne préjuge pas de la
conservation de l’oxygène de la protéine. Compte tenu de l’absence de contamination carbonée du fait de
la sublimation in situ de la couche protéique, le rapport calculé est supérieur à celui obtenu sur le substrat
CrOx/BSA de référence.
Tableau V-5 : Rapports N/C calculés en fonction de l’épaisseur de la couche de BSA évaporée sur le
substrat CrOx.
0,07 nm 0,34 nm 1,5 nm 3,1 nm Référence Référence
BSA/CrOx théorique
N/C BSA 0,280 0,214 0,242 0,221 0,153 0,258
D’un point de vue chimique, il est difficile de savoir si le carbone subit des modifications dans son
environnement électronique à l’interface. En effet, la présence du carbure dans le substrat minimise
considérablement la sensibilité de l’analyse. La modification majeure observée est donc la composante
supplémentaire de l’azote, qui n’est habituellement pas observée lorsque la BSA est adsorbée à partir
d’une solution aqueuse de protéines. Compte tenu du fait que le rapport C/N est constant, cette nouvelle
composante est issue de l’azote de la protéine évaporée, une contamination azotée est donc exclue.
Si l’on suit la variation du rapport N 398,6 /N-C=O en fonction de l’épaisseur de la couche de BSA (figure
V-13), ce rapport diminue jusqu’à 0,34 nm puis reste constant quelque soit l’épaisseur de la couche.
0.7
0.6
N 398,6 / N-C=O
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5
Epaisseur de la couche de BSA (nm)
Figure V-13 : Evolution du rapport N 398,6 /N-C=O en fonction de l’épaisseur de la couche de BSA
sur le substrat CrOx.
La composante N 398,6 est donc majoritairement observée dans les premiers angströms de l’interface
formée. Cependant, si cette contribution était spécifiquement associée à une modification de
l’environnement électronique de l’azote à l’interface, son intensité devrait décroître puis disparaître avec
l’augmentation de l’épaisseur de la couche de protéine. La présence des contaminants azotés du substrat
peut entraîner des biais importants dans les analyses quantitatives, notamment lors des premières
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