MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon

Chapitre III – Efficacité du Nettoyage et/ou de la Désinfection vis-à-vis de la protéine prion
SUPPORTS EFFLUENTS INTERPRETATION
Peu ou pas de modification
du signal
+
Absence de signal
Procédé inefficace pour la
détergence
Diminution du signal, sans
modification du profil
électrophorétique
+
Augmentation du signal,
sans modification du profil
électrophorétique
Procédé efficace pour la
détergence
Diminution du signal, avec
modification du profil
électrophorétique
+
Légère augmentation du
signal, avec modification du
profil électrophorétique
Procédé efficace pour la
détergence et l’inactivation
partielle des prions
Figure III-20 : Interprétation de l’efficacité des procédés en terme de détergence et d’inactivation
des prions compte tenu des informations disponibles sur les supports et dans les effluents.
Les effluents constituent une source riche d’informations pour une interprétation fiable et complète de
l’efficacité des procédés de nettoyage évalués sur supports.
III.2.4. Synthèse
Une méthodologie axée sur la détection indirecte de la protéine prion adsorbée sur fils d’acier inoxydable
est disponible pour évaluer l’efficacité des procédés de nettoyage et/ou de désinfection vis-à-vis de la
protéine prion.
La mise en œuvre de cette méthode nous a permis :
- De montrer l’efficacité des procédés du double nettoyage utilisant l’Aniosyme N2 en première
intention ;
- D’évaluer cette efficacité vis-à-vis de la protéine prion :
du vMCJ et de la MCJs, en milieu lipidique cérébral ;
des souches animales 6PB1, 263K, C506M3 et 22L ;
- De confirmer l’incidence de la nature des salissures sur l’efficacité des procédés, les salissures
exclusivement protéiques représentant sans aucun doute le pire des scénarios ;
- De mettre en évidence un comportement différent des souches, notamment de la souche
C506M3, face à une sensibilisation à la digestion enzymatique ;
- De suggérer un rôle inhibiteur des principes actifs antimicrobiens de l’Aniosyme DD1 pour le
nettoyage des surfaces notamment vis-à-vis du risque prion. Cependant, ces effets antagonistes
peuvent être significativement réduits lorsque les surfaces sont préalablement nettoyées.
Cette méthodologie représente donc un pré-requis pertinent à la validation in vivo des procédés.
IV. CONCLUSIONS
La démarche expérimentale mise en œuvre pour la sélection des formulations d’intérêt et la validation des
procédés de nettoyage et/ou de désinfection s’est révélée particulièrement adaptée à notre problématique.
En effet, la sélection des formulations par la méthode isotopique à l’iode 125 vis-à-vis de l’HSA et de
l’HFN, ainsi que par la méthode de détection directe de la PrPres a permis que cette sélection soit réalisée
selon le pire des scénarios. La mise en place de la méthode de détection indirecte de la PrPsc était
néanmoins nécessaire pour :
- abaisser les limites de détection de la protéine prion résiduelle ;
- vérifier le comportement respectif des souches dans la phase de nettoyage ;
- confirmer la résistance des salissures protéiques aux procédés de nettoyage ;
- mettre en évidence les biais introduits par la digestion enzymatique à la protéinase K.
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