MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon

Chapitre IV – Les Protagonistes de la Détergence
(a)
- - - - - - - -
SQ - - - - + + + +
Cu 2+
PK - + - + - + - +
(b)
Cu 2+
SQ
+ + + + + + + +
- - - - + + + +
PK
- + - + - + - +
Figure IV-13 : Incidence du séquestrant sur l’activité enzymatique de la protéase de la formulation
anionique. (a) sans saturation préalable du séquestrant par les ions Cu 2+ ; (b) séquestrant
préalablement saturé par les ions Cu 2+ . SQ : séquestrant ;PK : protéinase K.
Les résultats présentés sur la figure IV-13(a) confirment l’importance du séquestrant pour garantir
l’activité enzymatique de la protéase. En effet, en absence de séquestrant, la protéine prion n’est pas
digérée alors qu’en sa présence, elle est détectée sous sa forme PrPres.
Les résultats de la figure IV-13(b) montrent qu’en présence d’ions Cu 2+ , la protéine prion détectée n’est
pas dégradée et ce indépendamment de la présence ou non du séquestrant. Seul le traitement secondaire
par la protéinase K permet d’observer la PrPres. Ces résultats confirment donc le rôle inhibiteur des
cations métalliques sur l’activité enzymatique. En effet, lorsque le séquestrant est préalablement saturé
par les ions Cu 2+ , il n’est plus disponible pour séquestrer les cations métalliques de l’eau du réseau qui
peuvent donc inhiber l’activité enzymatique de la protéase.
Si la formulation de l’enzyme augmente son activité enzymatique, la nature du tensioactif ne semble pas
être un facteur prépondérant. Cependant, compte tenu de la diversité des tensioactifs à l’intérieur d’une
même famille, les résultats obtenus ne peuvent être généralisés.
Nous avons pu observer que la présence d’un seul tensioactif, non ionique ou amphotère, était plus
bénéfique que l’association de ces deux tensioactifs, sur l’activité de la protéase. Il faut néanmoins
rappeler que la complexité de la chimie de formulation réside dans l’identification et le choix des
meilleurs compromis. Ainsi, si l’association des tensioactifs semble légèrement diminuer l’activité
enzymatique, elle favorise en revanche l’efficacité de la détergence. La présence du tensioactif non
ionique permet également de stabiliser la formulation dans le temps.
Le séquestrant est également un facteur important dans l’optimisation de l’activité des enzymes sensibles
à la dureté de l’eau.
Après avoir focalisé notre attention sur les tensioactifs et le séquestrant, nous avons souhaité évaluer
d’une part l’incidence de la concentration en enzymes sur l’inactivation de la protéine prion et d’autre
part, nous intéresser à l’activité d’autres protéases seules ou en association vis-à-vis de la protéine prion.
Les enzymes :
Lors de nos travaux concernant l’activité enzymatique en surface, nous avons observé une activité
surfacique de la protéase. Cependant, augmenter la concentration de la formulation en enzymes n’avait
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