MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon

Chapitre IV – Les Protagonistes de la Détergence
Afin de connaître l’apport réel des enzymes dans l’efficacité de ces formulations, nous nous sommes
posés les questions suivantes :
- La présence des enzymes améliore-t-elle les performances détergentes de la formulation
- Les enzymes, utilisées seules, présentent-elles un pouvoir détergent
- L’activité protéasique, dans la détergence, est-elle spécifique de son substrat
- Les enzymes agissent-elles sur les molécules adsorbées sur les surfaces
- Les molécules entrant dans la composition des formulations peuvent-elles avoir un rôle
inhibiteur, direct ou indirect, sur l’activité protéasique
Pour répondre à ces questions, nous avons mis en œuvre les techniques et méthodes surfaciques
présentées dans le chapitre II : la spectroscopie de photoélectrons (XPS) et la méthode isotopique à l’iode
125.
I.1. Méthodologie
Les analyses XPS sont réalisées avec la source non monochromatisée d’aluminium (Al Kα 1486,6 eV).
Deux couples salissures/substrats ont été étudiés :
- Homogénat de cerveau 10% (HC) sur substrat d’acier inoxydable AISI 304 : il s’agit du couple
que nous considérons représentatif d’un DM souillé en raison de la nature complexe de la
salissure. Les conditions d’adsorption et de nettoyage sont rappelées dans le tableau IV-2.
- Sérum Albumine Bovine (BSA) sur substrat d’oxyde de chrome : la BSA est choisie comme
protéine modèle pour l’adsorption. Quant à l’oxyde de chrome, il est couramment utilisé et décrit
comme un substrat de choix pour modéliser les propriétés de surface des aciers inoxydables. En
effet, l’oxyde de chrome est le composant majoritaire des premières couches atomiques des
aciers inoxydables (Rubio 2002, Karlsson 1996…). Les conditions d’adsorption et de nettoyage
sont également présentées dans le tableau IV-2.
Tableau IV-2 : Conditions opératoires pour la préparation des échantillons analysés par XPS
Couple Salissure / Substrat HC/AISI 304 BSA/oxyde de chrome
Adsorption par immersion HC10% - 1h – Tamb – 50 rpm BSA 1mg/ml – 1h – Tamb – 50 rpml
1 er Rinçage Dilutions successives en H 2 0 distillée
1 er Séchage A l’air Sous flux d’azote sec
Nettoyage
Les formulations et solutions sont testées à 0,5% en eau du réseau
15 minutes – Tamb – 50 rpm
2 nd Rinçage En eau du réseau
2 nd Séchage Sous flux d’azote sec
Concernant la méthode isotopique, le couple salissure/substrat étudié est celui présenté dans le chapitre II,
à savoir la BSA- 125 I adsorbée sur des substrats d’acier inoxydable AISI 304. Nous n’avons pas eu recours
aux substrats d’oxyde de chrome pour la méthode isotopique.
I.2. Optimisation des performances par les enzymes
En XPS, une meilleure performance des formulations enzymatiques, comparativement à ces mêmes
formulations ne contenant pas d’enzymes, doit se traduire par une diminution du signal de l’azote relatif
aux éléments caractéristiques du substrat.
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