MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon

Chapitre IV – Les Protagonistes de la Détergence
savoir la lipase, l’amylase et la protéase. Dans le cadre de cette étude, chaque enzyme est formulée à 2%
dans l’Aniosyme N2 concentrée. Les seules variables sont, dans un premier temps, les tensioactifs et le
séquestrant. Les résultats obtenus pour les divers tensioactifs testés seront comparés à ceux obtenus par la
formulation Aniosyme N2, considérée comme la formulation de référence.
Les tensioactifs et le séquestrant de l’Aniosyme N2 :
Deux tensioactifs et un séquestrant entrent dans la composition de la formulation Aniosyme N2. Les
tensioactifs sont :
- Un tensioactif non ionique (NI) : l’alcool gras polyéthoxylé isoC 13 E 8 (8 moles d’oxyde
d’éthylène);
- Un tensioactif amphotère (A ± ) : le N-lauryl-iminodipropionate de sodium.
Le séquestrant est l’iminodisuccinate de sodium.
Dans un premier temps, nous allons nous intéresser à l’incidence de ces tensioactifs et du séquestrant sur
l’activité de la protéase vis-à-vis de la PrPsc. Pour cela, quatre formulations ont été préparées :
- La formulation n°1 est la formulation Aniosyme N2 sans le tensioactif non ionique ;
- La formulation n°2 est la formulation Aniosyme N2 sans le tensioactif amphotère ;
- La formulation n°3 est la formulation Aniosyme N2 sans le séquestrant ;
- La formulation n°4 est la formulation n°1 sans le séquestrant.
Les résultats obtenus sont présentés sur la figure IV-10.
N2 1 2 3 4
NI
+ + - - + + + + - -
A ±
+ + + + - - + + + +
SQ + + + + + + - - - -
PK - + - + - + - + - +
Figure IV-10 : Western blot de la PrP traitée par l’Aniosyme N2 et ses variantes. L’activité
enzymatique est inhibée par la chaleur et la PrP est précipitée par l’acide phosphotungstique. N2 :
Aniosyme N2 ; NI : tensioactif non ionique ; A ± : tensioactif amphotère ; SQ : séquestrant ; PK :
protéinase K.
Comparativement à la formulation Aniosyme N2 (N2) sans traitement à la protéinase K (PK-), les
formulations n°1 et n°2 améliorent légèrement l’activité de la protéase puisque l’intensité du signal est
plus faible pour ces deux formulations. En revanche, les formulations n°3 et n°4 ne permettent pas
d’améliorer la digestion de la PrP. Ces premiers résultats suggèrent que les formulations sont plus
efficaces dès lors que le tensioactif utilisé est seul, soit non ionique (formulation n°2) soit amphotère
(formulation n°3). L’association des deux tensioactifs semble légèrement diminuer l’activité enzymatique
(N2). D’autre part, les résultats obtenus pour les formulations n°3 et n°4 montrent que l’absence de
séquestrant dans les formulations nuit à l’activité enzymatique. Il semble que l’activité enzymatique de la
protéase soit sensible à la présence de cations métalliques. Dans le cas présent, ces cations sont
essentiellement les ions Ca 2+ et Mg 2+ présents dans l’eau du réseau servant à la dilution des formulations.
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