Verticillium - Toubkal

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sur milieu PDA et les cultures liquides sur milieu Malt à 2%. Les deux milieux sont
enrichis des mêmes concentrations en sel pré-citées.
L’effet du sel sur le développement de T. harzianum est évalué par :
- La croissance pondérale estimée par le poids sec du mycélium. Ce
dernier est recueilli après filtration sur mousseline des cultures liquides
âgées de deux semaines, puis lavé deux fois avant d’être mis à sécher à
80°C pendant une nuit.
- Le taux de sporulation déterminé après comptage des spores contenues
dans les filtrats de cultures sur cellule de Malassez.
Toutes les cultures sont incubées à l’obscurité et à 25 + 1°C.
2. Mesure du phénomène d’antagonisme
2.1. Capacité de colonisation
Dans des boîtes de Pétri de 90 mm de diamètre contenant 25ml de milieu, on place
deux explants séparés de 40 mm, provenant de cultures jeunes des deux
champignons. La capacité de colonisation de Trichoderma est déterminée par le
rapport C défini par Camporota (1985) comme suit :
C = DT/DE x 100
DT : distance en mm parcourue par le front de croissance de Trichoderma sur l’axe
reliant les deux explants au bout de trois jours
DE : distance séparant les deux explants.
2.2. Antagonisme par antibiose
2.2.1. Action des substances volatiles
Des boîtes de Pétri contenant du milieu PDA additionné de sel à différentes
concentrations sont ensemencées par une bouture de 3mm de diamètre provenant
d’une culture jeune de Trichoderma harzianum. Après quatre jours d’incubation,
le couvercle des boîtes est rapidement retiré et remplacé par un fond de boîte
contenant du milieu PDA portant un explant d’une préculture de Verticillium. Les
fonds sont rassemblés et entourés avec une bande de parafilm de manière à