MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon

More documents

Recommendations

Info

Chapitre V – Interface BSA/métal IV.2. Construction de l’interface BSA/métal par sublimation de la BSA IV.2.1. Matériel et méthode de travail Préparation des échantillons et sublimation de la BSA: Préalablement à la sublimation des protéines, les substrats d’oxyde de chrome et d’or sont débarrassés de la couche de contamination carbonée par abrasion ionique à l’argon. La sublimation des protéines sous vide est réalisée à partir de BSA sous forme de poudre (Albumin Fraction V, Merck). Celle-ci est déposée dans un creuset de tantale logé dans un filament hélicoïdal de tungstène. Le montage est adapté sur l’évaporateur thermique dans la chambre de préparation (figure V- 10). La distance entre la source (BSA) et le substrat est de l’ordre de 7 cm. Pour procéder à la sublimation de la BSA, les substrats sont positionnés sous le filament de tungstène qui est chauffé par effet joule (10 V, 8 A) jusqu’à ce que la pression dans la chambre de préparation augmente de 10 -6 Pa à 2.10 -3 Pa. A cette pression, la température du filament de tungstène est évaluée à 245°C environ, par un thermocouple Chromel/Alumel. Pulvérisation Magnétron Evaporateur thermique Désorption thermique Figure V-10 : Schématisation de l’appareillage sous UHV et des différents éléments le constituant. Calcul d’épaisseur équivalente : La variation d’intensité des pics du substrat étant due à l’atténuation du signal par la couche de protéine déposée, son épaisseur peut être évaluée en faisant l’hypo<strong>thèse</strong> que la couche est homogène (Annexe 5-I). IV.2.2. Etude de l’interface BSA/CrOx La figure V-11 présente les spectres du substrat CrOx en fonction de l’épaisseur évaluée de la BSA adsorbée. Les intensités des pics C1s, O1s et N1s, caractéristiques de la protéine augmentent avec l’épaisseur de la couche évaporée alors que l’intensité du pic Cr2p du substrat diminue. - 136 -
Chapitre V – Interface BSA/métal 3,1 nm Cr2p O1s C1s N1s Ar2p 1,5 nm Intensité (unit arb) 0,34 nm 0,07 nm Cr Ox 700 600 500 400 300 Energie de liaison (eV) Figure V-11 : Spectres XPS du substrat CrOx en fonction de l’épaisseur de la couche de BSA évaporée. Les pics C1s, N1s et O1s, caractéristiques de la protéine augmentent avec l’atténuation du pic Cr2p caractéristique du substrat. 200 100 0 On peut également observer une augmentation du niveau du fond continu après les pics du niveau 2p du chrome couplée à la croissance de la couche de BSA. Ceci confirme bien que les électrons du chrome proviennent d’une profondeur de plus en plus importante. L’épaisseur de la couche de protéines reste néanmoins insuffisante pour masquer le signal du chrome. Afin de suivre l’évolution des composantes des éléments constitutifs de la BSA, les acquisitions centrées sur les niveaux de cœur C1s, O1s et N1s sont présentés sur la figure V-12. - 137 -
Page 1:
N° d’ordre 2006-21 Année 2006 T
Page 5 and 6:
SOMMAIRE INTRODUCTION GENERALE CHAP
Page 7:
CHAPITRE V: INTERFACE BSA/METAL I.
Page 10 and 11:
et quantitativement l’efficacité
Page 12 and 13:
Chapitre I - Les ATNC, un Problème
Page 14 and 15:
Chapitre I - Les ATNC, un problème
Page 16 and 17:
Page 18 and 19:
Page 20 and 21:
Page 22 and 23:
Page 24 and 25:
Page 26 and 27:
Page 28 and 29:
Page 30 and 31:
Page 32 and 33:
Page 34 and 35:
- 26 - Chapitre II - Evaluation du
Page 36 and 37:
- 28 - Chapitre II - Evaluation du
Page 38 and 39:
Chapitre II - Evaluation du Nettoya
Page 40 and 41:
Page 42 and 43:
Page 44 and 45:
Page 46 and 47:
Page 48 and 49:
Page 50 and 51:
Page 52 and 53:
Page 54 and 55:
Page 56 and 57:
Page 58 and 59:
Page 60 and 61:
Page 62 and 63:
Page 64 and 65:
Chapitre III - Efficacité du Netto
Page 66 and 67:
Page 68 and 69:
Page 70 and 71:
Page 72 and 73:
Page 74 and 75:
Page 76 and 77:
Page 78 and 79:
Page 80 and 81:
Page 82 and 83:
Page 84 and 85:
Page 86 and 87:
Page 88 and 89:
Page 90 and 91:
Page 92 and 93:
Page 94 and 95: Chapitre III - Efficacité du Netto
Page 106 and 107: - 98 - Chapitre IV - Les Protagonis
Page 108 and 109: Chapitre IV - Les Protagonistes de
Page 132 and 133: - 124 - Chapitre V - Interface BSA/
Page 134 and 135: Chapitre V - Interface BSA/métal l
Page 136 and 137: Chapitre V - Interface BSA/métal L
Page 138 and 139: Chapitre V - Interface BSA/métal I
Page 140 and 141: Chapitre V - Interface BSA/métal m
Page 146 and 147: Chapitre V - Interface BSA/métal C
Page 148 and 149: Chapitre V - Interface BSA/métal
Page 150 and 151: Chapitre V - Interface BSA/métal t
Page 154 and 155: Chapitre V - Interface BSA/métal A
Page 156 and 157: Chapitre V - Interface BSA/métal (
Page 158 and 159: Chapitre V - Interface BSA/métal D
Page 164 and 165: Chapitre V - Interface BSA/métal E
Page 166 and 167: Chapitre V - Interface BSA/métal m
Page 168 and 169: Chapitre V - Interface BSA/métal F
Page 170 and 171: Chapitre V - Interface BSA/métal U
Page 174 and 175: Chapitre V - Interface BSA/métal (
Page 176 and 177: Chapitre V - Interface BSA/métal A
Page 180 and 181: Chapitre V - Interface BSA/métal P
Page 182 and 183: Chapitre V - Interface BSA/métal V
Page 188 and 189: Chapitre V - Interface BSA/métal R
Page 190 and 191: - 182 - Chapitre V - Interface BSA/
Page 192 and 193: Conclusion Générale résiduelle,
Page 194 and 195:
- 186 -
Page 196 and 197:
Annexe 1 - La Spectroscopie de Phot
Page 198 and 199:
Annexe 1 - La Spectroscopie de Phot
Page 200 and 201:
Annexe 2 - Marquage des protéines
Page 202 and 203:
Annexe 3 - Le Western blot Le princ
Page 204 and 205:
Annexe 3 - Le Western blot Les cond
Page 206 and 207:
- 198 - Annexe 3 - Le Western blot
Page 208 and 209:
Annexe 4 - Les Biais Méthodologiqu
Page 210 and 211:
Annexe 4 - Les Biais Méthodologiqu
Page 212 and 213:
Annexe 5 - Calculs des épaisseurs
Page 214 and 215:
- 206 -
Page 216:
- 208 -
show all

MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?