PCEM1 CAHIER D'EXERCICES de BIOCHIMIE 4. Biologie ...

Cahier d'Exercices de Biochimie / PCEM1 Biologie Moléculaire / 15
5.7.3 Outre l’ADN génomique et les amorces oligonucléotidiques, vous devrez ajouter au
milieu de la réaction, une enzyme et les molécules précurseurs nécessaires à la
synthèse d’ADN.
• Citez le nom de l’enzyme.
• Citez le terme générique qui désigne l’ensemble des molécules précurseurs
nécessaires à la synthèse d’ADN.
5.7.4 Décrivez en une phrase chacune des 3 étapes qui se répète à chaque cycle de PCR:
5.7.5 Un polymorphisme de restriction Hae III bi-allélique de ce gène, résulte d’une
substitution C T qui fait disparaître le site de restriction Hae III (GGCC) dans
l’ADN de 5 % des sujets, comme cela est schématisé ci-dessous:
Pour étudier ce polymorphisme,
le fragment
amplifié par PCR est
soumis à une digestion
enzymatique par Hae III,
puis à une
électrophorèse.
Sachant que l’enzyme HaeIII coupe sans décalage l’ADN double brin entre GG et CC,
indiquez quels sont le nombre et la taille du ou des fragments obtenus par
électrophorèse, chez chacun des trois sujets suivants:
• Homozygote pour la version allélique fréquente.
• Homozygote pour la version allélique rare.
• Hétérozygote.
5.7.6 Existe-t-il des différences dans la séquence protéique correspondant à ce segment
d’ADN (dont les codons sont représentés sur la figure) entre les 3 sujets
Comment qualifiez-vous dans ce cas, la substitution C T
5.7.7 Chez un sujet donné la même séquence correspondant à ce segment d’ADN, pourra-telle
être détectée
• dans une préparation d’ADN complémentaire de son foie
• dans une préparation d’ADN complémentaire de ses cellules sanguines
Justifiez vos réponses.
5.8
Ci-dessous est représenté un gène de ménage (dont l’expression est, par définition, ubiquitaire)
qui code une enzyme humaine E.
5.8.1. Combien ce gène comporte d’introns
5.8.2. Si la taille de chaque intron est de 10 kpb, et celle du promoteur de 100 pb, quelle est,
sans compter d’autres séquences régulatrices éventuelles, la taille du gène
5.8.3. Si tous les exons sont conservés au cours de l’épissage, quelle sera, sans compter la
coiffe et la queue poly A, la taille du transcrit primaire et la taille de l’ARN messager
Faculté de Médecine Pierre & Marie Curie