Verticillium - Toubkal
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sur milieu PDA et les cultures liquides sur milieu Malt à 2%. Les deux milieux sont<br />
enrichis des mêmes concentrations en sel pré-citées.<br />
L’effet du sel sur le développement de T. harzianum est évalué par :<br />
- La croissance pondérale estimée par le poids sec du mycélium. Ce<br />
dernier est recueilli après filtration sur mousseline des cultures liquides<br />
âgées de deux semaines, puis lavé deux fois avant d’être mis à sécher à<br />
80°C pendant une nuit.<br />
- Le taux de sporulation déterminé après comptage des spores contenues<br />
dans les filtrats de cultures sur cellule de Malassez.<br />
Toutes les cultures sont incubées à l’obscurité et à 25 + 1°C.<br />
2. Mesure du phénomène d’antagonisme<br />
2.1. Capacité de colonisation<br />
Dans des boîtes de Pétri de 90 mm de diamètre contenant 25ml de milieu, on place<br />
deux explants séparés de 40 mm, provenant de cultures jeunes des deux<br />
champignons. La capacité de colonisation de Trichoderma est déterminée par le<br />
rapport C défini par Camporota (1985) comme suit :<br />
C = DT/DE x 100<br />
DT : distance en mm parcourue par le front de croissance de Trichoderma sur l’axe<br />
reliant les deux explants au bout de trois jours<br />
DE : distance séparant les deux explants.<br />
2.2. Antagonisme par antibiose<br />
2.2.1. Action des substances volatiles<br />
Des boîtes de Pétri contenant du milieu PDA additionné de sel à différentes<br />
concentrations sont ensemencées par une bouture de 3mm de diamètre provenant<br />
d’une culture jeune de Trichoderma harzianum. Après quatre jours d’incubation,<br />
le couvercle des boîtes est rapidement retiré et remplacé par un fond de boîte<br />
contenant du milieu PDA portant un explant d’une préculture de <strong>Verticillium</strong>. Les<br />
fonds sont rassemblés et entourés avec une bande de parafilm de manière à