MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon
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Chapitre IV – Les Protagonistes de la Détergence<br />
I.5. Incidence de la concentration en enzymes sur l’efficacité de la<br />
formulation<br />
La protéase formulée dans l’Aniosyme N2 améliore considérablement les performances de cette<br />
formulation vis-à-vis des protéines adsorbées en agissant directement sur la surface. Dans le souci<br />
constant de vouloir optimiser l’efficacité des formulations, on peut se demander si l’augmentation de la<br />
concentration de protéases dans la formulation s’accompagne d’une amélioration des performances vis-àvis<br />
des protéines adsorbées.<br />
Pour cela, nous avons comparé par XPS les rapports N1s/Cr2p3 obtenus à partir du couple BSA/oxyde de<br />
chrome avant (BSA) et après 15 minutes de nettoyage par les formulations d’Aniosyme N2 contenant des<br />
concentrations croissantes de protéases, de 2%, 5% et 7%. Ces rapports sont présentés sur la figure IV-8.<br />
1.0<br />
1.0<br />
1.0<br />
0.8<br />
0.8<br />
0.8<br />
N1s/Cr2p3<br />
0.6<br />
0.4<br />
N1s/Cr2p3<br />
0.6<br />
0.4<br />
N1s/Cr2p3<br />
0.6<br />
0.4<br />
0.2<br />
0.2<br />
0.2<br />
0.0<br />
0.0<br />
0.0<br />
BSA<br />
Aniosyme N2 (2%P)<br />
BSA<br />
Aniosyme N2 (5%P)<br />
BSA<br />
Aniosyme N2 (7%P)<br />
Figure IV-8 : Rapports N1s / Cr2p3 pour le couple BSA/oxyde de chrome avant nettoyage (BSA) et<br />
après nettoyage par la formulation Aniosyme N2 contenant 2% (2%P), 5% (5%P) et 7% (7%P) de<br />
protéases. L’augmentation de la concentration en protéase dans la formulation Aniosyme N2 ne<br />
permet pas d’améliorer ses performances dans le cadre d’un nettoyage de 15 minutes.<br />
Les rapports N1s/Cr2p3 calculés pour le couple BSA/oxyde de chrome (BSA) avant nettoyage sont plus<br />
élevés que ceux calculés après le nettoyage. Cela confirme donc une diminution de la quantité d’azote sur<br />
la surface et donc une diminution de la quantité de BSA adsorbée lorsque les substrats sont nettoyés.<br />
Cependant, pour les trois concentrations de protéases testées, les réductions observées de ce rapport sont<br />
environ de 40%. Augmenter les concentrations en protéases de la formulation Aniosyme N2 n’a donc pas<br />
d’effet significatif, en 15 minutes, sur ses performances vis-à-vis des protéines adsorbées.<br />
La notion du temps de nettoyage est un facteur important lorsque l’on s’intéresse à l’activité enzymatique.<br />
Une diminution de la quantité de protéines adsorbées en fonction des concentrations croissantes de<br />
protéases serait probablement observée pour des temps de contact plus long. Compte tenu des<br />
recommandations sur la durée du nettoyage des DM qui est fixé dans sa globalité à 15 minutes, nous<br />
n’avons pas souhaité vérifier cette hypo<strong>thèse</strong>. De plus, l’utilisation excessive de protéase dans les<br />
formulations génère des risques d’allergies pour les manipulateurs [Rosenberg et Gervais 1987, Tripathi<br />
et Grammer 2001].<br />
I.6. Syn<strong>thèse</strong><br />
Ces travaux montrent à nouveau la complémentarité de la technique XPS et de la méthode isotopique<br />
pour une meilleure compréhension des interactions possibles entre les protéines, les surfaces et les<br />
composés constitutifs des formulations.<br />
En effet, un certain nombre de réponses sur le rôle et le mode d’action des enzymes, et notamment des<br />
protéases, vis-à-vis des protéines adsorbées ont été apportées par la mise en œuvre de l’XPS et de la<br />
méthode isotopique. Les enzymes sont des composants particulièrement actifs dans la définition d’une<br />
formulation performante. Elles participent à l’élimination des salissures qui leur sont spécifiques et<br />
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