MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon

Chapitre IV – Les Protagonistes de la Détergence
I.5. Incidence de la concentration en enzymes sur l’efficacité de la
formulation
La protéase formulée dans l’Aniosyme N2 améliore considérablement les performances de cette
formulation vis-à-vis des protéines adsorbées en agissant directement sur la surface. Dans le souci
constant de vouloir optimiser l’efficacité des formulations, on peut se demander si l’augmentation de la
concentration de protéases dans la formulation s’accompagne d’une amélioration des performances vis-àvis
des protéines adsorbées.
Pour cela, nous avons comparé par XPS les rapports N1s/Cr2p3 obtenus à partir du couple BSA/oxyde de
chrome avant (BSA) et après 15 minutes de nettoyage par les formulations d’Aniosyme N2 contenant des
concentrations croissantes de protéases, de 2%, 5% et 7%. Ces rapports sont présentés sur la figure IV-8.
1.0
1.0
1.0
0.8
0.8
0.8
N1s/Cr2p3
0.6
0.4
N1s/Cr2p3
0.6
0.4
N1s/Cr2p3
0.6
0.4
0.2
0.2
0.2
0.0
0.0
0.0
BSA
Aniosyme N2 (2%P)
BSA
Aniosyme N2 (5%P)
BSA
Aniosyme N2 (7%P)
Figure IV-8 : Rapports N1s / Cr2p3 pour le couple BSA/oxyde de chrome avant nettoyage (BSA) et
après nettoyage par la formulation Aniosyme N2 contenant 2% (2%P), 5% (5%P) et 7% (7%P) de
protéases. L’augmentation de la concentration en protéase dans la formulation Aniosyme N2 ne
permet pas d’améliorer ses performances dans le cadre d’un nettoyage de 15 minutes.
Les rapports N1s/Cr2p3 calculés pour le couple BSA/oxyde de chrome (BSA) avant nettoyage sont plus
élevés que ceux calculés après le nettoyage. Cela confirme donc une diminution de la quantité d’azote sur
la surface et donc une diminution de la quantité de BSA adsorbée lorsque les substrats sont nettoyés.
Cependant, pour les trois concentrations de protéases testées, les réductions observées de ce rapport sont
environ de 40%. Augmenter les concentrations en protéases de la formulation Aniosyme N2 n’a donc pas
d’effet significatif, en 15 minutes, sur ses performances vis-à-vis des protéines adsorbées.
La notion du temps de nettoyage est un facteur important lorsque l’on s’intéresse à l’activité enzymatique.
Une diminution de la quantité de protéines adsorbées en fonction des concentrations croissantes de
protéases serait probablement observée pour des temps de contact plus long. Compte tenu des
recommandations sur la durée du nettoyage des DM qui est fixé dans sa globalité à 15 minutes, nous
n’avons pas souhaité vérifier cette hypothèse. De plus, l’utilisation excessive de protéase dans les
formulations génère des risques d’allergies pour les manipulateurs [Rosenberg et Gervais 1987, Tripathi
et Grammer 2001].
I.6. Synthèse
Ces travaux montrent à nouveau la complémentarité de la technique XPS et de la méthode isotopique
pour une meilleure compréhension des interactions possibles entre les protéines, les surfaces et les
composés constitutifs des formulations.
En effet, un certain nombre de réponses sur le rôle et le mode d’action des enzymes, et notamment des
protéases, vis-à-vis des protéines adsorbées ont été apportées par la mise en œuvre de l’XPS et de la
méthode isotopique. Les enzymes sont des composants particulièrement actifs dans la définition d’une
formulation performante. Elles participent à l’élimination des salissures qui leur sont spécifiques et
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