MR thèse 2006-21 - Bibliothèque Ecole Centrale Lyon
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Chapitre III – Efficacité du Nettoyage et/ou de la Désinfection vis-à-vis de la protéine prion<br />
SUPPORTS EFFLUENTS INTERPRETATION<br />
Peu ou pas de modification<br />
du signal<br />
+<br />
Absence de signal<br />
Procédé inefficace pour la<br />
détergence<br />
Diminution du signal, sans<br />
modification du profil<br />
électrophorétique<br />
+<br />
Augmentation du signal,<br />
sans modification du profil<br />
électrophorétique<br />
Procédé efficace pour la<br />
détergence<br />
Diminution du signal, avec<br />
modification du profil<br />
électrophorétique<br />
+<br />
Légère augmentation du<br />
signal, avec modification du<br />
profil électrophorétique<br />
Procédé efficace pour la<br />
détergence et l’inactivation<br />
partielle des prions<br />
Figure III-20 : Interprétation de l’efficacité des procédés en terme de détergence et d’inactivation<br />
des prions compte tenu des informations disponibles sur les supports et dans les effluents.<br />
Les effluents constituent une source riche d’informations pour une interprétation fiable et complète de<br />
l’efficacité des procédés de nettoyage évalués sur supports.<br />
III.2.4. Syn<strong>thèse</strong><br />
Une méthodologie axée sur la détection indirecte de la protéine prion adsorbée sur fils d’acier inoxydable<br />
est disponible pour évaluer l’efficacité des procédés de nettoyage et/ou de désinfection vis-à-vis de la<br />
protéine prion.<br />
La mise en œuvre de cette méthode nous a permis :<br />
- De montrer l’efficacité des procédés du double nettoyage utilisant l’Aniosyme N2 en première<br />
intention ;<br />
- D’évaluer cette efficacité vis-à-vis de la protéine prion :<br />
du vMCJ et de la MCJs, en milieu lipidique cérébral ;<br />
des souches animales 6PB1, 263K, C506M3 et 22L ;<br />
- De confirmer l’incidence de la nature des salissures sur l’efficacité des procédés, les salissures<br />
exclusivement protéiques représentant sans aucun doute le pire des scénarios ;<br />
- De mettre en évidence un comportement différent des souches, notamment de la souche<br />
C506M3, face à une sensibilisation à la digestion enzymatique ;<br />
- De suggérer un rôle inhibiteur des principes actifs antimicrobiens de l’Aniosyme DD1 pour le<br />
nettoyage des surfaces notamment vis-à-vis du risque prion. Cependant, ces effets antagonistes<br />
peuvent être significativement réduits lorsque les surfaces sont préalablement nettoyées.<br />
Cette méthodologie représente donc un pré-requis pertinent à la validation in vivo des procédés.<br />
IV. CONCLUSIONS<br />
La démarche expérimentale mise en œuvre pour la sélection des formulations d’intérêt et la validation des<br />
procédés de nettoyage et/ou de désinfection s’est révélée particulièrement adaptée à notre problématique.<br />
En effet, la sélection des formulations par la méthode isotopique à l’iode 125 vis-à-vis de l’HSA et de<br />
l’HFN, ainsi que par la méthode de détection directe de la PrPres a permis que cette sélection soit réalisée<br />
selon le pire des scénarios. La mise en place de la méthode de détection indirecte de la PrPsc était<br />
néanmoins nécessaire pour :<br />
- abaisser les limites de détection de la protéine prion résiduelle ;<br />
- vérifier le comportement respectif des souches dans la phase de nettoyage ;<br />
- confirmer la résistance des salissures protéiques aux procédés de nettoyage ;<br />
- mettre en évidence les biais introduits par la digestion enzymatique à la protéinase K.<br />
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