PCEM1 CAHIER D'EXERCICES de BIOCHIMIE 4. Biologie ...

Cahier d'Exercices en Biochimie / PCEM1 Biologie Moléculaire / 27
14. Les deux séquences de 3 nucléotides en
caractères gras comprennent :
a. un site d’initiation de la transcription du gène de
l’apoA-II
b. un signal de fin de traduction de la protéine
apoA-II
c. un site d’épissage du transcrit primaire de
l’apoA-II
d. un signal de polyadénylation du transcrit
primaire de l’apoA-II
e. un élément cis-régulateur d’expression du gène
de l’apoA-II
15. Sachant que le gène de l’apoA-II comporte 4
exons et que le 1 er exon n’est pas traduit, cet
ADNc :
a. a la même longueur que le gène de l’apoA-II
b. a la même longueur que la séquence du gène
de l’apoA-II située entre les sites d’initiation et de
terminaison de la transcription
c. a la même longueur que le transcrit primaire de
l’apoA-II
d. a la même longueur que la séquence codante
du gène de l’apoA-II
e. a la même longueur que l’ARNm de l’apoA-II
(hors mis la coiffe et la queue polyA)
16. Vous souhaitez à partir de ce cDNA, synthétiser
par réaction de polymérisation en chaîne (PCR), le
fragment situé entre les deux séquences en
caractères gras. Parmi les constituants suivants,
quels sont ceux que vous utiliserez pour cette
synthèse :
a. l’oligonucléotide : 5’-
ATGAAGCTGCTCGCAGC-3’
b. l’oligonucléotide : 5’-
CAGCCTGCCACCCAGTGA-3’
c. l’oligonucléotide : 5’-
TCACTGGGTGGCAGGCTG-3’
d. les didésoxyribonucléosides triphosphates :
ddATP, ddTTP, ddGTP, ddCTP
e. une ADN polymérase
17. La température de fusion du produit de PCR
ainsi obtenu :
a. est identique à celle d’un fragment de même
taille, constitué uniquement de désoxythymidylate
(polydT)
b. est supérieure à celle d’un fragment de même
taille, constitué uniquement de désoxythymidylate
(polydT)
c. est supérieure à celle d’un fragment de même
taille, constitué uniquement de désoxyadénylate
(polydA)
d. est supérieure à celle d’un fragment de même
taille, constitué uniquement de désoxyguanylate
(polydG)
e. est supérieure à celle d’un fragment de même
taille, constitué uniquement de désoxycytidylate
(polydC)
18. Le produit de PCR ainsi obtenu, est soumis à une
digestion par l’enzyme de restriction HypCH4 V
pour laquelle il n’existe qu’un site de restriction
dans l’ADNc de l’apoA-II (situé aux nucléotides 98-
101), puis à une électrophorèse en gel d’agarose.
Sachant que l’enzyme HypCH4 V hydrolyse l’ADN
de la façon suivante :
5’…TG CA…3’
3’…AC GT…5’
vous observerez à l’électrophorèse :
a. deux fragments de 41 pb et 262 pb
b. deux fragments de 99 pb et 342 pb
c. quatre fragments de 41 pb, 99 pb, 262 pb et 342
pb.
d. trois fragments de 99 pb, 342 pb et 473 pb.
e. trois fragments de 41 pb, 303 pb et 473 pb.
19. Une délétion des deux nucléotides numérotés
100-101 dans la séquence d’ADNc sera
accompagnée :
a. d’un décalage du cadre de lecture
b. de la synthèse d’une protéine tronquée (plus
courte que la protéine normale)
c. d’un défaut d’épissage du transcrit primaire
d. d’un changement du 14 ème acide aminé de
l’apoA-II (le 1 er étant la méthionine)
e. de la disparition du site de restriction de l’enzyme
de restriction HypCH4 V dans l’ADNc
20. La séquence d’ADNc d’un sujet homozygote pour
la délétion des nucléotides numérotés 100-101 est
soumise comme dans la question 4 à une
amplification du fragment situé entre les deux
séquences en caractères gras, puis à une digestion
par l’enzyme de restriction HypCH4 V.
Vous observerez à l’electrophorèse en gel
d’agarose :
a. trois fragments de 41 pb, 262 pb et 303 pb
b. un fragment de 301 pb
c. un fragment de 473 pb
d. deux fragments de 41 pb et 262 pb
e. deux fragments de 99 pb et 342 pb
Faculté de Médecine Pierre & Marie Curie